HROG12 T0 M1
Cell line · Product number 300882
HROG12 T0 M1 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with ...
01General information
- Description
HROG12 T0 M1 הוא קו תאים ראשוני של גליובלסטומה מולטיפורמה (GBM) אנושית, שהוקם מרקמת גידול שנקטעה זה עתה מחולה בוגר שאובחן עם גליובלסטומה בדרגה IV על פי סיווג ארגון הבריאות העולמי (WHO). הסימון "T0" מציין שהדגימה נלקחה במהלך הניתוח הראשוני, ואילו "M1" מתייחס למודל המקביל במבחנה שנוצר מהגידול הראשוני. קו התאים נוצר במסגרת פלטפורמת המודל HROG (Hansestadt Rostock Glioma), המתמקדת ביצירת תרבויות גליומה בעלות מעבר נמוך במיוחד, השומרות על המאפיינים המולקולריים והביולוגיים הספציפיים למטופל.
HROG12 T0 M1 מציג צמיחה דבקה בתנאי תרבית סטנדרטיים ומציג מורפולוגיה דמוית פיברובלסט האופיינית לתרבויות GBM ראשוניות. אפיון אימונופנוטיפי של קווי תאים שמקורם ב-HROG מדגים ביטוי של סמנים של שושלת עצבית וגלית, כגון חלבון חומצי פיברילרי גליאלי (GFAP), נסטין ווימנטין, התומכים במקורו האסטרוציטי של הגידול. בתוך אוסף HROG, הפרופיל המולקולרי כולל הערכה של סמנים ביולוגיים רלוונטיים קלינית, כגון מתילציה של מקדם MGMT, מצב הגברה של EGFR וניתוח מוטציות של גנים, כולל TP53, IDH1/2, KRAS ו-BRAF, המאשרים שימור של שינויים גנומיים הקשורים לגידול בתרבויות מעבר מוקדמות.
HROG12 T0 M1 שימש להערכה במבחנה של תגובות טיפוליות לטיפולים סטנדרטיים בגליובלסטומה, כולל חומרים אלקיליים, וכן לטיפולים ממוקדים הנמצאים בשלבי מחקר. ניתוחים השוואתיים בין מודלים HROG מצביעים על מורפולוגיה יציבה, קינטיקה של צמיחה ניתנת לשחזור ופרופילים עקביים של רגישות לתרופות במעברים מוקדמים. כמודל גליובלסטומה נמוך מעבר שמקורו בחולים, HROG12 T0 M1 מספק פלטפורמה רלוונטית קלינית לחקר הביולוגיה של הגידול, ההטרוגניות המולקולרית ומנגנוני העמידות הטיפולית בגליומה בדרגה גבוהה.
- Tissue
- מוח
- Disease
- גליובלסטומה
02Classification
- Organism
- Human
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Identifiers
- Citation
- HROG12 T0 M1 (מספר קטלוגי Cytion 300882)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FR
04Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים ב-50% מדיום בסיסי + 40% FBS + 10% DMSO, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקירור.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
06Donor
- Ethnicity
- קווקזי
07Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Third-party agreements apply
- Yes
.jpg)