
- Tissue
- עובר
- Synonyms
- BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N
Documents
01General information
- Description
BALB/3T3 clone A31, קו תאים פיברובלסטיים שפותח על ידי S.A. Aaronson ו-G.T. Todaro בשנת 1968, מקורו בעוברים מפורקים של עכברי BALB/c בני 14 עד 17 יום. קו תאים זה הוא כלי בסיסי במחקר הביולוגיה התאית, הידוע במיוחד ביכולתו לתמוך בצמיחת נגיפים ובנטייתו לשינויים אונקוגניים. מאפיין של תאים אלה הוא צורתם המפוסלת, המאפשרת להם לתפקד כתאים מזנכימליים רב-פוטנציאליים. הם מפגינים פוטנציאל להתמיינות לרקמות שונות בהתאם להשפעות הסביבה המיקרו-סביבתית או לתנאי התרבית, מה שמדגיש את הרב-תכליתיות שלהם במודלים ניסויים.
שיטות תרבית התאים עבור שיבוט A31 של BALB/3T3 כוללות העברות חוזרות ונשנות לפני הגעה לקירוב, כדי למזער את המגע בין התאים, מה שמקדם מאפיינים כגון עיכוב מגע של חלוקת תאים, צמיחה בדילול גבוה וצפיפות רוויה נמוכה. תאים אלה מציגים שונות בקריוטיפ עם מספר מודלי של 78 כרומוזומים, הנע בין 62 ל-109, ובו דומיננטיים כרומוזומים טלוצנטריים או אקרוצנטריים. למרות דיווחים מזדמנים על חוסר יציבות ציטוגנטית, תאי BALB/3T3 A31 שומרים על מצב לא-ממאיר, אם כי הם מפגינים תכונות ממאירות כאשר הם מתורבתים במדיומים חצי-מוצקים. בולט במיוחד כי הם רגישים מאוד לשינוי על ידי נגיפי DNA אונקוגניים כמו SV40 ונגיף הסרקומה העכברי, ונבדקו כנגטיביים לנגיף אקטרומליה (אבעבועות עכברים), מה שמוסיף ערך נוסף למחקר וירולוגי ואונקולוגי.
- Tissue
- עובר
- Synonyms
- BALB/c 3T3 clone A31
- Balb/c3T3
- BALB/c 3T3
- Balb/c 3T3
- BALB/3T3
- Balb/3T3-4-Cl31
- 3T3 clone A31
- BALB/3T3 cl. A31
- BALB 3T3 clone A31
- BALB/3T3 (clone A31)
- B/C3T3
- 3T3-A31
- 3T3(A31)
- A31
- A31N
02Classification
- Organism
- Mouse
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- פיברובלסט
- Tumourigenic
- לא, התאים לא היו ממאירים בעכברים עם דיכוי חיסוני, אך הם יצרו מושבות במדיום חצי-מוצק.
04Identifiers
- Citation
- שיבוט BALB/3T3 A31 (מספר קטלוג Cytion 305155)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0184
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Breed / subspecies
- BALB/c
- Donor age
- עובר, 14 עד 17 ימי הריון
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes