DAKIKI

DAKIKI เป็นเซลล์ไลน์ลิมโฟบลาสต์ชนิดบีที่เป็นบวกต่อไวรัสเอปสไตน์-บาร์ร์ (EBV) ในมนุษย์ ซึ่งแสดง IgA1 บนผิวเซลล์และหลั่ง IgA1 แบบพอลิเมอร์ เซลล์ไลน์นี้ถูกแยกจากลิมโฟไซต์ในเลือดของผู้ที่เป็นผู้ใหญ่และเป็นมะเร็งโพรงหลังจมูก จากนั้นจึงถูกพัฒนาให้เป็นเซลล์ไลน์ที่สามารถแบ่งตัวต่อเนื่องในสภาพแขวนลอย เซลล์แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาแบบลิมโฟบลาสต์ทั่วไปและเจริญเติบโตในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีพื้นฐานจาก RPMI เสริมด้วยซีรัม DAKIKI ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองของเซลล์บีที่ผลิต IgA1 ในมนุษย์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาการสังเคราะห์อิมมูโนโกลบูลิน การควบคุมการหลั่ง และการเติมน้ำตาลหลังการแปลโปรตีน

การวิเคราะห์ทางชีวเคมีและเลคตินได้แสดงให้เห็นว่า IgA1 ที่หลั่งโดยเซลล์ DAKIKI แสดงน้ำตาลโอลิโกแซ็กคาไรด์ชนิดขาดกาแลคโตสที่เชื่อมโยงกับ O-linked ภายในบริเวณข้อพับ การวิเคราะห์องค์ประกอบโมโนแซ็กคาไรด์และการทดสอบ ELISA ด้วยเลคตินยืนยันการเพิ่มความเข้มข้นของกลุ่มคาร์บอกซิลสุดท้ายหรือกลุ่ม N-อะเซทิล-D-กาแลคโตซามีน (GalNAc) ที่ถูกเติมหมู่ไซอาลิเลตแบบ α2,6 ซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะของไกลโคฟอร์มของ IgA1 ที่มีการเติมหมู่ไกลโคไซด์ผิดปกติในภาวะไตอักเสบจาก IgA การรักษาด้วย Neuraminidase เพิ่มปฏิกิริยาของ Helix aspersa agglutinin อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งบ่งชี้ถึงการมีโครงสร้าง GalNAc ที่ถูกเติมหมู่ไซอาลิกลงอยู่ การทดสอบเชิงหน้าที่โดยใช้ส่วนที่อุดมด้วย Golgi จากเซลล์ DAKIKI แสดงให้เห็นกิจกรรมของเอนไซม์ CMP-NeuAc:GalNAc-IgA1 α2,6-sialyltransferase ซึ่งยืนยันความสามารถของเซลล์เหล่านี้ในการเติมหมู่ไซอาลิลงโดยตรงบน O-ไกลแคนที่มี Gal ขาดหายไป การวิเคราะห์การถอดรหัสเผยให้เห็นการแสดงออกของ ST6-GalNAcII แต่ไม่พบ ST6-GalNAcI ซึ่งสนับสนุนบทบาทของ ST6-GalNAcII ในการเป็นตัวกลางในการเกิดการเติมหมู่ไซอาลิค α2,6 ที่ GalNAc ในบริเวณข้อต่อของ IgA1

นอกเหนือจากการใช้งานในงานวิจัยเกี่ยวกับการเติมน้ำตาลแล้ว DAKIKI ยังได้รับการประเมินในด้านความไวต่อปัจจัยที่กระตุ้นเซลล์ B และฟอพอลเอสเทอร์ ซึ่งสามารถปรับการหลั่งอิมมูโนโกลบูลินในเซลล์ B ของมนุษย์บางสายพันธุ์ได้ แม้ว่า DAKIKI จะหลั่ง IgA อย่างต่อเนื่อง แต่ก็ได้ถูกนำมาใช้ในแบบจำลองเซลล์ B ที่ถูกเปลี่ยนแปลงโดย EBV เพื่อศึกษาการควบคุมการผลิตอิมมูโนโกลบูลินและสถานะการแยกแยะของเซลล์ เนื่องจากโปรไฟล์การหลั่ง IgA1 ที่เสถียรและการผลิตไกลแคนในบริเวณบานพับที่ขาดกาแลคโตสและมีการเติมหมู่ไซอาลิคที่ตำแหน่ง α2,6 ซ้ำ ๆ ได้เป็นอย่างดี DAKIKI จึงเป็นระบบในหลอดทดลองที่มีการอธิบายลักษณะอย่างละเอียดสำหรับการศึกษาเชิงกลไกของการเติมหมู่ไกลแคนใน IgA1 การเปลี่ยนแปลงของเซลล์ B และพยาธิกำเนิดระดับโมเลกุลของความผิดปกติที่เกี่ยวข้องกับ IgA

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.