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A2780-GFP
Tessuto
Ovaio
Malattia
Adenocarcinoma endometrioide ovarico
Sito metastatico
Sede del tumore primario (ovaio)

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A2780-GFP

Cell line · Codice prodotto 305676

A2780-GFP is a genetically modified derivative of the human ovarian carcinoma cell line A2780, engineered to stably express green fluorescent protein (GFP...

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01Informazioni generali

Descrizione

A2780-GFP è un derivato geneticamente modificato della linea cellulare A2780, proveniente da un carcinoma ovarico umano, ingegnerizzato per esprimere in modo stabile la proteina fluorescente verde (GFP). La linea cellulare parentale A2780 è stata ottenuta da un tumore ovarico di una paziente adulta ed è ampiamente utilizzata come modello per il carcinoma ovarico epiteliale, in particolare negli studi sulla risposta alla chemioterapia. È nota per la sua relativa sensibilità agli agenti a base di platino, come il cisplatino, il che la rende un sistema prezioso per lo studio dei meccanismi di azione e di resistenza ai farmaci. La variante che esprime la GFP conserva queste caratteristiche biologiche, incorporando al contempo un marcatore fluorescente per una maggiore utilità sperimentale.

L’espressione stabile della GFP consente la visualizzazione in tempo reale e l’analisi quantitativa delle cellule A2780-GFP in una varietà di contesti sperimentali. Il rilevamento basato sulla fluorescenza permette ai ricercatori di monitorare la proliferazione, la morfologia, la migrazione e la vitalità delle cellule in vitro, nonché di tracciare la crescita e la disseminazione del tumore in vivo. Ciò risulta particolarmente vantaggioso nei modelli di xenotrapianto e di metastasi, dove la GFP facilita la discriminazione delle cellule tumorali dal tessuto ospite circostante. Il segnale fluorescente è generalmente stabile nel corso dei passaggi, sebbene i livelli di espressione possano variare a seconda del metodo di trasduzione e della selezione clonale.

La linea A2780-GFP conserva le caratteristiche molecolari e fenotipiche fondamentali della linea parentale A2780, comprese le vie associate alla risposta al danno al DNA, all’apoptosi e alla sensibilità alla chemioterapia. Pertanto, è comunemente utilizzata in saggi di imaging ad alto contenuto, piattaforme di screening farmacologico e sistemi di cocultura in cui è richiesta la risoluzione spaziale e temporale del comportamento delle cellule tumorali. L’aggiunta della GFP migliora significativamente la versatilità di questo modello, favorendo applicazioni nella ricerca sul cancro ovarico, nella valutazione terapeutica e negli studi sulle dinamiche delle cellule tumorali.

Modifica genetica: modificata in modo stabile tramite trasduzione lentivirale a replicazione incompetente per esprimere il reporter della proteina fluorescente verde ZsGreen1; mantenuta come popolazione policlonale sotto selezione con puromicina (1–5 µg/mL). Contenimento S1/BSL-1.

Tessuto
Ovaio
Malattia
Adenocarcinoma endometrioide ovarico
Sito metastatico
Sede del tumore primario (ovaio)
Applicazioni
Imaging del cancro ovarico; monitoraggio tumorale basato sulla GFP; imaging a fluorescenza in vivo; combinazione con la linea cellulare parentale A2780 per studi comparativi; visualizzazione dell'efficacia dei farmaci

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Cellule epiteliali

04Identificatori

Riferimento bibliografico
A2780-GFP (codice catalogo Cytion 305676)
Codice fiscale NCBI
9606

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
ZsGreen1 (proteina fluorescente verde)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Rapporto di frazionamento
Da 1 a 5
Densità di semina
da 1 a 3 × 10⁴ cellule/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controllo di qualità e crioconservazione

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo + 10% DMSO per ottenere un'adeguata vitalità post-scongelamento.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
Età non specificata
Etnia
Afroamericano