
- Tissue
- שחלה
- Disease
- אדנוקרצינומה אנדומטריואידית של השחלה
- Metastatic site
- מיקום הגידול הראשוני (השחלה)
Documents
A2780-GFP
Cell line · Product number 305676
A2780-GFP is a genetically modified derivative of the human ovarian carcinoma cell line A2780, engineered to stably express green fluorescent protein (GFP...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
A2780-GFP הוא נגזרת מהונדסת גנטית של קו התאים A2780 של קרצינומה בשחלה האנושית, שהונדסה כך שתבטא באופן יציב חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP). קו התאים ההורי A2780 הוקם מגידול בשחלה של מטופלת בוגרת, והוא נמצא בשימוש נרחב כמודל לסרטן השחלה האפיתליאלי, במיוחד במחקרים העוסקים בתגובה לכימותרפיה. הוא ידוע ברגישותו היחסית לתרופות מבוססות פלטינה כגון ציספלטין, מה שהופך אותו למערכת בעלת ערך רב לחקר מנגנוני הפעולה והעמידות לתרופות. הגרסה המבטאת GFP שומרת על מאפיינים ביולוגיים אלה תוך שילוב סמן פלואורסצנטי לשיפור התועלת הניסויית.
הביטוי היציב של GFP מאפשר הדמיה בזמן אמת וניתוח כמותי של תאי A2780-GFP במגוון תנאים ניסויים. זיהוי מבוסס פלואורסצנציה מאפשר לחוקרים לעקוב אחר התרבות התאים, המורפולוגיה, הנדידה והחיוניות במבחנה, וכן לעקוב אחר צמיחת הגידול והתפשטותו בגוף החי. יתרון זה בולט במיוחד במודלים של שתלים זרים (xenograft) וגרורות, שבהם ה-GFP מקל על הבחנה בין תאי הגידול לרקמת המארח הסובבת. האות הזוהר יציב בדרך כלל לאורך מחזורי תרבית, אם כי רמות הביטוי עשויות להשתנות בהתאם לשיטת ההעברה הגנטית ולבחירה הקלונלית.
A2780-GFP שומר על המאפיינים המולקולריים והפנוטיפיים המרכזיים של קו A2780 ההורי, לרבות מסלולים הקשורים לתגובה לנזק ב-DNA, אפופטוזיס ורגישות לכימותרפיה. לפיכך, הוא נמצא בשימוש נרחב בבדיקות הדמיה בעלות תוכן גבוה, בפלטפורמות לסינון תרופות ובמערכות תרבית משותפת, שבהן נדרשת רזולוציה מרחבית וזמנית של התנהגות תאי הגידול. הוספת ה-GFP משפרת באופן משמעותי את הרב-תכליתיות של מודל זה, ומאפשרת יישומים במחקר סרטן השחלות, בהערכה טיפולית ובמחקרים על הדינמיקה של תאי הגידול.
שינוי גנטי: עבר שינוי יציב באמצעות העברה לנטרווירוס שאינו מסוגל לשכפל את עצמו, כדי לבטא את הרפורט של החלבון הזוהר הירוק ZsGreen1; נשמר כאוכלוסייה פוליקלונלית תחת סלקציה לפורומיצין (1–5 µg/mL). רמת אבטחה S1/BSL-1.
- Tissue
- שחלה
- Disease
- אדנוקרצינומה אנדומטריואידית של השחלה
- Metastatic site
- מיקום הגידול הראשוני (השחלה)
- Applications
- הדמיה של סרטן השחלה; מעקב אחר הגידול באמצעות GFP; הדמיה פלואורסצנטית in vivo; שילוב עם זן האב A2780 לצורך מחקרים השוואתיים; הדמיה של יעילות התרופה
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Cell type
- תאי אפיתל
04Identifiers
- Citation
- A2780-GFP (מספר קטלוג Cytion 305676)
- NCBI TaxID
- 9606
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- ZsGreen1 (חלבון פלואורסצנטי ירוק)
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Split ratio
- 1 עד 5
- Seeding density
- 1 עד 3 × 10⁴ תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- גיל לא צוין
- Ethnicity
- אפרו-אמריקאי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes