- Tissue
- 宫颈内口
- Disease
- 腺癌
- Metastatic site
- 原发肿瘤部位（宫颈管）
- Synonyms
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP, ZFN-INCENP-mCherry
Documents
HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry 细胞
Cell line · Product number 300270
The HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry cell line, derived from HeLa Kyoto cells, is a specialized model used in cellular biology research. It has been ...
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01General information
- Description
HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry 细胞系源自 HeLa Kyoto 细胞，是细胞生物学研究中使用的一种特殊模型。该细胞系经过基因工程改造，表达标记有单体增强绿色荧光蛋白（mEGFP）的极光 B 激酶（AURKB）和标记有 mCherry 的内中心粒蛋白（INCENP）。通过这些修饰，研究人员可以跟踪这些蛋白在细胞分裂过程中的动态和相互作用。极光 B 激酶对染色体分离和细胞分裂至关重要，而 INCENP 则是染色体乘客复合体（CPC）的重要组成部分，能协调有丝分裂的进程。
这种双重荧光标记为活细胞成像提供了强大的工具，可以详细研究蛋白质在细胞周期中的分布情况。HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry 细胞系对研究有丝分裂调控、染色体稳定性和有丝分裂检查点非常有价值。用于基因修饰的锌指核酸酶（ZFN）的精确性确保了该模型的准确性，使其成为癌症生物学和治疗开发领域高保真研究的理想选择。
- Tissue
- 宫颈内口
- Disease
- 腺癌
- Metastatic site
- 原发肿瘤部位（宫颈管）
- Applications
- 染色体乘客复合体（CPC）生物学；Aurora B激酶与INCENP的动态变化；活细胞有丝分裂成像；双色荧光追踪；染色体分离；细胞质分裂；有丝分裂检查点；ZFN基因组编辑验证
- Synonyms
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP
- ZFN-INCENP-mCherry
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This HeLa Kyoto dual-color line contains ZFN-engineered AURKB-mEGFP and INCENP-mCherry constructs for chromosome passenger complex studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 具有镶嵌石形状的上皮样细胞
- Cell type
- 上皮细胞
04Identifiers
- Citation
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry （Cytion 目录号 300270）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VL14
- Depositor
- 艾伦伯格实验室（EMBL）
05Expression and susceptibility
- Products
- EGFP（增强型绿色荧光蛋白）
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM，w：4.5 克/升葡萄糖，w：4 毫摩尔 L-谷氨酰胺，w：3.7 克/升 NaHCO3，w：1.0 毫摩尔丙酮酸钠（Cytion 编号 820300a）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 30年
- Ethnicity
- 非洲裔美国人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
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- Yes