Skip to content
HT22
Tissue
สมอง, ฮิปโปแคมปัส
Synonyms
HT-22

Documents

HT22

Cell line · Product number 305158

The HT22 cell line, an immortalized subclone derived from HT4 cells of the mouse hippocampus, is pivotal in neuropharmacological research. Originating thr...

€800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ HT22 ซึ่งเป็นเซลล์ไลน์ย่อยที่คงสภาพความเป็นอมตะซึ่งแยกได้จากเซลล์ HT4 ของฮิปโปแคมปัสในหนู เป็นสิ่งสำคัญในการวิจัยทางเภสัชวิทยาประสาทเซลล์ HT22 มีต้นกำเนิดจากการทำให้เนื้อเยื่อเซลล์ประสาทของหนูเป็นอมตะด้วยแอนติเจน SV40 ที่ไวต่ออุณหภูมิ ซึ่งให้แบบจำลองในหลอดทดลองที่มีเอกลักษณ์เฉพาะสำหรับการศึกษาวิถีการเกิดพิษของกลูตาเมตที่มีผลต่อเซลล์ ซึ่งมีความสำคัญต่อโรคความเสื่อมของระบบประสาท เช่น โรคอัลไซเมอร์ โรคฮันติงตัน และโรคพาร์กินสัน

เซลล์ HT22 แสดงลักษณะทางฟีโนไทป์ของเซลล์ประสาทและมีความไวสูงต่อกลูตาเมต ซึ่งเป็นสารสื่อประสาทกระตุ้นที่สำคัญและมีบทบาทสำคัญในหน้าที่ของสมอง เช่น การรับรู้ การเรียนรู้ และความจำ อย่างไรก็ตาม การได้รับกลูตาเมตในปริมาณมากเกินไปอาจนำไปสู่ภาวะพิษจากกลูตาเมตและการกระตุ้นเซลล์ประสาทมากเกินไป ส่งผลให้เกิดความเสียหายหรือการตายของเซลล์ผ่านกลไกที่เกี่ยวข้องกับความเครียดออกซิเดชันและการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส

เซลล์ฮิปโปแคมปัสของหนู HT22 ถูกนำมาใช้ในการศึกษาความเป็นพิษต่อระบบประสาท เช่น การศึกษาผลกระทบของการได้รับไอโซฟลูเรน เพื่อสำรวจภูมิทัศน์ของโครมาตินและลายเซ็นทางอีพิเจเนติก รวมถึงการศึกษาผลกระทบของอินพุตเซโรโทนินต่อการเกิดเซลล์ประสาทใหม่ในฮิปโปแคมปัส งานวิจัยหลังนี้รวมถึงการศึกษาสารยับยั้งการดูดกลับเซโรโทนินและบทบาทของมันในการคัดกรองยาต้านอาการซึมเศร้า ตลอดจนผลกระทบของการไกลโคซิเลชันของโปรตีนขนส่งเซโรโทนิน (SERT) ต่อการทำงานของเซลล์ประสาท

เซลล์ไลน์ HT22 ซึ่งมีการตอบสนองต่อกลูตาเมตที่ได้รับการจำแนกอย่างชัดเจน และมีประโยชน์ในการศึกษาเกี่ยวกับระบบเซโรโทนิน ยังคงเป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการก้าวหน้าของนีโอโรฟาร์มาคولوجี และการพัฒนาการรักษาสำหรับโรคทางระบบประสาทต่าง ๆ

Tissue
สมอง, ฮิปโปแคมปัส
Synonyms
  • HT-22

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine hippocampal neuronal cell line (HT22) contains a retroviral construct encoding temperature-sensitive SV40 T-Antigen, supporting conditional immortalization. The insert is stably present in neuronal precursor cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
HT22 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305158)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0321

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้ 50% basal medium + 40% FBS + 10% DMSO หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า