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CHO-CD20
Tissue
Ovaire
Disease
Ovaires de hamster chinois, non néoplasiques; modifiés génétiquement pour l'expression de CD20 (MS4A1) en surface

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CHO-CD20

Cell line · Product number 305976

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

US$1,900.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

Avertissement : Les prix indiqués pour les lignées cellulaires s’adressent exclusivement aux clients du milieu universitaire ou à but non lucratif. Pour les entités commerciales, le prix est d’environ 6 250 €.
Si vous représentez une entité commerciale ou si vous ne savez pas à quelle catégorie vous appartenez, veuillez nous contacter.


Les cellules CHO-CD20 sont des cellules d’ovaire de hamster chinois (CHO) recombinantes, modifiées pour exprimer de manière stable le CD20 humain (MS4A1), une phosphoprotéine transmembranaire non glycosylée que l’on retrouve principalement à la surface des lymphocytes B. Le CD20 intervient dans l’activation, la prolifération, la signalisation calcique et la différenciation des cellules B; il est largement reconnu comme une cible thérapeutique importante dans les tumeurs malignes à cellules B, telles que le lymphome non hodgkinien, la leucémie lymphoïde chronique et certaines maladies auto-immunes. Les modèles CHO-CD20 stables permettent une expression contrôlée et reproductible de l’antigène pour la caractérisation in vitro des traitements ciblant le CD20 et des mécanismes effecteurs immunitaires.

Les cellules CHO-CD20 sont largement utilisées dans le développement et l’évaluation d’anticorps monoclonaux, de conjugués anticorps-médicaments, d’anticorps bispécifiques et de thérapies cellulaires immunitaires modifiées dirigées contre le CD20. Ces cellules permettent l’analyse quantitative de l’affinité de liaison des anticorps, de l’occupation des récepteurs, du comportement d’internalisation, de la cytotoxicité dépendante du complément (CDC), de la cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC) et de l’activation immunitaire médiée par le Fc. Elles sont également largement utilisées dans le développement de tests par cytométrie en flux, la cartographie des épitopes, les essais de puissance et les flux de travail de criblage à haut débit. Comme les cellules CHO présentent des caractéristiques de croissance robustes et une expression endogène limitée des antigènes immunitaires humains, elles offrent un contexte homogène pour l’expression recombinante du CD20 et la normalisation des tests.

Tissue
Ovaire
Disease
Ovaires de hamster chinois, non néoplasiques; modifiés génétiquement pour l'expression de CD20 (MS4A1) en surface
Applications
Dépistage d’anticorps; tests ADCC/CDC; développement de traitements anti-CD20; recherche sur les tumeurs malignes à cellules B; cytométrie en flux

02Classification

Organism
Chinese hamster
Sex
Female
Growth properties
Adherent and suspension
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This CHO cell line contains a CD20 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type épithélial
Cell type
Cellule épithéliale de l'ovaire
Doubling time
environ 14 à 16 heures

04Identifiers

Citation
CHO-CD20 (numéro de catalogue Cytion 305976)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_A8V4

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
CD20

06Handling and culture

Culture medium

Pour les cultures adhérentes : DMEM : Ham’s F12 (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, 0,5 mM de pyruvate de sodium, 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a)

Pour les cultures en suspension : milieu de croissance CHO A (de InSCREENeX; numéro de catalogue InSCREENeX INS-ME-1039)

Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Pour les cultures adhérentes : compléter le milieu avec 5 % de FBS. Ajouter du Geneticin (G418-Sulfat) afin d’obtenir une concentration finale de 0,5 mg/mL.
Dissociation reagent
Pour les cultures adhérentes : trypsine-EDTA
Subculturing
Pour une culture cellulaire adhérente de routine : Aspirez l’ancien milieu de culture des cellules adhérentes, puis lavez-les avec du PBS afin d’éliminer tout résidu de milieu. Après avoir aspiré le PBS, ajoutez le volume approprié de solution de trypsine/EDTA en fonction de la taille du récipient de culture (p. ex., 1 ml pour un flacon T25, 3 ml pour un flacon T75) et incubez à température ambiante ou à 37 °C pendant 5 à 10 minutes, ou jusqu’à ce que les cellules se détachent. Surveillez le détachement au microscope et tapotez doucement le récipient si nécessaire pour libérer les cellules. Une fois les cellules détachées, ajoutez du milieu complet pour inactiver la trypsine/EDTA, remettez délicatement les cellules en suspension, puis transférez une aliquote de la suspension cellulaire dans un nouveau récipient de culture contenant du milieu frais. Placez le récipient dans un incubateur réglé à 37 °C avec 5 % de CO₂, et changez le milieu tous les 2 à 3 jours.
Split ratio
1 à 5
Seeding density
de 2 à 5 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Post-thaw recovery

Après la décongélation, divisez les cellules dans un rapport de 1:2 à 1:3 dans des flacons T25 et laissez-les se remettre du processus de congélation et adhérer (pour les cultures adhérentes) pendant au moins 24 heures.

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
Adulte