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Cellules HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry
Tissue
Endocervix
Disease
Adénocarcinome
Metastatic site
Site de la tumeur primaire (endocervix)
Synonyms
HK-ZFN-AURKB-mEGFP, ZFN-INCENP-mCherry

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Cellules HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry

Cell line · Product number 300270

The HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry cell line, derived from HeLa Kyoto cells, is a specialized model used in cellular biology research. It has been ...

US$800.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

La lignée cellulaire HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry, dérivée de cellules HeLa Kyoto, est un modèle spécialisé utilisé dans la recherche en biologie cellulaire. Elle a été génétiquement modifiée pour exprimer la kinase Aurora B (AURKB) marquée par la protéine fluorescente verte améliorée monomérique (mEGFP) et la protéine du centromère interne (INCENP) marquée par la protéine mCherry. Ces modifications permettent aux chercheurs de suivre la dynamique et les interactions de ces protéines au cours de la division cellulaire. La kinase Aurora B est essentielle à la ségrégation chromosomique et à la cytokinèse, tandis que l’INCENP est un composant essentiel du complexe passager chromosomique (CPC), qui coordonne la progression mitotique.

Ce double marquage fluorescent constitue un outil puissant pour l’imagerie de cellules vivantes, permettant une étude détaillée de la distribution des protéines au cours du cycle cellulaire. La lignée cellulaire HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry est précieuse pour la recherche sur la régulation mitotique, la stabilité chromosomique et le point de contrôle mitotique. La précision des nucléases à doigt de zinc (ZFN) utilisées pour les modifications génétiques garantit l’exactitude de ce modèle, ce qui le rend idéal pour des études de haute fidélité en biologie du cancer et en développement thérapeutique.

Tissue
Endocervix
Disease
Adénocarcinome
Metastatic site
Site de la tumeur primaire (endocervix)
Applications
Biologie du complexe chromosomique passager (CPC); dynamique de la kinase Aurora B et de l’INCENP; imagerie de la mitose en cellules vivantes; suivi par fluorescence bicolore; ségrégation chromosomique; cytokinèse; point de contrôle mitotique; validation de l’édition génomique par ZFN
Synonyms
  • HK-ZFN-AURKB-mEGFP
  • ZFN-INCENP-mCherry

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HeLa Kyoto dual-color line contains ZFN-engineered AURKB-mEGFP and INCENP-mCherry constructs for chromosome passenger complex studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Cellules de type épithélial présentant une forme de pierre en mosaïque
Cell type
Cellules épithéliales

04Identifiers

Citation
HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry (numéro de catalogue Cytion 300270)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_VL14
Depositor
Le laboratoire Ellenberg (EMBL)

05Expression and susceptibility

Products
EGFP (protéine fluorescente verte améliorée)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
30 ans
Ethnicity
Afro-Américain