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BALB/3T3 clone A31
Tissue
Embrión
Synonyms
BALB/c 3T3 clone A31, Balb/c3T3, BALB/c 3T3, Balb/c 3T3, BALB/3T3, Balb/3T3-4-Cl31, 3T3 clone A31, BALB/3T3 cl. A31, BALB 3T3 clone A31, BALB/3T3 (clone A31), B/C3T3, 3T3-A31, 3T3(A31), A31, A31N

Documents

BALB/3T3 clone A31

Cell line · Product number 305155

BALB/3T3 clone A31, a fibroblast cell line developed by S.A. Aaronson and G.T. Todaro in 1968, originates from disaggregated 14- to 17-day-old BALB/c mous...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

El clon A31 de BALB/3T3, una línea celular de fibroblastos desarrollada por S. A. Aaronson y G. T. Todaro en 1968, proviene de embriones desagregados de ratón BALB/c de entre 14 y 17 días de edad. Esta línea celular es una herramienta fundamental en el estudio de la biología celular, destacándose particularmente por su capacidad para sustentar el crecimiento viral y su susceptibilidad a transformaciones oncogénicas. Característicamente, estas células son fibroblastos con forma de huso que pueden actuar como células mesenquimales multipotentes. Demuestran el potencial de diferenciarse en diversos tejidos dependiendo de las influencias del microambiente o las condiciones de cultivo, lo que subraya su versatilidad en modelos experimentales.

Las prácticas de cultivo celular para el clon A31 de BALB/3T3 implican transferencias repetidas antes de alcanzar la confluencia, con el fin de minimizar el contacto célula-célula, lo que promueve características como la inhibición por contacto de la división celular, el crecimiento a alta dilución y una baja densidad de saturación. Estas células presentan una variabilidad cariotípica con un número modal de 78 cromosomas, que oscila entre 62 y 109, y en su mayoría son cromosomas telocéntricos o acrocentricos. A pesar de los informes ocasionales de inestabilidad citogenética, las células BALB/3T3 A31 mantienen un estado no tumorigénico, aunque muestran propiedades tumorigénicas cuando se cultivan en medios semisólidos. Cabe destacar que son altamente susceptibles a la transformación por virus de ADN oncogénicos como el SV40 y el virus del sarcoma murino, y han dado negativo en las pruebas para el virus de la ectromelia (viruela del ratón), lo que les confiere un valor adicional para la investigación virológica y oncológica.

Tissue
Embrión
Synonyms
  • BALB/c 3T3 clone A31
  • Balb/c3T3
  • BALB/c 3T3
  • Balb/c 3T3
  • BALB/3T3
  • Balb/3T3-4-Cl31
  • 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 cl. A31
  • BALB 3T3 clone A31
  • BALB/3T3 (clone A31)
  • B/C3T3
  • 3T3-A31
  • 3T3(A31)
  • A31
  • A31N

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Fibroblasto
Tumourigenic
No, las células no fueron tumorigénicas en ratones inmunosuprimidos, pero sí formaron colonias en medio semisólido.

04Identifiers

Citation
Clon A31 de BALB/3T3 (número de catálogo de Cytion 305155)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0184

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

07Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
Embrión, de 14 a 17 días de gestación