Prejsť na obsah
CHO-CD20
Tkanivo
Vaječník
Choroba
Vaječník čínskeho škrečka, nenádorový; geneticky modifikovaný na povrchovú expresiu CD20 (MS4A1)

Dokumenty

CHO-CD20

Cell line · Číslo výrobku 305976

Upozornenie: Ceny uvedené pri bunkových líniách platia výlučne pre akademických a neziskových zákazníkov. Pre komerčné subjekty platia ceny...

€1,900.00bez DPH a poštovného
Na objednávku
1

01Všeobecné informácie

Popis

Upozornenie: Uvedené ceny buniek platia výlučne pre akademických a neziskových zákazníkov. Pre komerčné subjekty je cena približne 6 250 €.
Ak zastupujete komerčný subjekt alebo si nie ste istí, do ktorej kategórie patríte, prosím, kontaktujte nás.


Bunky CHO-CD20 sú rekombinantné bunky vaječníkov čínskeho škrečka (CHO), ktoré boli geneticky upravené tak, aby stabilne exprimovali ľudský CD20 (MS4A1), neglykozilovaný transmembránový fosfoproteín nachádzajúci sa primárne na povrchu B-lymfocytov. CD20 sa podieľa na aktivácii, proliferácii, vápnikovej signalizácii a diferenciácii B-buniek a je široko uznávaný ako dôležitý terapeutický cieľ pri malignitách B-buniek, ako sú non-Hodgkinov lymfóm, chronická lymfocytová leukémia a niektoré autoimunitné poruchy. Stabilné modely CHO-CD20 poskytujú kontrolovanú a reprodukovateľnú expresiu antigénu pre in vitro charakterizáciu liečiv zameraných na CD20 a mechanizmov imunitných efektorov.

Bunky CHO-CD20 sa vo veľkej miere používajú pri vývoji a hodnotení monoklonálnych protilátok, konjugátov protilátok a liekov, bispecifických protilátok a inžinierskych imunoterapií zameraných proti CD20. Tieto bunky podporujú kvantitatívnu analýzu afinity väzby protilátok, obsadenia receptora, správania pri internalizácii, komplementovo-závislej cytotoxicity (CDC), protilátkovo-závislej bunkovej cytotoxicity (ADCC) a imunitnej aktivácie sprostredkovanej Fc. Široko sa tiež využívajú pri vývoji testov prietokovej cytometrie, mapovaní epitopov, testovaní účinnosti a pracovných postupoch vysokokapacitného skríningu. Keďže bunky CHO vykazujú robustné rastové charakteristiky a obmedzenú endogénnu expresiu ľudských imunitných antigénov, poskytujú konzistentné pozadie pre expresiu rekombinantného CD20 a štandardizáciu testov.

Tkanivo
Vaječník
Choroba
Vaječník čínskeho škrečka, nenádorový; geneticky modifikovaný na povrchovú expresiu CD20 (MS4A1)
Aplikácie
Skríning protilátok; testy ADCC/CDC; vývoj liečby zameranej proti CD20; výskum malignít B-buniek; prietoková cytometria

02Klasifikácia

Organizmus
Čínsky škrečok
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Adhézia a suspenzia
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This CHO cell line contains a CD20 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Epiteliálna bunka vaječníka
Doba zdvojnásobenia
cca 14–16 hodín

04Identifikátory

Citácia
CHO-CD20 (katalógové číslo Cytion 305976)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_A8V4

05Prejav a náchylnosť

Exprimované receptory
CD20

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium

Pre adherentné kultúry: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)

Pre suspenzné kultúry: Rastové médium CHO A (od spoločnosti InSCREENeX; katalógové číslo spoločnosti InSCREENeX INS-ME-1039)

Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Pre adherentné kultúry: Doplňte médium o 5 % FBS. Pridajte geneticín (G418-Sulfat) na dosiahnutie konečnej koncentrácie 0,5 mg/ml.
Disociačné činidlo
Pre adherentné kultúry: Trypsín-EDTA
Rozmnožovanie kultúr
Na bežné adherentné bunkové kultúry: Odstráňte staré kultivačné médium z adherentných buniek a premyte ich PBS, aby ste odstránili zvyšné médium. Po odsatí PBS pridajte príslušný objem roztoku trypsínu/EDTA podľa veľkosti kultivačnej nádoby (napr. 1 ml pre banku T25, 3 ml pre banku T75) a inkubujte pri izbovej teplote alebo 37 °C 5 - 10 minút, alebo kým sa bunky neoddelia. Oddeľovanie sledujte pod mikroskopom a v prípade potreby jemne poklepte na nádobu, aby sa bunky uvoľnili. Po oddelení pridajte kompletné médium na inaktiváciu trypsínu/EDTA, jemne resuspendujte bunky a alikvotnú časť bunkovej suspenzie preneste do novej kultivačnej nádoby obsahujúcej čerstvé médium. Nádobu umiestnite do inkubátora nastaveného na 37 °C s 5 %CO2 a médium vymieňajte každé 2 - 3 dni.
Pomer rozdelenia
1 až 5
Hustota výsevu
2 až 5 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení

Po rozmrazení rozdeľte bunky v pomere 1:2 až 1:3 do banky T25 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazovania a priľnúť (v prípade adhezívnych kultúr) aspoň 24 hodín.

Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
Dospelí