- Tissue
- צוואר הרחם
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Metastatic site
- מיקום הגידול הראשוני (חלקו הפנימי של צוואר הרחם)
- Synonyms
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP, ZFN-INCENP-mCherry
Documents
HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry תאים
Cell line · Product number 300270
The HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry cell line, derived from HeLa Kyoto cells, is a specialized model used in cellular biology research. It has been ...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry, שמקורו בתאי HeLa Kyoto, הוא מודל ייעודי המשמש במחקר בביולוגיה תאית. הוא עבר הנדסה גנטית כדי לבטא את Aurora B kinase (AURKB) המסומן בחלבון פלואורסצנטי ירוק משופר מונומרי (mEGFP) ואת Inner Centromere Protein (INCENP) המסומן ב-mCherry. שינויים אלה מאפשרים לחוקרים לעקוב אחר הדינמיקה והאינטראקציות של חלבונים אלה במהלך חלוקת התאים. Aurora B kinase חיוני להפרדת כרומוזומים וציטוקינזה, בעוד INCENP הוא מרכיב קריטי ב-Chromosomal Passenger Complex (CPC), המתאם את התקדמות המיטוזה.
תיוג פלואורסצנטי כפול זה מספק כלי רב עוצמה להדמיית תאים חיים, ומאפשר מחקר מפורט של התפלגות החלבונים במהלך מחזור התא. קו התאים HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry הוא בעל ערך רב למחקר של ויסות מיטוטי, יציבות כרומוזומלית ונקודת הבקרה המיטוטית. הדיוק של נוקלאזות אצבעות אבץ (ZFN) המשמשות לשינויים גנטיים מבטיח את הדיוק של מודל זה, מה שהופך אותו לאידיאלי למחקרים ברמת דיוק גבוהה בביולוגיה של הסרטן ובפיתוח טיפולים.
- Tissue
- צוואר הרחם
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Metastatic site
- מיקום הגידול הראשוני (חלקו הפנימי של צוואר הרחם)
- Applications
- ביולוגיה של קומפלקס הנוסע הכרומוזומלי (CPC); הדינמיקה של קינאז Aurora B ו-INCENP; הדמיה של מיטוזה בתאים חיים; מעקב פלואורסצנטי דו-צבעוני; הפרדת כרומוזומים; ציטוקינזה; נקודת בקרה מיטוטית; אימות עריכת גנום באמצעות ZFN
- Synonyms
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP
- ZFN-INCENP-mCherry
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This HeLa Kyoto dual-color line contains ZFN-engineered AURKB-mEGFP and INCENP-mCherry constructs for chromosome passenger complex studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- תאים דמויי אפיתל בצורת אבן פסיפס
- Cell type
- תאי אפיתל
04Identifiers
- Citation
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry (מספר קטלוגי Cytion 300270)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VL14
- Depositor
- מעבדת אלנברג (EMBL)
05Expression and susceptibility
- Products
- EGFP (חלבון פלואורסצנטי ירוק משופר)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 30 שנה
- Ethnicity
- אפרו-אמריקאי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Third-party agreements apply
- Yes