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HT22
Tissue
Cerveau, hippocampe
Synonyms
HT-22

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HT22

Cell line · Product number 305158

The HT22 cell line, an immortalized subclone derived from HT4 cells of the mouse hippocampus, is pivotal in neuropharmacological research. Originating thr...

US$800.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire HT22, un sous-clone immortalisé dérivé de cellules HT4 de l’hippocampe de souris, joue un rôle central dans la recherche neuropharmacologique. Issue de l’immortalisation de tissus neuronaux de souris à l’aide d’un antigène T du SV40 thermosensible, les cellules HT22 constituent un modèle in vitro unique pour étudier les mécanismes sous-jacents à la cytotoxicité induite par le glutamate, qui joue un rôle important dans les troubles neurodégénératifs tels que la maladie d’Alzheimer, la maladie de Huntington et la maladie de Parkinson.

Les cellules HT22 présentent un phénotype neuronal et sont très sensibles au glutamate, un neurotransmetteur excitateur essentiel impliqué dans des fonctions cérébrales cruciales telles que la cognition, l’apprentissage et la mémoire. Cependant, un apport excessif de glutamate peut entraîner une toxicité glutamatergique et une surexcitation des cellules nerveuses, causant des dommages cellulaires ou la mort cellulaire par le biais de mécanismes impliquant le stress oxydatif et l’apoptose.

Les cellules de l’hippocampe de souris HT22 sont utilisées dans des études de neurotoxicité, notamment celles portant sur les effets de l’exposition à l’isoflurane, pour explorer le paysage de la chromatine et les signatures épigénétiques, ainsi que pour examiner les effets de l’influx sérotoninergique sur la neurogenèse hippocampique. Cette dernière comprend l’étude des inhibiteurs de la recapture de la sérotonine et de leur rôle dans le criblage des antidépresseurs, ainsi que l’impact de la glycosylation du transporteur de la sérotonine (SERT) sur la fonction neuronale.

La lignée cellulaire HT22, grâce à sa réponse bien caractérisée au glutamate et à son utilité dans l’étude du système sérotoninergique, demeure un outil précieux pour l’avancement de la neuropharmacologie et le développement de traitements pour toute une gamme de troubles neurologiques.

Tissue
Cerveau, hippocampe
Synonyms
  • HT-22

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine hippocampal neuronal cell line (HT22) contains a retroviral construct encoding temperature-sensitive SV40 T-Antigen, supporting conditional immortalization. The insert is stably present in neuronal precursor cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Épithélial

04Identifiers

Citation
HT22 (numéro de catalogue Cytion 305158)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0321

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un mélange composé de 50 % de milieu de base + 40 % de FBS + 10 % de DMSO, ou du CM-1 (numéro de catalogue Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés afin d’améliorer la récupération et de réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.