ETK-1

ETK-1 est une lignée cellulaire de cholangiocarcinome intrahépatique humain (IHCCA) initialement établie à partir du liquide ascitique d’un patient adulte atteint d’un cholangiocarcinome sarcomatoïde. La tumeur dont est issue la lignée ETK-1 présentait à la fois des composantes d’adénocarcinome tubulaire et sarcomatoïde, et la lignée cellulaire reflète le phénotype sarcomatoïde. Les cellules ETK-1 se développent par adhérence sous la forme d’une monocouche épithéliale uniforme présentant un aspect pavé, composée principalement de petites cellules polygonales dotées de noyaux ronds à ovales et de nucléoles proéminents. Les cellules aux premiers passages présentaient un temps de doublement de la population d’environ 70 heures et un caryotype hyperdiploïde avec un nombre modal de chromosomes se situant vers le milieu de la fourchette des 70, ce qui correspond à l’instabilité chromosomique typique des tumeurs malignes agressives des voies biliaires.

Sur le plan immunophénotypique, les cellules ETK-1 expriment des marqueurs épithéliaux biliaires, notamment la γ-glutamyltranspeptidase (GGT), la cytokératine 18 (CK18) et la cytokératine 19 (CK19), ce qui confirme leur origine cholangiocytaire. Elles sont négatives pour les marqueurs associés aux hépatocytes, tels que l’alpha-fœtoprotéine (AFP) et l’albumine, dans des conditions basales. Les cellules ETK-1 expriment la vimentine, ce qui reflète leurs caractéristiques sarcomatoïdes et leur phénotype mésenchymateux partiel, tout en ne présentant pas d’expression de l’antigène carcino-embryonnaire (ACE) ni de l’antigène glucidique 19-9 (CA19-9). Ce profil de marqueurs correspond à la composante sarcomatoïde observée dans la tumeur primaire et met en évidence des caractéristiques compatibles avec des propriétés de type transition épithélio-mésenchymateuse.

La lignée ETK-1 a également été utilisée comme modèle pour étudier la plasticité cellulaire et la différenciation des lignées cellulaires dans le cholangiocarcinome. Le traitement par la 5-azacytidine, un inhibiteur de la méthyltransférase d’ADN, a induit des changements morphologiques et phénotypiques, donnant lieu à une lignée cellulaire dérivée présentant des caractéristiques de type hépatocytaire, notamment l’expression de l’AFP, de l’albumine, de l’intégrine α1 et de la thrombopoïétine, ainsi que la perte de certains marqueurs biliaires. Dans des modèles de xénogreffes, les cellules ETK-1 non traitées forment des tumeurs compatibles avec un adénocarcinome tubulaire présentant un phénotype canalaire. Ces résultats démontrent que la lignée ETK-1 conserve une plasticité différencielle et constitue un système in vitro précieux pour étudier la transdifférenciation épithéliale biliaire en hépatocytaire, la régulation épigénétique et l’hétérogénéité tumorale dans le cholangiocarcinome intrahépatique.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.