- Tissue
- ปากมดลูกส่วนใน
- Disease
- อะดีโนคาร์ซิโนมา
- Metastatic site
- ตำแหน่งของเนื้องอกหลัก (ปากมดลูกส่วนใน)
- Synonyms
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP, ZFN-INCENP-mCherry
Documents
เซลล์ HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry
Cell line · Product number 300270
The HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry cell line, derived from HeLa Kyoto cells, is a specialized model used in cellular biology research. It has been ...
Customization / Recommendations
- เซลล์ HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherryCell line€800.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
สายเซลล์ HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry ซึ่งพัฒนาขึ้นจากเซลล์ HeLa Kyoto เป็นแบบจำลองเฉพาะทางที่ใช้ในงานวิจัยชีววิทยาเซลล์ สายเซลล์นี้ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมให้แสดงออกโปรตีน Aurora B kinase (AURKB) ที่ติดแท็กด้วยโปรตีนเรืองแสงสีเขียวชนิดโมโนเมอร์ที่เพิ่มประสิทธิภาพ (mEGFP) และโปรตีน Inner Centromere Protein (INCENP) ที่ติดแท็กด้วย mCherryการปรับเปลี่ยนเหล่านี้ช่วยให้นักวิจัยสามารถติดตามพลวัตและปฏิสัมพันธ์ของโปรตีนเหล่านี้ในระหว่างการแบ่งเซลล์ได้ Aurora B kinase มีความสำคัญต่อการแยกโครโมโซมและการแบ่งเซลล์ไซโทไคเนซิส ในขณะที่ INCENP เป็นองค์ประกอบสำคัญของ Chromosomal Passenger Complex (CPC) ซึ่งประสานการก้าวหน้าของกระบวนการไมโทซิส
การติดแท็กฟลูออเรสเซนต์แบบคู่ให้เครื่องมือที่ทรงพลังสำหรับการถ่ายภาพเซลล์ที่มีชีวิต ช่วยให้สามารถศึกษาการกระจายตัวของโปรตีนในระหว่างวัฏจักรของเซลล์ได้อย่างละเอียดสายพันธุ์เซลล์ HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry มีคุณค่าในการวิจัยการควบคุมการแบ่งเซลล์แบบไมโทซิส ความเสถียรของโครโมโซม และจุดตรวจสอบการแบ่งเซลล์ ความแม่นยำของนิวคลีเอสซิงค์ฟิงเกอร์ (ZFNs) ที่ใช้ในการดัดแปลงพันธุกรรมทำให้มั่นใจได้ว่าโมเดลนี้มีความแม่นยำสูง เหมาะสำหรับการศึกษาที่มีความเที่ยงตรงสูงในด้านชีววิทยาของมะเร็งและการพัฒนาการรักษา
- Tissue
- ปากมดลูกส่วนใน
- Disease
- อะดีโนคาร์ซิโนมา
- Metastatic site
- ตำแหน่งของเนื้องอกหลัก (ปากมดลูกส่วนใน)
- Applications
- ชีววิทยาของคอมเพล็กซ์ผู้โดยสารโครโมโซม (CPC); ไดนามิกส์ของ Aurora B kinase และ INCENP; การถ่ายภาพไมโทซิสในเซลล์มีชีวิต; การติดตามด้วยฟลูออเรสเซนต์สองสี; การแยกโครโมโซม; ไซโตคีเนซิส; จุดตรวจสอบไมโทซิส; การตรวจสอบความถูกต้องของการแก้ไขจีโนมด้วย ZFN
- Synonyms
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP
- ZFN-INCENP-mCherry
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This HeLa Kyoto dual-color line contains ZFN-engineered AURKB-mEGFP and INCENP-mCherry constructs for chromosome passenger complex studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- เซลล์คล้ายเยื่อบุผิวที่มีรูปร่างเป็นหินแบบโมเสก
- Cell type
- เซลล์เยื่อบุผิว
04Identifiers
- Citation
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300270)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VL14
- Depositor
- ห้องปฏิบัติการเอลเลนเบิร์ก (EMBL)
05Expression and susceptibility
- Products
- EGFP (โปรตีนเรืองแสงสีเขียวชนิดปรับปรุง)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Donor age
- 30 ปี
- Ethnicity
- แอฟริกันอเมริกัน
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Third-party agreements apply
- Yes