DAKIKI

DAKIKI הוא קו תאים לימפובלסטואידיים מסוג B, החיובי לנגיף אפשטיין-בר (EBV) האנושי, המבטא IgA1 על פני השטח ומפריש IgA1 פולימרי. קו תאים זה נגזר במקור מלימפוציטים היקפיים של חולה בוגר הסובל מסרטן האף והלוע, ולאחר מכן הוקם כתרבות תאים בתמיסה המתרבה ברציפות. התאים מציגים מורפולוגיה לימפובלסטית טיפוסית וגדלים במדיום מבוסס RPMI בתוספת סרום. DAKIKI נמצא בשימוש נרחב כמודל לתאי B אנושיים המייצרים IgA1, במיוחד במחקרים הבוחנים סינתזה של אימונוגלובולינים, ויסות הפרשה וגליקוזילציה פוסט-תרגומית.

ניתוחים ביוכימיים ומבוססי לקטין הראו כי IgA1 המופרש על ידי תאי DAKIKI מציג גליקנים מקושרים ל-O חסרי גלקטוז באזור הציר. ניתוח הרכב המונוסכרידים ו-ELISA לקטין מאשרים העשרה של שאריות N-אצטילגלקטוזאמין (GalNAc) סופיות או α2,6-סיאליליות, צורה גליקנית האופיינית ל-IgA1 בעל גליקוזילציה חריגה הנצפה בנפרופתיה של IgA. טיפול בנוירמינידאז מגביר באופן ניכר את תגובתיות האגלוטינין של Helix aspersa, מה שמעיד על נוכחות של מבנים של GalNAc סיאלילטים. בדיקות תפקודיות המשתמשות בשברים מועשרים בגולגי מתאי DAKIKI מדגימות פעילות CMP-NeuAc:GalNAc-IgA1 α2,6-sialyltransferase, המאשרת את היכולת של תאים אלה לבצע סיאלילציה ישירה של גליקנים O חסרי גלקטוז. ניתוחים טרנסקריפציוניים מגלים ביטוי של ST6-GalNAcII אך לא של ST6-GalNAcI, מה שתומך בתפקידו של ST6-GalNAcII בתיווך סיאלילציה α2,6 של GalNAc באזור הציר ב-IgA1.

בנוסף לשימושיותו במחקר הגליקוזילציה, DAKIKI נבדק על תגובתו לגורמים המווסתים תאי B ולאסטרים של פורבול, אשר יכולים לווסת את הפרשת האימונוגלובולינים בקווי תאי B אנושיים מסוימים. בעוד ש-DAKIKI מפריש IgA באופן קבוע, הוא נכלל בין מודלי תאי B שעברו טרנספורמציה על ידי EBV המשמשים לחקר הוויסות של ייצור האימונוגלובולינים ומצבי ההבחנה. בזכות פרופיל הפרשת ה-IgA1 היציב שלו והייצור החוזר של גליקנים באזור הציר, חסרי גלקטוז ומצופים בסיאלילציה α2,6, DAKIKI מייצג מערכת מבחנה מאופיינת היטב לחקירת מנגנוני גליקוזילציה של IgA1, התמיינות תאי B והפתוגנזה המולקולרית של הפרעות הקשורות ל-IgA.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו