
- Tissue
- היפופיזה
- Disease
- גידולים בבלוטת יותרת המוח של העכבר
- Synonyms
- AtT20, AtT 20, ATT-20
Documents
01General information
- Description
קו התאים AtT-20 הוא קו תאים מאובחן היטב של גידול בבלוטת יותרת המוח של עכברים, שמקורו בתאי יותרת המוח הקדמית. תאים אלה מקורם בזן עכברים המכונה AtT-20/D16v-F2, והם משמשים בעיקר לחקר תפקוד וויסות בלוטת יותרת המוח, עם דגש מיוחד על סינתזה והפרשה של הורמון אדרנוקורטיקוטרופי (ACTH). ה-ACTH חיוני לתפקוד בלוטת יותרת הכליה, והוא גורם מרכזי בתגובת הגוף למתח ובוויסות חילוף החומרים.
תאי AtT-20 מציגים מאפיינים טיפוסיים החשובים למחקרים בנוירואנדוקרינולוגיה ופרמקולוגיה, כגון ייצור והפרשה של פרו-אופיומלנוקורטין (POMC), המולקולה הקודמת ל-ACTH. התאים מגיבים להורמון משחרר קורטיקוטרופין (CRH) ולהורמונים היפותלמיים אחרים, מה שהופך אותם למודל מצוין לחקר ציר ההיפותלמוס-היפופיזה-אדרנל (HPA) במבחנה. בנוסף, תאי AtT-20 יכולים לשמש לחקר המנגנונים של עיבוד, אריזה והפרשת הורמוני פפטיד, בזכות מסלולי ההפרשה המוגדרים היטב שלהם.
מבחינת יישומים, תאי AtT-20 שימשו במחקרים שונים, כולל מחקרים שהתמקדו בפרופילי ביטוי גנים בתנאי טיפול שונים, מסלולי איתות תאיים המעורבים ב-cAMP והשפעות של שינויים גנטיים על הפרשת הורמונים. תאים אלה חשובים גם בהערכת התכונות הפרמקולוגיות של תרופות פוטנציאליות המיועדות לרכיבי ציר HPA.
- Tissue
- היפופיזה
- Disease
- גידולים בבלוטת יותרת המוח של העכבר
- Synonyms
- AtT20
- AtT 20
- ATT-20
02Classification
- Organism
- Mouse
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- תאים קטנים ומעוגלים
04Identifiers
- Citation
- AtT-20 (מספר קטלוג Cytion 305161)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_2300
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- הורמון אדרנוקורטיקוטרופי (ACTH)
06Handling and culture
- Culture medium
- Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamine, w: 2.0 mM Sodium pyruvate, w: 2.5 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820608a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 2.5% FBS, 15% סרום סוסים
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- שמרו על התרבויות על ידי הוספה או החלפה תקופתית של המצע. התחילו את התרבויות בצפיפות של 5 x 105 תאים/מ"ל ושמרו על ריכוז התאים בטווח של 3 x 105 עד 1 x 106 תאים/מ"ל לצורך צמיחה מיטבית.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Breed / subspecies
- LAF1
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes