Skip to content
Tế bào HBL-100
Tissue
Vú
Disease
Ung thư biểu mô
Synonyms
HBL 100, HBL100

Documents

Tế bào HBL-100

Cell line · Product number 300178

HBL-100 is a human breast epithelial cell line originally derived from the breast milk of a nursing mother. The milk was collected three days post-deliver...

€430.00excl. tax and shipping
Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HBL-100 là dòng tế bào biểu mô vú người được phân lập ban đầu từ sữa mẹ của một phụ nữ đang cho con bú. Sữa được thu thập ba ngày sau khi sinh, và mặc dù không có bằng chứng về tổn thương vú ở người hiến tặng và không có tiền sử gia đình mắc ung thư vú, các tế bào đã cho thấy karyotype bất thường ở thế hệ thứ 7. Dòng tế bào này nổi bật với khả năng tổng hợp một lượng nhỏ lactose và phản ứng với kích thích prolactin hoặc estrogen bằng cách tăng sản xuất casein. Các phân tích vi thể, như hình ảnh điện tử, đã xác nhận sự hiện diện của vi lông, tonofibrils và desmosomes trong các tế bào này, nhấn mạnh các đặc điểm biểu mô điển hình của chúng.

Tuy nhiên, dòng tế bào HBL-100 đã gặp phải các vấn đề phức tạp liên quan đến việc xác định và đặc trưng hóa. Nó được phát hiện chứa nhiễm sắc thể Y, cho thấy sự xác định sai vì dòng tế bào ban đầu được cho là có nguồn gốc từ nữ. Sự phức tạp thêm nữa đến từ sự hiện diện của các trình tự gen SV40 trong dòng tế bào, trái ngược với quan niệm trước đây rằng nó được bất tử hóa tự nhiên. Những phát hiện này đã dẫn đến tranh luận về nguồn gốc và thành phần di truyền của HBL-100, khiến nó trở thành một dòng tế bào gây tranh cãi cho nghiên cứu nếu không có sự xác minh kỹ lưỡng về đặc điểm và nguồn gốc của nó.

Tissue
Vú
Disease
Ung thư biểu mô
Synonyms
  • HBL 100
  • HBL100

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Tumourigenic
Đúng vậy, trên chuột nude. Ở mức độ nhân giống dưới 35, dòng tế bào này không gây ung thư trên chuột nude, nhưng có thể hình thành các khối u trong agar mềm. Khả năng gây ung thư đã được báo cáo là tăng lên ở mức độ nhân giống trên 35.
Ploidy status
Aneuploid
MSI status
Ổn định (MSS)
Karyotype
Số lượng nhiễm sắc thể của dòng tế bào gốc gần với tam bội, với số lượng trung bình là 67 nhiễm sắc thể, và thành phần 2S chiếm 0,6%. Hầu hết các bộ nhiễm sắc thể bao gồm khoảng 39 nhiễm sắc thể bình thường và 28 nhiễm sắc thể đánh dấu. Các nhiễm sắc thể đánh dấu như 2q, 11q+, 11q, t(2q.12), t(2q.5q?), t(6p?.16), 16pt và nhiều loại khác thường xuất hiện ở hầu hết các giai đoạn metaphase. Các nhiễm sắc thể bình thường 11, 14, 15 và 16 bị thiếu. Các nhiễm sắc thể 2, 12, 17 và 19 là monosomic, và nhiễm sắc thể X là disomic. Phân tích DNA cho amelogenin, một xét nghiệm PCR đặc hiệu cho nhiễm sắc thể giới tính có thể phân biệt các sản phẩm đặc hiệu của nhiễm sắc thể X với các sản phẩm đặc hiệu của nhiễm sắc thể Y, đã cho thấy sự hiện diện của nhiễm sắc thể Y trong dòng tế bào này có nguồn gốc nữ. Việc xác nhận các kết quả chung được thực hiện bằng nhuộm QM, C-banding và FISH, sử dụng probe nhuộm toàn bộ nhiễm sắc thể cho nhiễm sắc thể Y của người.

04Identifiers

Citation
HBL-100 (Số catalog Cytion 300178)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_4362

05Expression and susceptibility

Antigen expression
HLA A1, A10, A11, B7, B8
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 2, ES-D, 1, Me-2, 0, GLO-1, 2, AK-1, 1-2, Tần suất kiểu hình: 0,0008
Viruses
Các tế bào chứa bộ gen SV40 được tích hợp song song. Đã có báo cáo cho rằng chúng có thể chứa một loại retrovirus loại D tương tự hoặc giống hệt với virus khỉ Mason-Pfizer (MPMV).
Reverse transcriptase
Tích cực

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, chứa: 3,0 g/L glucose, chứa: glutamine ổn định, chứa: 2,0 mM natri pyruvate, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
27 năm
Ethnicity
Người da trắng