HaCaT

เซลล์ HaCaT เป็นแบบจำลองที่สำคัญในการวิจัยด้านผิวหนัง โดยให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกที่ซับซ้อนของชีววิทยาและพยาธิสภาพของผิวหนัง สายพันธุ์เซลล์ HaCaT ที่เกิดการเป็นอมตะโดยธรรมชาติได้มาจากเซลล์ผิวหนังชั้นนอกของมนุษย์ผู้ใหญ่และยังคงมีความสามารถในการเพิ่มจำนวนและเปลี่ยนแปลงลักษณะคล้ายกับเซลล์เคราติโนไซต์พื้นฐานในร่างกาย เซลล์ HaCaT ทำหน้าที่เป็นแพลตฟอร์มที่แข็งแกร่งสำหรับการศึกษาการแยกตัวของเซลล์ผิวหนังชั้นนอกและการศึกษาตัวบ่งชี้การแยกตัวของเซลล์ผิวหนังชั้นนอกที่จำเป็นสำหรับการรักษาความสมบูรณ์ของผิวหนัง

ความไวของเซลล์ HaCaT ต่อการเกิดอะพอพโทซิสและความไวต่อสารที่กระตุ้นการเกิดอะพอพโทซิสได้รับการศึกษาอย่างกว้างขวาง โดยเฉพาะในบริบทของสารที่มีพิษต่อเซลล์ เช่น RIPL นักวิจัยประเมินความเป็นพิษต่อเซลล์ของสารเหล่านี้และระดับของความเป็นพิษต่อเซลล์โดยใช้เซลล์ HaCaT ร่วมกับเทคนิคต่างๆ เช่น การส่องกล้องจุลทรรศน์แบบฟลูออเรสเซนต์เพื่อสังเกตการเปลี่ยนแปลงของเซลล์

นักวิจัยได้ใช้เซลล์ HaCaT เพื่อศึกษาผลกระทบของสารต่าง ๆ รวมถึงสารตั้งต้นต้านจุลชีพและอิทธิพลของสารเหล่านี้ต่อความมีชีวิตของเซลล์ เซลล์เหล่านี้เป็นสารตั้งต้นแบบที่ยอดเยี่ยมสำหรับการทดสอบวัสดุชีวภาพต้านจุลชีพและสารตั้งต้นแบบอะเทโลคอลลาเจนต้านจุลชีพ ซึ่งมีความสำคัญต่อการซ่อมแซมผิวหนังและการประยุกต์ใช้ทางการแพทย์

เซลล์ไลน์ HaCaT ของผิวหนังชั้นนอกยังมีบทบาทสำคัญในการศึกษาการแก่ของเซลล์, ไซโตไคน์, และโปรไฟล์การแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการแก่และโรคเรื้อรัง โปรไฟล์การถอดรหัสของเซลล์ HaCaT รวมถึงบทบาทของ κB และไมโครอาร์เอ็นเอ ให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกการควบคุมในระดับโมเลกุล

เซลล์ไลน์ HaCaT ซึ่งเป็นเซลล์เคราติโนไซต์ของผิวหนังชั้นนอก มีลักษณะเฉพาะของเซลล์เคราติโนไซต์ในผิวหนังชั้นนอก ทำให้เป็นระบบที่สามารถศึกษาการโต้ตอบที่ซับซ้อนระหว่างเซลล์ผิวหนังชั้นนอกกับระบบภูมิคุ้มกันได้เป็นอย่างดี โดยเฉพาะบทบาทของเซลล์เคราติโนไซต์ในภาวะโรคต่าง ๆ พวกมันช่วยให้สามารถศึกษาการเปลี่ยนแปลงทางเอพิเจเนติกส์และอิทธิพลต่อการเปลี่ยนแปลงของเซลล์เคราติโนไซต์ รวมถึงการก่อตัวของคอร์นิไฟด์ เอ็นเวโลป ซึ่งเป็นลักษณะสำคัญของหน้าที่ของผิวหนังในการป้องกัน

โดยสรุป เซลล์ HaCaT เป็นแบบจำลองที่ขาดไม่ได้ในการวิจัยด้านผิวหนัง ช่วยให้เข้าใจชีววิทยาและพยาธิสภาพของผิวหนังได้ลึกซึ้งยิ่งขึ้นผ่านความคล้ายคลึงกับเคราติโนไซต์พื้นฐานและความสามารถในการเจริญเติบโตและการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ การประยุกต์ใช้ครอบคลุมตั้งแต่การศึกษาการเปลี่ยนแปลงของผิวหนังชั้นนอกและผลของสารต้านจุลชีพ ไปจนถึงการสำรวจการตอบสนองของเซลล์ เช่น การตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นรากฐานสำคัญในชีววิทยาของเซลล์และการวิจัยทางชีวการแพทย์

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. ทิ้งอาหารเลี้ยงเชื้อเก่า: นำอาหารเลี้ยงเชื้อเก่าออกจากขวดบ่มเชื้ออย่างระมัดระวัง
2. ล้างเซลล์: เติมสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์เกลือ (PBS) ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม 3-5 มิลลิลิตรลงในขวด T25 หรือ 5-10 มิลลิลิตรลงในขวด T75 เพื่อล้างเซลล์ที่เกาะติด
3. เติมสารละลาย EDTA: ปิดชั้นเซลล์ให้ทั่วด้วยสารละลาย EDTA 0.05% ที่เตรียมใหม่ ใช้ 1-2 มิลลิลิตรสำหรับขวด T25 และ 2.5 มิลลิลิตรสำหรับขวด T75
4. บ่ม: บ่มขวดแก้วที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 10 นาที
5. เติม Trypsin/EDTA หรือ TrypLE Express Solution: หลังจากบ่มแล้ว ให้เติมสารละลาย trypsin/EDTA ที่เตรียมใหม่ (0.05% trypsin, 0.025% EDTA) หรือ TrypLE Express ลงในขวดเพาะเลี้ยง โดยให้แน่ใจว่าชั้นเซลล์ถูกปกคลุมอย่างทั่วถึงใช้ 1 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75 (หมายเหตุ: สามารถข้ามขั้นตอนที่ 3 และ 4 ได้หากใช้ TrypLE Express)
6. การสังเกตการหลุดของเซลล์: สังเกตเซลล์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ เซลล์ควรหลุดออกภายใน 1-5 นาที
7. ทำให้ทริปซินเป็นกลาง: เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ที่มีเซรั่มจากเลือดวัวตัวเมียที่ตั้งครรภ์ (FBS) เพื่อทำให้กิจกรรมของทริปซินเป็นกลางทันทีที่เซลล์หลุดออกจากกัน
8. ถ่ายเซลล์: ถ่ายสารแขวนลอยเซลล์ลงในขวดใหม่ซึ่งเติมอาหารเลี้ยงเชื้อสดไว้ล่วงหน้าแล้ว

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.