HT22

A linhagem celular HT22, um subclone imortalizado derivado das células HT4 do hipocampo de camundongo, é fundamental na pesquisa neurofarmacológica. Originada da imortalização de tecidos neuronais de camundongo com um antígeno T do SV40 sensível à temperatura, as células HT22 oferecem um modelo in vitro único para investigar os mecanismos subjacentes à citotoxicidade induzida pelo glutamato, que desempenha um papel significativo em doenças neurodegenerativas, como as doenças de Alzheimer, de Huntington e de Parkinson.

As células HT22 apresentam um fenótipo neuronal e são altamente sensíveis ao glutamato, um neurotransmissor excitatório essencial envolvido em funções cerebrais críticas, como cognição, aprendizagem e memória. No entanto, a ingestão excessiva de glutamato pode levar à toxicidade por glutamato e à superexcitação das células nervosas, causando danos celulares ou morte celular por meio de mecanismos que envolvem estresse oxidativo e apoptose.

As células do hipocampo de camundongo HT22 são utilizadas em estudos de neurotoxicidade, como aqueles que examinam os efeitos da exposição ao isoflurano, para explorar o panorama da cromatina e as assinaturas epigenéticas, e para examinar os efeitos da entrada serotonérgica na neurogênese hipocampal. Este último inclui o estudo dos inibidores da recaptação da serotonina e seu papel na triagem de antidepressivos, bem como o impacto da glicosilação do transportador de serotonina (SERT) na função neuronal.

A linhagem celular HT22, com sua resposta bem caracterizada ao glutamato e sua utilidade no estudo do sistema serotonérgico, continua sendo uma ferramenta valiosa no avanço da neurofarmacologia e no desenvolvimento de tratamentos para uma variedade de distúrbios neurológicos.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.