HaCaT

HaCaT 细胞是皮肤病学研究中的一个重要模型，可帮助人们深入了解皮肤生物学和病理学的复杂机制。自发永生化的 HaCaT 细胞系来自成人表皮细胞，具有增殖和分化能力，类似于体内的基底角质细胞。HaCaT 细胞是研究表皮分化过程和维持皮肤完整性所必需的表皮分化标记的强大平台。

HaCaT 细胞对凋亡的易感性及其对凋亡诱导剂的敏感性已被广泛研究，特别是在使用 RIPL 等细胞毒剂的情况下。研究人员利用荧光显微镜等技术观察细胞的变化，使用 HaCaT 细胞评估这些药剂的细胞毒性和细胞毒性的程度。

研究人员利用 HaCaT 细胞来研究各种药剂（包括抗菌基质）的作用及其对细胞活力的影响。这些细胞是测试抗菌生物材料和抗菌胶原蛋白基质的绝佳基质，对皮肤修复和医疗应用至关重要。

HaCaT 表皮系在研究细胞衰老、细胞因子以及与衰老和慢性疾病相关的基因表达谱方面也起着至关重要的作用。HaCaT 细胞的转录图谱，包括 κB 和 microRNA 的作用，有助于深入了解分子水平的调控机制。

HaCaT 角质形成细胞系具有表皮角质形成细胞的特征，为剖析表皮细胞与免疫系统之间错综复杂的相互作用，特别是角质形成细胞在疾病状态中的作用提供了一个可操作的系统。这些细胞可用于探索表观遗传修饰及其对角质形成细胞分化的影响，包括角化包膜的形成，这是皮肤屏障功能的一个关键特征。

总之，HaCaT 细胞是皮肤病学研究中不可或缺的模型，通过其与基底角质形成细胞的相似性及其细胞生长和分化能力，有助于深入了解皮肤生物学和病理学。它们的应用范围很广，从研究表皮分化和抗菌作用到探索细胞凋亡等细胞反应，使它们成为细胞生物学和生物医学研究的基石。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. 丢弃旧培养基：小心清除烧瓶中的旧培养基。
2. 清洗细胞：在 T25 烧瓶中加入 3-5 毫升不含钙和镁的磷酸盐缓冲液（PBS），或在 T75 烧瓶中加入 5-10 毫升，冲洗粘附的细胞。
3. 加入 EDTA 溶液：用新配制的 0.05% EDTA 溶液完全覆盖细胞层。T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。
4. 孵育：将烧瓶置于 37°C孵育 10 分钟。
5. 加入胰蛋白酶/EDTA 或 TrypLE Express 溶液：培养后，向烧瓶中加入新配制的胰蛋白酶/EDTA 溶液（0.05% 胰蛋白酶，0.025% EDTA）或 TrypLE Express，确保细胞层完全覆盖。T25 烧瓶用 1 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。(注：如使用 TrypLE Express，可省略步骤 3 和 4）。
6. 监测脱落：在显微镜下观察细胞。细胞应在 1-5 分钟内分离。
7. 中和胰蛋白酶：细胞脱落后，立即加入含胎牛血清（FBS）的细胞培养液中和胰蛋白酶活性。
8. 转移细胞：将细胞悬浮液分装到预先注入新鲜培养基的新烧瓶中。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。