AtT-20

A linhagem celular AtT-20 é uma linhagem celular de tumor hipofisário de camundongo bem caracterizada, derivada de células da hipófise anterior. Essas células têm origem em uma linhagem de camundongos conhecida como AtT-20/D16v-F2 e são utilizadas principalmente para o estudo da função e regulação da hipófise, com foco especial na síntese e secreção do hormônio adrenocorticotrófico (ACTH). O ACTH é crucial para o funcionamento das glândulas supra-renais e desempenha um papel fundamental na resposta ao estresse e na regulação metabólica.

As células AtT-20 apresentam características típicas relevantes para estudos em neuroendocrinologia e farmacologia, como a produção e secreção de pro-opiomelanocortina (POMC), a molécula precursora do ACTH. As células respondem ao hormônio liberador de corticotropina (CRH) e a outros hormônios hipotalâmicos, o que as torna um excelente modelo para a exploração do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HPA) in vitro. Além disso, as células AtT-20 podem ser utilizadas para investigar os mecanismos de processamento, empacotamento e secreção de hormônios peptídicos, devido às suas vias secretoras bem definidas.

Em termos de aplicações, as células AtT-20 têm sido utilizadas em diversos estudos, incluindo aqueles focados em perfis de expressão gênica sob diferentes condições de tratamento, vias de sinalização intracelulares envolvendo AMPc e os efeitos de modificações genéticas na secreção hormonal. Essas células também são valiosas na avaliação das propriedades farmacológicas de potenciais candidatos a medicamentos direcionados aos componentes do eixo HPA.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.