A2780-GFP

A2780-GFP é um derivado geneticamente modificado da linhagem celular A2780 de carcinoma ovariano humano, projetado para expressar de forma estável a proteína fluorescente verde (GFP). A linhagem celular parental A2780 foi estabelecida a partir de um tumor ovariano em uma paciente adulta e é amplamente utilizada como modelo para o câncer epitelial de ovário, particularmente em estudos sobre a resposta à quimioterapia. É conhecida por sua relativa sensibilidade a agentes à base de platina, como a cisplatina, o que a torna um sistema valioso para investigar mecanismos de ação e resistência aos medicamentos. A variante que expressa GFP preserva essas características biológicas ao mesmo tempo em que incorpora um repórter fluorescente para maior utilidade experimental.

A expressão estável da GFP permite a visualização em tempo real e a análise quantitativa das células A2780-GFP em diversos contextos experimentais. A detecção baseada em fluorescência permite que os pesquisadores monitorem a proliferação, a morfologia, a migração e a viabilidade celular in vitro, bem como acompanhem o crescimento e a disseminação do tumor in vivo. Isso é particularmente vantajoso em modelos de xenoenxertos e metástases, nos quais a GFP facilita a distinção entre as células tumorais e o tecido hospedeiro circundante. O sinal fluorescente é geralmente estável ao longo das passagens, embora os níveis de expressão possam variar dependendo do método de transdução e da seleção clonal.

A linha A2780-GFP mantém as principais características moleculares e fenotípicas da linhagem parental A2780, incluindo vias associadas à resposta a danos no DNA, apoptose e sensibilidade à quimioterapia. Por isso, é comumente utilizada em ensaios de imagem de alto conteúdo, plataformas de triagem de medicamentos e sistemas de cocultura, nos quais é necessária a resolução espacial e temporal do comportamento das células tumorais. A adição da GFP aumenta significativamente a versatilidade desse modelo, possibilitando aplicações na pesquisa do câncer de ovário, na avaliação terapêutica e em estudos da dinâmica das células tumorais.

Modificação genética: Modificada de forma estável por transdução lentiviral incompetente para replicação, a fim de expressar o repórter da proteína fluorescente verde ZsGreen1; mantida como uma população policlonal sob seleção com puromicina (1–5 µg/mL). Contenção S1/BSL-1.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.