תאי HBL-100
Cell line · Product number 300178
HBL-100 is a human breast epithelial cell line originally derived from the breast milk of a nursing mother. The milk was collected three days post-deliver...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
HBL-100 הוא קו תאים אפיתל של שד אנושי שמקורו בחלב אם מניקה. החלב נלקח שלושה ימים לאחר הלידה, ולמרות שלא היו סימנים לנגע בשד אצל התורמת ולא היה היסטוריה משפחתית של סרטן השד, התאים הראו קריוטיפ חריג במעבר 7. קו תאים זה בולט ביכולתו לסנתז כמות קטנה של לקטוז ולהגיב לגירוי של פרולקטין או אסטרוגן על ידי הגברת ייצור הקזאין. ניתוחים מיקרוסקופיים, כגון מיקרוגרפיות אלקטרוניות, אישרו את נוכחותם של מיקרו-וילי, טונופיברילים ודסמוזומים בתאים אלה, והדגישו את המאפיינים האפיתלליים האופייניים להם.
עם זאת, קו התאים HBL-100 נתקל בקשיים משמעותיים בזיהויו ובאפיונו. נמצא כי הוא מכיל כרומוזום Y, מה שמרמז על זיהוי שגוי, שכן בתחילה סברו כי קו התאים הוא ממוצא נשי. מורכבות נוספת נובעת מנוכחות רצפים גנומיים של SV40 בתוך קו התאים, הסותרים את האמונה הקודמת כי הוא הונצח באופן ספונטני. ממצאים אלה הובילו לדיונים בנוגע למקורו ולהרכב הגנטי של HBL-100, מה שהופך אותו לקו תאים בעייתי למחקר ללא אימות יסודי של מאפייניו ומקורו.
- Tissue
- שד
- Disease
- קרצינומה
- Synonyms
- HBL 100
- HBL100
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים. ברמות מעבר מתחת ל-35, הקו אינו גורם לגידולים בעכברים עירומים, אך יוצר מושבות באגר רך. דווח כי יכולת הגרימה לגידולים עולה מעל מעבר 35.
- Ploidy status
- אנאופלואידי
- MSI status
- יציב (MSS)
- Karyotype
- מספר הכרומוזומים בגזע קרוב לשלישייה, עם מספר מודאלי של 67 כרומוזומים, והרכיב 2S מופיע ב-0.6%. רוב מערכי הכרומוזומים מורכבים מכ-39 כרומוזומים נורמליים ו-28 כרומוזומים סמנים. סמנים כגון 2q, 11q+, 11q, t(2q.12), t(2q.5q?), t(6p?.16), 16pt ורבים אחרים נפוצים ברוב המטאפזות. כרומוזומים נורמליים 11, 14, 15 ו-16 נעדרים. 2, 12, 17 ו-19 הם מונוזומיים, וה-x הוא דיזומי. פרופיל DNA לאמלוגנין, בדיקת PCR ספציפית לכרומוזומי המין שיכולה להבחין בין תוצרים ספציפיים לכרומוזום x לבין תוצרים ספציפיים לכרומוזום Y, גילה נוכחות של כרומוזומי Y בקו תאים זה שמקורו הנשי המשוער. אישור הממצאים הכלליים הושג באמצעות צביעת QM, C-banding ו-FISH, עם גלאי צבע כרומוזומי שלם לכרומוזום Y האנושי.
04Identifiers
- Citation
- HBL-100 (מספר קטלוגי Cytion 300178)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4362
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- HLA A1, A10, A11, B7, B8
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, ES-D, 1, Me-2, 0, GLO-1, 2, AK-1, 1-2, תוצר תדירות הפנוטיפ: 0.0008
- Viruses
- התאים מכילים גנום SV40 משולב בטנדם. דווח כי הם עשויים להכיל רטרו-וירוס מסוג D הדומה או זהה לנגיף הקוף Mason-Pfizer (MPMV).
- Reverse transcriptase
- חיובי
06Handling and culture
- Culture medium
- McCoys 5a, w: 3.0 g/L גלוקוז, w: יציב גלוטמין, w: 2.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820200a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 27 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)