Skip to content
HT22
Tissue
מוח, היפוקמפוס
Synonyms
HT-22

Documents

HT22

Cell line · Product number 305158

The HT22 cell line, an immortalized subclone derived from HT4 cells of the mouse hippocampus, is pivotal in neuropharmacological research. Originating thr...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים HT22, תת-שיבוט מוּנָע המופק מתאי HT4 של ההיפוקמפוס בעכבר, הוא מרכזי במחקר הנוירו-פרמקולוגי. תאי HT22, שמקורם בהנצחת רקמות עצביות של עכברים באמצעות אנטיגן T SV40 רגיש לטמפרטורה, מציעים מודל ייחודי במבחנה לחקר המנגנונים העומדים בבסיס הציטוטוקסיות הנגרמת על ידי גלוטמט, הממלאת תפקיד משמעותי בהפרעות נוירודגנרטיביות כגון מחלות אלצהיימר, הנטינגטון ופרקינסון.

תאי HT22 מציגים פנוטיפ עצבי והם רגישים מאוד לגלוטמט, נוירוטרנסמיטור מעורר חיוני המעורב בתפקודי מוח קריטיים כגון קוגניציה, למידה וזיכרון. עם זאת, צריכת יתר של גלוטמט עלולה להוביל לרעילות גלוטמט ולגירוי יתר של תאי עצב, ולגרום לנזק לתאים או למותם באמצעות מנגנונים הכרוכים בלחץ חמצוני ואפופטוזיס.

תאי היפוקמפוס של עכברים HT22 משמשים במחקרים על נוירוטוקסיות, כגון מחקרים הבוחנים את ההשפעות של חשיפה לאיזופלורן, לחקר נוף הכרומטין וסימנים אפיגנטיים, ולבחינת ההשפעות של קלט סרוטונרגי על נוירוגנזה בהיפוקמפוס. האחרון כולל מחקר על מעכבי ספיגה חוזרת של סרוטונין ותפקידם בבדיקת תרופות נוגדות דיכאון, וכן את ההשפעה של גליקוזילציה של מוביל סרוטונין (SERT) על תפקוד עצבי.

קו התאים HT22, עם תגובתו המאופיינת היטב לגלוטמט ותועלתו בחקר המערכת הסרוטונרגית, ממשיך להיות כלי חשוב בקידום הנוירופרמקולוגיה ובפיתוח טיפולים למגוון הפרעות נוירולוגיות.

Tissue
מוח, היפוקמפוס
Synonyms
  • HT-22

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine hippocampal neuronal cell line (HT22) contains a retroviral construct encoding temperature-sensitive SV40 T-Antigen, supporting conditional immortalization. The insert is stably present in neuronal precursor cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל

04Identifiers

Citation
HT22 (מספר קטלוג Cytion 305158)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0321

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים ב-50% מדיום בסיסי + 40% FBS + 10% DMSO, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקירור.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.