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A2780-GFP
Pañuelo de papel
Ovario
Enfermedad
Adenocarcinoma endometrioide de ovario
Lugar de metástasis
Localización del tumor primario (ovario)

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A2780-GFP

Cell line · Número de producto 305676

A2780-GFP is a genetically modified derivative of the human ovarian carcinoma cell line A2780, engineered to stably express green fluorescent protein (GFP...

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01Información general

Descripción

La A2780-GFP es un derivado genéticamente modificado de la línea celular A2780 de carcinoma ovárico humano, diseñada para expresar de forma estable la proteína fluorescente verde (GFP). La línea celular parental A2780 se obtuvo a partir de un tumor de ovario de una paciente adulta y se utiliza ampliamente como modelo de cáncer de ovario epitelial, especialmente en estudios sobre la respuesta a la quimioterapia. Es conocida por su relativa sensibilidad a los agentes basados en el platino, como el cisplatino, lo que la convierte en un sistema valioso para investigar los mecanismos de acción y resistencia a los fármacos. La variante que expresa GFP conserva estas características biológicas al tiempo que incorpora un marcador fluorescente para una mayor utilidad experimental.

La expresión estable de la GFP permite la visualización en tiempo real y el análisis cuantitativo de las células A2780-GFP en diversos entornos experimentales. La detección basada en la fluorescencia permite a los investigadores monitorizar la proliferación, la morfología, la migración y la viabilidad celular in vitro, así como seguir el crecimiento y la diseminación tumoral in vivo. Esto resulta especialmente ventajoso en modelos de xenoinjertos y metástasis, en los que la GFP facilita la distinción de las células tumorales del tejido del huésped circundante. La señal fluorescente suele ser estable a lo largo de los pases, aunque los niveles de expresión pueden variar en función del método de transducción y la selección clonal.

La línea A2780-GFP conserva las características moleculares y fenotípicas fundamentales de la línea parental A2780, incluidas las vías asociadas a la respuesta al daño en el ADN, la apoptosis y la sensibilidad a la quimioterapia. Por ello, se utiliza habitualmente en ensayos de imagen de alto contenido, plataformas de cribado de fármacos y sistemas de cocultivo en los que se requiere una resolución espacial y temporal del comportamiento de las células tumorales. La incorporación de la GFP mejora significativamente la versatilidad de este modelo, lo que permite su aplicación en la investigación del cáncer de ovario, la evaluación terapéutica y los estudios sobre la dinámica de las células tumorales.

Modificación genética: Modificada de forma estable mediante transducción con lentivirus incompetentes para la replicación, a fin de expresar el reportero de proteína fluorescente verde ZsGreen1; se mantiene como una población policlonal bajo selección con puromicina (1-5 µg/mL). Nivel de contención S1/BSL-1.

Pañuelo de papel
Ovario
Enfermedad
Adenocarcinoma endometrioide de ovario
Lugar de metástasis
Localización del tumor primario (ovario)
Aplicaciones
Imágenes del cáncer de ovario; seguimiento tumoral basado en GFP; imágenes de fluorescencia in vivo; combinación con la cepa parental A2780 para estudios comparativos; visualización de la eficacia de los fármacos

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliales

04Identificadores

Referencia
A2780-GFP (número de catálogo de Cytion 305676)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
ZsGreen1 (proteína fluorescente verde)

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Relación de división
Del 1 al 5
Densidad de siembra
De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Control de calidad y criopreservación

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos medio de crecimiento completo + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Edad no especificada
Origen étnico
Afroamericanos