Cellules HK/FDC immortalisées

La lignée cellulaire immortalisée HK/FDC est un dérivé génétiquement stabilisé des cellules d’origine de type cellules dendritiques folliculaires HK; elle conserve les principales caractéristiques phénotypiques et fonctionnelles de ces dernières tout en permettant une propagation prolongée, sans les limites liées à la sénescence de la culture parentale. L’immortalisation a été obtenue grâce à l’introduction d’éléments génétiques définis qui contournent l’arrêt réplicatif, facilitant ainsi la réalisation d’études à long terme cohérentes sur la biologie des centres germinatifs et les interactions entre les cellules FDC et les lymphocytes B.

Les cellules HK/FDC immortalisées conservent la capacité de se lier aux cellules B des centres germinatifs et de les co-stimuler, de favoriser leur survie et d’améliorer leur prolifération en présence de signaux tels que la liaison à l’anti-IgM ou au CD40. Il est important de noter qu’elles continuent d’exprimer les molécules d’adhésion et les facteurs de co-stimulation caractéristiques des FDC, notamment la VCAM-1 et l’ICAM-1, et qu’elles sécrètent des médiateurs solubles qui imitent le soutien microenvironnemental fourni par les FDC natives. Ces propriétés font de la lignée HK/FDC immortalisée un modèle robuste et reproductible pour l’étude des mécanismes cellulaires et moléculaires régissant la maturation, la sélection par affinité et la survie des cellules B au sein du centre germinatif.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.