L-WRN
Cell line · Product number 300641
The L-WRN cell line is a murine fibroblast cell line derived from the L cells, which are mouse fibroblasts originally isolated from connective tissue. L-W...
Customization / Recommendations
- L-WRNCell line€550.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
เซลล์ไลน์ L-WRN เป็นเซลล์ไลน์ไฟโบรบลาสต์ของหนูที่ได้มาจากเซลล์ L ซึ่งเป็นไฟโบรบลาสต์ของหนูที่แยกได้จากเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน เซลล์ L-WRN ได้รับการดัดแปลงพันธุกรรมให้แสดงออกของโปรตีน Wnt3a, R-spondin 3 และ Noggin อย่างคงที่ ปัจจัยเหล่านี้มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการเจริญเติบโตและการคงอยู่ของออร์กาโนอยด์ลำไส้และวัฒนธรรมเซลล์ต้นกำเนิดการเพิ่มการแสดงออกของโปรตีนเหล่านี้ช่วยส่งเสริมการเพิ่มจำนวนและการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ต้นกำเนิดในลำไส้ ทำให้เซลล์ L-WRN เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการศึกษาชีววิทยาของลำไส้และการจำลองโรค
นอกเหนือจากการนำไปใช้ในการเพาะเลี้ยงออร์กาโนอยด์แล้ว เซลล์ L-WRN ยังทำหน้าที่เป็นแบบจำลองที่แข็งแกร่งสำหรับการศึกษาเส้นทางการส่งสัญญาณ Wnt อีกด้วย การส่งสัญญาณ Wnt มีบทบาทสำคัญในการควบคุมชะตากรรมของเซลล์ การเพิ่มจำนวน และการเคลื่อนที่ของเซลล์ระหว่างการพัฒนาและในเนื้อเยื่อของผู้ใหญ่ โดยการให้แหล่ง Wnt3a, R-spondin 3 และ Noggin ที่สม่ำเสมอและควบคุมได้ เซลล์ L-WRN จึงช่วยอำนวยความสะดวกในการวิจัยเกี่ยวกับกลไกระดับโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังกระบวนการเหล่านี้นักวิจัยสามารถใช้เซลล์เหล่านี้เพื่อแยกแยะบทบาทของโมเลกุลสัญญาณเหล่านี้ในบริบททางชีววิทยาต่างๆ รวมถึงมะเร็ง การสร้างเนื้อเยื่อใหม่ และชีววิทยาการพัฒนา
โดยรวมแล้ว สายเซลล์ L-WRN เป็นเครื่องมือที่ทรงพลังในการวิจัยทางชีวการแพทย์เนื่องจากความสามารถในการสนับสนุนการเจริญเติบโตของวัฒนธรรมสามมิติที่ซับซ้อนและประโยชน์ในการศึกษาเส้นทางสัญญาณที่สำคัญ บทบาทของมันในการพัฒนาการวิจัยเซลล์ต้นกำเนิดในลำไส้และการมีส่วนร่วมในการทำความเข้าใจการส่งสัญญาณ Wnt ของเราย้ำถึงความสำคัญในสาขาชีววิทยาเซลล์และโมเลกุล
- Tissue
- เนื้อเยื่อเกี่ยวพัน
- Applications
- การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติ
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This murine NIH-3T3-derived cell line (L-WRN) contains expression constructs for Wnt3a, R-spondin-3, and Noggin, including SV40 DNA sequences and dual antibiotic markers (hph and Tn5-neo), enabling secretion of these signaling molecules. The inserts are stably present in NIH-3T3-based cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- ไฟโบรบลาสต์
04Identifiers
- Citation
- แอล-ดับเบิลยูอาร์เอ็น (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300641)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_DA06
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Wnt-3A, R-spondin, noggin
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Breed / subspecies
- ซี3เอช/แอน
- Donor age
- 100 วัน
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
