Skip to content
CHO-CD20
Tissue
รังไข่
Disease
เซลล์รังไข่หนูแฮมสเตอร์จีน, ไม่ใช่เนื้องอก; ตัดต่อพันธุกรรมเพื่อการแสดงออกของ CD20 (MS4A1) บนผิวเซลล์

Documents

CHO-CD20

Cell line · Product number 305976

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

€1,900.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

ข้อจำกัดความรับผิดชอบ: ราคาที่แสดงสำหรับสายเซลล์เป็นราคาสำหรับลูกค้าในสถาบันการศึกษา/ไม่แสวงหากำไรเท่านั้น สำหรับหน่วยงานเชิงพาณิชย์ ราคาอยู่ที่ประมาณ €6,250
หากท่านเป็นตัวแทนของหน่วยงานเชิงพาณิชย์ หรือไม่แน่ใจว่าอยู่ในหมวดหมู่ใด กรุณา ติดต่อเรา


เซลล์ CHO-CD20 เป็นเซลล์รังไข่แฮมสเตอร์จีน (CHO) ที่ถูกดัดแปลงพันธุกรรมให้แสดงออกโปรตีน CD20 (MS4A1) ของมนุษย์อย่างคงที่ ซึ่งเป็นโปรตีนฟอสโฟทรานส์เมมเบรนที่ไม่มีการเติมน้ำตาล พบได้บนผิวเซลล์ของลิมโฟไซต์บีเป็นหลัก CD20 มีบทบาทในการกระตุ้น การเพิ่มจำนวน การส่งสัญญาณแคลเซียม และการเปลี่ยนแปลงของเซลล์บี และได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวางว่าเป็นเป้าหมายการรักษาที่สำคัญในมะเร็งเซลล์บี เช่น มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิดนอน-ฮอดจ์กิน มะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเรื้อรัง และโรคภูมิคุ้มกันทำลายตนเองบางชนิด โมเดล CHO-CD20 ที่เสถียรให้การแสดงออกของแอนติเจนที่ควบคุมได้และทำซ้ำได้สำหรับการวิเคราะห์ลักษณะของยาที่มุ่งเป้าไปที่ CD20 และกลไกการทำงานของระบบภูมิคุ้มกันในหลอดทดลอง

เซลล์ CHO-CD20 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการพัฒนาและประเมินประสิทธิภาพของแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอล, คอนจูเกตของแอนติบอดีกับยา, แอนติบอดีชนิดสองเป้า, และการบำบัดด้วยเซลล์ภูมิคุ้มกันที่ถูกดัดแปลงเพื่อต่อต้าน CD20 เซลล์เหล่านี้รองรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณของความสัมพันธ์ระหว่างแอนติบอดีกับแอนติเจน, การจับยึดของตัวรับ, พฤติกรรมการนำเข้าสู่เซลล์, ความเป็นพิษต่อเซลล์ที่ขึ้นกับระบบคอมเพล็กเมนต์ (CDC), ความเป็นพิษต่อเซลล์ที่ขึ้นกับแอนติบอดี (ADCC), และการกระตุ้นภูมิคุ้มกันที่ผ่านทางการทำงานของ Fc นอกจากนี้ยังมีการนำไปใช้อย่างแพร่หลายในการพัฒนาการทดสอบทางโฟลไซโตเมทรี การทำแผนที่เอพิโทป การทดสอบความแรงของยา และกระบวนการคัดกรองแบบความจุสูง เนื่องจากเซลล์ CHO มีลักษณะการเจริญเติบโตที่แข็งแรงและการแสดงออกของแอนติเจนภูมิคุ้มกันของมนุษย์ในปริมาณที่จำกัด จึงให้พื้นหลังที่สม่ำเสมอสำหรับการแสดงออกของ CD20 ที่สร้างขึ้นใหม่และการมาตรฐานการทดสอบ

Tissue
รังไข่
Disease
เซลล์รังไข่หนูแฮมสเตอร์จีน, ไม่ใช่เนื้องอก; ตัดต่อพันธุกรรมเพื่อการแสดงออกของ CD20 (MS4A1) บนผิวเซลล์
Applications
การตรวจคัดกรองแอนติบอดี; การทดสอบ ADCC/CDC; การพัฒนาการบำบัดด้วยแอนติบอดีต่อ CD20; การวิจัยมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดบี; การวัดด้วยโฟลไซโตเมทรี

02Classification

Organism
Chinese hamster
Sex
Female
Growth properties
Adherent and suspension
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This CHO cell line contains a CD20 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิวของรังไข่
Doubling time
ประมาณ 14-16 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
CHO-CD20 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305976)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_A8V4

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
ซีดี20

06Handling and culture

Culture medium

สำหรับวัฒนธรรมที่เกาะติด: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)

สำหรับวัฒนธรรมแบบแขวนลอย: สารอาหารสำหรับเพาะเลี้ยงเซลล์ CHO A (จาก InSCREENeX; หมายเลขแคตตาล็อก InSCREENeX INS-ME-1039)

Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
สำหรับวัฒนธรรมที่เกาะติด: เสริมอาหารด้วย FBS 5% เพิ่ม Geneticin (G418-Sulfat) เพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้าย 0.5 มก./มล.
Dissociation reagent
สำหรับวัฒนธรรมที่เกาะติด: ไทพ์ซิน-EDTA
Subculturing
สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่เกาะติดแบบปกติ: ดูดสกัดน้ำเลี้ยงเก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติด และล้างเซลล์ด้วย PBS เพื่อกำจัดน้ำเลี้ยงที่เหลืออยู่หลังจากดูด PBS ออกแล้ว ให้เติมสารละลาย Trypsin/EDTA ในปริมาณที่เหมาะสมตามขนาดของภาชนะเพาะเลี้ยง (เช่น 1 มล. สำหรับขวด T25, 3 มล. สำหรับขวด T75) และทำการบ่มที่อุณหภูมิห้องหรือ 37°C เป็นเวลา 5-10 นาที หรือจนกว่าเซลล์จะหลุดออกจากผนังภาชนะสังเกตการหลุดลอกของเซลล์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ และเคาะภาชนะเบา ๆ หากจำเป็นเพื่อปล่อยเซลล์ เมื่อเซลล์หลุดออกแล้ว ให้เติมอาหารเลี้ยงเซลล์แบบครบถ้วนเพื่อหยุดการทำงานของ Trypsin/EDTA คนเซลล์เบา ๆ ให้เซลล์กระจายตัวดี แล้วแบ่งเซลล์แขวนลอยใส่หลอดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด วางหลอดในตู้บ่มที่อุณหภูมิ 37°Cพร้อมก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5% และเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ทุก 2-3 วัน
Split ratio
1 ถึง 5
Seeding density
2 ถึง 5 x 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery

หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว แบ่งเซลล์ในอัตราส่วน 1:2 ถึง 1:3 ลงในขวดเลี้ยงเชื้อ T25 และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะ (สำหรับเซลล์ที่เกาะติด) เป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
ผู้ใหญ่

You may also need