DAKIKI

DAKIKI là một dòng tế bào lymphoblastoid B dương tính với virus Epstein-Barr (EBV) ở người, biểu hiện IgA1 bề mặt và tiết ra IgA1 dạng polymer. Dòng tế bào này ban đầu được phân lập từ các tế bào lympho ngoại vi của một bệnh nhân người lớn mắc ung thư vòm họng và sau đó được thiết lập thành một dòng nuôi cấy lơ lửng có khả năng sinh sôi liên tục. Các tế bào này có hình thái lymphoblastoid điển hình và phát triển trong môi trường nuôi cấy dựa trên RPMI có bổ sung huyết thanh. DAKIKI đã được sử dụng rộng rãi như một mô hình của tế bào B sản xuất IgA1 ở người, đặc biệt là cho các nghiên cứu về tổng hợp immunoglobulin, điều hòa tiết và glycosyl hóa sau dịch mã.

Các phân tích sinh hóa và dựa trên lectin đã chứng minh rằng IgA1 do tế bào DAKIKI tiết ra có chứa các glycan liên kết O thiếu galactose trong vùng khớp nối. Phân tích thành phần monosaccharide và ELISA dựa trên lectin xác nhận sự phong phú của các dư lượng N-acetylgalactosamine (GalNAc) ở đầu cuối hoặc được sialyl hóa α2,6, một dạng glyco đặc trưng của IgA1 bị glycosyl hóa bất thường được quan sát thấy trong bệnh thận IgA. Xử lý bằng neuraminidase làm tăng đáng kể phản ứng với chất kết tụ Helix aspersa, cho thấy sự hiện diện của các cấu trúc GalNAc được sialyl hóa. Các thử nghiệm chức năng sử dụng các phân đoạn giàu Golgi từ tế bào DAKIKI cho thấy hoạt tính α2,6-sialyltransferase của CMP-NeuAc:GalNAc-IgA1, xác nhận khả năng của các tế bào này trong việc trực tiếp sialyl hóa các glycan O thiếu galactose. Phân tích biểu hiện gen cho thấy sự biểu hiện của ST6-GalNAcII nhưng không phải ST6-GalNAcI, hỗ trợ vai trò của ST6-GalNAcII trong việc trung gian quá trình sialyl hóa α2,6 của GalNAc ở vùng khớp nối trong IgA1.

Ngoài ứng dụng trong nghiên cứu glycosylation, DAKIKI đã được đánh giá về khả năng đáp ứng với các yếu tố kích thích tế bào B và este phorbol, những chất có thể điều chỉnh sự tiết immunoglobulin trong một số dòng tế bào B của người. Mặc dù DAKIKI tiết IgA liên tục, nó vẫn được đưa vào danh sách các mô hình tế bào B biến đổi bởi EBV được sử dụng để nghiên cứu sự điều chỉnh sản xuất immunoglobulin và các trạng thái biệt hóa. Nhờ vào hồ sơ tiết IgA1 ổn định và khả năng sản xuất lặp lại các glycan vùng khớp thiếu galactose, được sialyl hóa α2,6, DAKIKI đại diện cho một hệ thống in vitro được đặc trưng rõ ràng để nghiên cứu các cơ chế glycosyl hóa IgA1, sự biệt hóa tế bào B và cơ chế bệnh sinh phân tử của các rối loạn liên quan đến IgA.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.