BALB/3T3 clone A31

O clone A31 da linha BALB/3T3, uma linhagem celular de fibroblastos desenvolvida por S.A. Aaronson e G.T. Todaro em 1968, tem origem em embriões desagregados de camundongos BALB/c com 14 a 17 dias de idade. Essa linhagem celular é uma ferramenta fundamental no estudo da biologia celular, notando-se particularmente por sua capacidade de sustentar o crescimento de vírus e por sua suscetibilidade a transformações oncogênicas. Caracteristicamente, essas células são fibroblastos fusiformes que podem atuar como células mesenquimais multipotentes. Elas demonstram o potencial de se diferenciar em vários tecidos, dependendo das influências do microambiente ou das condições de cultura, o que ressalta sua versatilidade em modelos experimentais.

As práticas de cultura celular para o clone A31 da linha BALB/3T3 envolvem transferências repetidas antes de atingir a confluência, a fim de minimizar o contato célula-célula, promovendo características como a inibição do contato na divisão celular, o crescimento em alta diluição e a baixa densidade de saturação. Essas células apresentam variabilidade no cariótipo, com um número modal de 78 cromossomos, variando de 62 a 109, apresentando predominantemente cromossomos telocêntricos ou acrocêntricos. Apesar de relatos ocasionais de instabilidade citogenética, as células BALB/3T3 A31 mantêm um status não tumorigênico, embora apresentem propriedades tumorigênicas quando cultivadas em meios semissólidos. Notavelmente, elas são altamente suscetíveis à transformação por vírus de DNA oncogênicos, como o SV40 e o vírus do sarcoma murino, e apresentaram resultados negativos para o vírus da ectromelia (varíola do camundongo), o que agrega ainda mais valor à pesquisa virológica e oncológica.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.