Skip to content
BALB/3T3 clone A31
Tissue
เอ็มบริโอ
Synonyms
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

Documents

BALB/3T3 clone A31

Cell line · Product number 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

BALB/3T3 clone A31, สายเซลล์ไฟโบรบลาสต์ที่พัฒนาโดย S.A. Aaronson และ G.T. Todaro ในปี 1968, มีต้นกำเนิดจากตัวอ่อนหนู BALB/c ที่แยกออกจากกันเมื่ออายุ 14 ถึง 17 วัน สายเซลล์นี้เป็นเครื่องมือพื้นฐานในการศึกษาชีววิทยาของเซลล์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งเป็นที่รู้จักในด้านความสามารถในการสนับสนุนการเจริญเติบโตของไวรัสและความไวต่อการเปลี่ยนแปลงที่ก่อให้เกิดมะเร็งโดยลักษณะเฉพาะ เซลล์เหล่านี้เป็นไฟโบรบลาสต์รูปทรงกระสวยที่สามารถทำหน้าที่เป็นเซลล์เมเซนไคม์ที่มีศักยภาพหลายชนิดได้ พวกมันแสดงให้เห็นถึงศักยภาพในการเปลี่ยนแปลงเป็นเนื้อเยื่อต่างๆ ขึ้นอยู่กับอิทธิพลของสิ่งแวดล้อมรอบข้างหรือสภาวะการเพาะเลี้ยง ซึ่งเน้นย้ำถึงความหลากหลายของพวกมันในแบบจำลองการทดลอง

การปฏิบัติการเพาะเลี้ยงเซลล์สำหรับ BALB/3T3 clone A31 ประกอบด้วยการถ่ายเซลล์ซ้ำหลายครั้งก่อนถึงระดับการเกาะติดเต็มที่ เพื่อลดการสัมผัสระหว่างเซลล์ ส่งเสริมลักษณะต่างๆ เช่น การยับยั้งการแบ่งเซลล์เมื่อสัมผัสกัน การเจริญเติบโตในสภาวะเจือจางสูง และความหนาแน่นต่ำของเซลล์ที่อิ่มตัว เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะความแปรปรวนของโครโมโซม โดยมีจำนวนโครโมโซมแบบโมดัล 78 โครโมโซม ในช่วง 62 ถึง 109 โครโมโซม โดยส่วนใหญ่เป็นโครโมโซมแบบเทโลเซนทริกหรืออะโครเซนทริกแม้จะมีรายงานเป็นครั้งคราวเกี่ยวกับความไม่เสถียรทางไซโตเจเนติก เซลล์ BALB/3T3 A31 ยังคงรักษาสถานะที่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกได้ แม้ว่าพวกมันจะแสดงคุณสมบัติในการก่อให้เกิดเนื้องอกเมื่อเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อแบบกึ่งแข็งที่น่าสังเกตคือ พวกมันมีความไวต่อการเปลี่ยนแปลงโดยไวรัสดีเอ็นเอที่ก่อให้เกิดมะเร็ง เช่น SV40 และไวรัสซาร์โคมาในหนูสูงมาก และผลตรวจไวรัสเอคโทรเมเลีย (ฝีดาษหนู) เป็นลบ ซึ่งเพิ่มคุณค่าอีกระดับหนึ่งสำหรับการวิจัยด้านไวรัสวิทยาและมะเร็งวิทยา

Tissue
เอ็มบริโอ
Synonyms
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ไฟโบรบลาสต์
Tumourigenic
ไม่, เซลล์ไม่ได้ก่อให้เกิดเนื้องอกในหนูที่ถูกกดภูมิคุ้มกัน แต่สามารถสร้างโคโลนีในอาหารเลี้ยงเชื้อแบบกึ่งแข็งได้

04Identifiers

Citation
BALB/3T3 clone A31 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305155)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0184

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
ตัวอ่อน, อายุครรภ์ 14 ถึง 17 วัน