C4-2

La lignée cellulaire C4-2 est un modèle de cancer de la prostate humain indépendant des androgènes, dérivé de la lignée cellulaire parentale LNCaP. Elle a été établie au moyen d’un processus de sélection in vivo par étapes, impliquant la co-injection de cellules LNCaP et de cellules stromales osseuses humaines (cellules MS) chez des souris immunodéficientes castrées, ce qui a conduit à l’émergence de tumeurs insensibles aux androgènes. La sous-lignée C4-2 a été spécifiquement dérivée de la variante C4 après des passages supplémentaires chez des hôtes castrés, et elle conserve la capacité de croître et de former des tumeurs dans des conditions de carence en androgènes sans avoir besoin d’un soutien stromal.

Les cellules C4-2 maintiennent la production de l’antigène prostatique spécifique (PSA) et l’expression du récepteur des androgènes (AR), y compris la mutation ponctuelle caractéristique T877A de l’AR héritée de la lignée LNCaP, mais présentent une réactivité réduite aux androgènes par rapport à la lignée parentale. Alors que les cellules LNCaP ont besoin d’androgènes pour croître, les cellules C4-2 prolifèrent dans des milieux appauvris en androgènes et continuent d’exprimer le PSA ainsi que les gènes régulés par l’AR, ce qui en fait un modèle robuste pour le cancer de la prostate résistant à la castration (CRPC). In vitro, les cellules C4-2 se développent plus rapidement que les cellules LNCaP dans des conditions de culture standard, et elles présentent également une tumorigénicité accrue in vivo. Lorsqu’elles sont injectées par voie sous-cutanée chez des souris immunodéprimées, les cellules C4-2 forment facilement des tumeurs, une caractéristique qui contraste avec le potentiel tumorigène plus lent ou moins constant des cellules LNCaP.

Le modèle C4-2 a été largement utilisé pour étudier les mécanismes de résistance à la thérapie de privation androgénique (TPA), le rôle du métabolisme androgénique intracrine et les voies moléculaires sous-jacentes à la progression du CRPC. Elles conservent l’expression de l’antigène membranaire spécifique de la prostate (PSMA), bien qu’à des niveaux inférieurs à ceux des cellules LNCaP, et présentent des réponses uniques à la stimulation androgénique et aux traitements antiandrogéniques. Ces caractéristiques font des cellules C4-2 un modèle de référence pour l’évaluation de nouveaux traitements ciblant le cancer de la prostate avancé.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.