ETK-1
Cell line · Product number 305529
ETK-1 is a human intrahepatic cholangiocarcinoma (IHCCA) cell line originally established from the ascitic fluid of an adult patient with sarcomatoid chol...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
ETK-1 הוא קו תאים של קרצינומה של דרכי המרה תוך-כבדית (IHCCA) אנושית, שהוקם במקור מנוזל הצפק של חולה בוגר הסובל מקרצינומה של דרכי המרה מסוג סרקומטואידי. הגידול שממנו נגזר ETK-1 הציג הן אדנוקרצינומה צינורית והן מרכיבים סרקומטואידיים, וקו התאים משקף את הפנוטיפ הסרקומטואידי. תאי ETK-1 צומחים בהיצמדות כשכבה חד-תאית אפיתלית אחידה בעלת מראה של אבני ריצוף, המורכבת בעיקר מתאים מצולעים קטנים בעלי גרעינים עגולים עד אליפטיים וגרעינונים בולטים. תאים בשלבים מוקדמים של תרבית הראו זמן הכפלה של האוכלוסייה של כ-70 שעות וקריוטיפ היפרדיפלואידי עם מספר כרומוזומים מודאלי באמצע שנות ה-70, התואם לחוסר יציבות כרומוזומלית האופיינית לגידולים ממאירים אגרסיביים בדרכי המרה.
מבחינה אימונופנוטיפית, תאי ETK-1 מבטאים סמנים אפיתליאליים של דרכי המרה, כולל γ-גלוטאמיל טרנספפטידאז (GGT), ציטוקראטין 18 (CK18) וציטוקראטין 19 (CK19), מה שמאשר את מקורם הכלנגיוציטי. הם שליליים לסמנים הקשורים להפטוציטים כגון אלפא-פרוטאין (AFP) ואלבומין בתנאים בסיסיים. תאי ETK-1 מבטאים וימנטין, מה שמשקף את מאפייניהם הסרקומטואידיים ואת הפנוטיפ המזנכימלי החלקי שלהם, בעוד שהם אינם מבטאים אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA) ואנטיגן פחמימתי 19-9 (CA19-9). פרופיל סמנים זה תואם את המרכיב הסרקומטואידי שנצפה בגידול הראשוני ומדגיש תכונות העולות בקנה אחד עם מאפיינים הדומים למעבר אפיתל-מזנכימלי.
ETK-1 שימש גם כמודל לחקר הגמישות התאית וההתמיינות השושלתית בקולנגיוקרצינומה. טיפול במעכב מתיל-טרנספראז ה-DNA 5-אזציטידין גרם לשינויים מורפולוגיים ופנוטיפיים, וכתוצאה מכך נוצר קו תאים נגזר בעל מאפיינים דמויי הפטוציטים, כולל ביטוי של AFP, אלבומין, אינטגרין α1 וטרומבופואטין, יחד עם אובדן של סמנים מרה מסוימים. במודלים של שתלים זרים, תאי ETK-1 שלא טופלו יוצרים גידולים התואמים אדנוקרצינומה צינורית המציגה פנוטיפ דוקטלי. ממצאים אלה מראים כי ETK-1 שומר על גמישות התמיינות ומשמש כמערכת in vitro חשובה לחקר התמיינות-על מאפיתל מרה לתאי כבד, ויסות אפיגנטי והטרוגניות הגידול בקולנגיוקרצינומה תוך-כבדית.
- Tissue
- גרורתי
- Disease
- סרטן דרכי המרה
- Metastatic site
- מיימת
- Synonyms
- ETK1
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Identifiers
- Citation
- ETK-1 (מספר קטלוג Cytion 305529)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1206
04Expression and susceptibility
- Mutational profile
- מוטציה: p.Arg175His, הומוזיגוטית
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase, 5 דקות, 37°C
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 עד 3 × 10⁴ תאים לסמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Donor age
- 61 שנים
- Ethnicity
- יפנית
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
