
- Tissue
- Hypophyse
- Disease
- Néoplasmes de l'hypophyse chez la souris
- Synonyms
- AtT20, AtT 20, ATT-20
Documents
01General information
- Description
La lignée cellulaire AtT-20 est une lignée cellulaire de tumeur hypophysaire murine bien caractérisée, dérivée de cellules de l’hypophyse antérieure. Ces cellules proviennent d’une souche de souris appelée AtT-20/D16v-F2 et sont principalement utilisées pour l’étude de la fonction et de la régulation de l’hypophyse, en particulier en ce qui concerne la synthèse et la sécrétion de l’hormone adrénocorticotrope (ACTH). L’ACTH est essentielle au fonctionnement des glandes surrénales et joue un rôle clé dans la réponse au stress et la régulation métabolique.
Les cellules AtT-20 présentent des caractéristiques typiques importantes pour les études en neuroendocrinologie et en pharmacologie, telles que la production et la sécrétion de la pro-opiomélanocortine (POMC), la molécule précurseur de l’ACTH. Ces cellules réagissent à l’hormone de libération de la corticotropine (CRH) et à d’autres hormones hypothalamiques, ce qui en fait un excellent modèle pour l’étude in vitro de l’axe hypothalamo-hypophyso-surrénalien (HHS). De plus, les cellules AtT-20 peuvent servir à étudier les mécanismes de traitement, d’encapsulation et de sécrétion des hormones peptidiques, grâce à leurs voies de sécrétion bien définies.
En termes d’applications, les cellules AtT-20 ont été utilisées dans diverses études, notamment celles portant sur les profils d’expression génique sous différentes conditions de traitement, les voies de signalisation intracellulaires impliquant l’AMPc et les effets des modifications génétiques sur la sécrétion hormonale. Ces cellules sont également précieuses pour l’évaluation des propriétés pharmacologiques de candidats-médicaments potentiels ciblant les composants de l’axe HPA.
- Tissue
- Hypophyse
- Disease
- Néoplasmes de l'hypophyse chez la souris
- Synonyms
- AtT20
- AtT 20
- ATT-20
02Classification
- Organism
- Mouse
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Petites cellules arrondies
04Identifiers
- Citation
- AtT-20 (numéro de catalogue Cytion 305161)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_2300
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Hormone adrénocorticotrope (ACTH)
06Handling and culture
- Culture medium
- Milieu F12K de Ham, contenant : 2,0 mM de L-glutamine, 2,0 mM de pyruvate de sodium, 2,5 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820608a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter au milieu 2,5 % de FBS et 15 % de sérum de cheval
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Entretenir les cultures en ajoutant ou en remplaçant périodiquement le milieu de culture. Démarrer les cultures à une densité de 5 × 10⁵ cellules/ml et maintenir la concentration cellulaire dans une fourchette comprise entre 3 × 10⁵ et 1 × 10⁶ cellules/ml pour une croissance optimale.
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Breed / subspecies
- LAF1
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes