Skip to content
תאי HBL-100
Tissue
שד
Disease
קרצינומה
Synonyms
HBL 100, HBL100

Documents

תאי HBL-100

Cell line · Product number 300178

HBL-100 is a human breast epithelial cell line originally derived from the breast milk of a nursing mother. The milk was collected three days post-deliver...

US$395.00excl. tax and shipping
Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HBL-100 הוא קו תאים אפיתל של שד אנושי שמקורו בחלב אם מניקה. החלב נלקח שלושה ימים לאחר הלידה, ולמרות שלא היו סימנים לנגע בשד אצל התורמת ולא היה היסטוריה משפחתית של סרטן השד, התאים הראו קריוטיפ חריג במעבר 7. קו תאים זה בולט ביכולתו לסנתז כמות קטנה של לקטוז ולהגיב לגירוי של פרולקטין או אסטרוגן על ידי הגברת ייצור הקזאין. ניתוחים מיקרוסקופיים, כגון מיקרוגרפיות אלקטרוניות, אישרו את נוכחותם של מיקרו-וילי, טונופיברילים ודסמוזומים בתאים אלה, והדגישו את המאפיינים האפיתלליים האופייניים להם.

עם זאת, קו התאים HBL-100 נתקל בקשיים משמעותיים בזיהויו ובאפיונו. נמצא כי הוא מכיל כרומוזום Y, מה שמרמז על זיהוי שגוי, שכן בתחילה סברו כי קו התאים הוא ממוצא נשי. מורכבות נוספת נובעת מנוכחות רצפים גנומיים של SV40 בתוך קו התאים, הסותרים את האמונה הקודמת כי הוא הונצח באופן ספונטני. ממצאים אלה הובילו לדיונים בנוגע למקורו ולהרכב הגנטי של HBL-100, מה שהופך אותו לקו תאים בעייתי למחקר ללא אימות יסודי של מאפייניו ומקורו.

Tissue
שד
Disease
קרצינומה
Synonyms
  • HBL 100
  • HBL100

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים. ברמות מעבר מתחת ל-35, הקו אינו גורם לגידולים בעכברים עירומים, אך יוצר מושבות באגר רך. דווח כי יכולת הגרימה לגידולים עולה מעל מעבר 35.
Ploidy status
אנאופלואידי
MSI status
יציב (MSS)
Karyotype
מספר הכרומוזומים בגזע קרוב לשלישייה, עם מספר מודאלי של 67 כרומוזומים, והרכיב 2S מופיע ב-0.6%. רוב מערכי הכרומוזומים מורכבים מכ-39 כרומוזומים נורמליים ו-28 כרומוזומים סמנים. סמנים כגון 2q, 11q+, 11q, t(2q.12), t(2q.5q?), t(6p?.16), 16pt ורבים אחרים נפוצים ברוב המטאפזות. כרומוזומים נורמליים 11, 14, 15 ו-16 נעדרים. 2, 12, 17 ו-19 הם מונוזומיים, וה-x הוא דיזומי. פרופיל DNA לאמלוגנין, בדיקת PCR ספציפית לכרומוזומי המין שיכולה להבחין בין תוצרים ספציפיים לכרומוזום x לבין תוצרים ספציפיים לכרומוזום Y, גילה נוכחות של כרומוזומי Y בקו תאים זה שמקורו הנשי המשוער. אישור הממצאים הכלליים הושג באמצעות צביעת QM, C-banding ו-FISH, עם גלאי צבע כרומוזומי שלם לכרומוזום Y האנושי.

04Identifiers

Citation
HBL-100 (מספר קטלוגי Cytion 300178)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_4362

05Expression and susceptibility

Antigen expression
HLA A1, A10, A11, B7, B8
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, ES-D, 1, Me-2, 0, GLO-1, 2, AK-1, 1-2, תוצר תדירות הפנוטיפ: 0.0008
Viruses
התאים מכילים גנום SV40 משולב בטנדם. דווח כי הם עשויים להכיל רטרו-וירוס מסוג D הדומה או זהה לנגיף הקוף Mason-Pfizer (MPMV).
Reverse transcriptase
חיובי

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, w: 3.0 g/L גלוקוז, w: יציב גלוטמין, w: 2.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
27 שנים
Ethnicity
קווקזי