HaCaT

תאי HaCaT הם מודל מרכזי במחקר דרמטולוגי, המספק תובנות על המנגנונים המורכבים של ביולוגיה ופתולוגיה של העור. קו התאים HaCaT, שהפך לאלמותי באופן ספונטני, נגזר מתאי אפידרמיס אנושיים בוגרים ושומר על היכולת להתרבות ולעבור התמיינות, בדומה לקרטינוציטים בסיסיים in vivo. תאי HaCaT משמשים כפלטפורמה איתנה לחקר תהליך ההתמיינות האפידרמיס וללימוד סמני ההתמיינות האפידרמיס החיוניים לשמירה על שלמות העור.

הרגישות של תאי HaCaT לאפופטוזיס והרגישות שלהם לחומרים המשרים אפופטוזיס נחקרים בהרחבה, במיוחד בהקשר של חומרים ציטוטוקסיים כמו RIPL. חוקרים מעריכים את הציטוטוקסיות של חומרים אלה ואת מידת הציטוטוקסיות באמצעות תאי HaCaT, תוך שימוש בטכניקות כגון מיקרוסקופיה פלואורסצנטית כדי להמחיש את השינויים התאיים.

חוקרים השתמשו בתאי HaCaT כדי לבחון את ההשפעות של חומרים שונים, כולל מצעים אנטי-מיקרוביאליים והשפעתם על חיוניות התאים. תאים אלה מהווים מצע מצוין לבדיקת חומרים ביולוגיים אנטי-מיקרוביאליים ומצעים אנטי-מיקרוביאליים של אטלו-קולגן, החיוניים לתיקון העור וליישומים רפואיים.

קו האפידרמיס HaCaT ממלא תפקיד מכריע גם בחקר הזדקנות תאים, ציטוקינים ופרופילי ביטוי גנים הקשורים להזדקנות ולמחלות כרוניות. פרופילי השעתוק של תאי HaCaT, כולל תפקידם של κB ו-microRNAs, מספקים תובנות על מנגנוני הוויסות ברמה המולקולרית.

קו הקרטינוציטים HaCaT, עם מאפייניו כקרטינוציטים אפידרמליים, מציע מערכת נוחה לניתוח האינטראקציה המורכבת בין תאי האפידרמיס למערכת החיסון, ובמיוחד תפקידם של הקרטינוציטים במצבי מחלה. הם מאפשרים לחקור שינויים אפיגנטיים והשפעתם על התמיינות הקרטינוציטים, כולל היווצרות המעטפת הקרנית, תכונה מרכזית בתפקוד המחסום של העור.

לסיכום, תאי HaCaT הם מודל חיוני במחקר דרמטולוגי, המאפשר הבנה מעמיקה יותר של ביולוגיה ופתולוגיה של העור בזכות הדמיון שלהם לקרטינוציטים בסיסיים ויכולתם לעבור צמיחה והתמיינות תאים. היישומים שלהם נעים מחקר של התמיינות אפידרמיס והשפעות אנטי-מיקרוביאליות ועד לחקר תגובות תאיות כגון אפופטוזיס, מה שהופך אותם לאבן יסוד בביולוגיה תאית ובמחקר ביו-רפואי.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. השלכת המדיום הישן: הסר בזהירות את המדיום הישן מהבקבוקים.
2. שטוף את התאים: הוסף 3-5 מ"ל של תמיסת מלח מאוזנת פוספט (PBS) ללא סידן ומגנזיום לבקבוקי T25, או 5-10 מ"ל לבקבוקי T75, כדי לשטוף את התאים הדבוקים.
3. הוסף תמיסת EDTA: כסה את שכבת התאים כולה בתמיסת EDTA 0.05% שהוכנה זה עתה. השתמש ב-1-2 מ"ל לצלוחיות T25 וב-2.5 מ"ל לצלוחיות T75.
4. דגירה: דגרו את הבקבוקים בטמפרטורה של 37°C למשך 10 דקות.
5. הוסף תמיסת טריפסין/EDTA או TrypLE Express: לאחר הדגירה, הוסף תמיסת טריפסין/EDTA טרייה (0.05% טריפסין, 0.025% EDTA) או TrypLE Express לבקבוקים, תוך הקפדה על כיסוי מלא של שכבת התאים. השתמש ב-1 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. (הערה: ניתן לדלג על שלבים 3 ו-4 אם משתמשים ב-TrypLE Express.)
6. עקבו אחר ההתנתקות: התבוננו בתאים תחת מיקרוסקופ. התאים אמורים להתנתק תוך 1-5 דקות.
7. נטרול הטריפסין: הוסף תרבית תאים המכילה סרום עגלי (FBS) כדי לנטרל את פעילות הטריפסין ברגע שהתאים התנתקו.
8. העברת תאים: העבירו את תמיסת התאים לבקבוקים חדשים המלאים מראש במדיום תרבית טרי.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו