HROG12 T0 M1

HROG12 T0 M1 é uma linhagem celular primária de glioblastoma multiforme (GBM) humano, estabelecida a partir de tecido tumoral recém-ressecado de um paciente adulto diagnosticado com glioblastoma de grau IV segundo a classificação da OMS. A designação “T0” indica que a amostra foi obtida na intervenção cirúrgica inicial, enquanto “M1” refere-se ao modelo in vitro correspondente derivado desse tumor primário. A linhagem celular foi gerada na plataforma de modelos HROG (Hansestadt Rostock Glioma), que se concentra no estabelecimento de culturas de glioma com número ultrabaixo de passagens que mantêm características moleculares e biológicas específicas do paciente.

A HROG12 T0 M1 apresenta crescimento aderente sob condições padrão de cultura e exibe uma morfologia semelhante à dos fibroblastos, típica de culturas primárias de GBM. A caracterização imunofenotípica das linhagens celulares derivadas do HROG demonstra a expressão de marcadores das linhagens neural e glial, como a proteína ácida fibrilar glial (GFAP), nestina e vimentina, corroborando a origem astrocítica do tumor. Dentro da coleção HROG, o perfil molecular inclui a avaliação de biomarcadores clinicamente relevantes, como a metilação do promotor de MGMT, o status de amplificação do EGFR e a análise mutacional de genes, incluindo TP53, IDH1/2, KRAS e BRAF, confirmando a preservação das alterações genômicas associadas ao tumor em culturas de passagens iniciais.

O HROG12 T0 M1 tem sido utilizado para avaliação in vitro de respostas terapêuticas a tratamentos padrão para glioblastoma, incluindo agentes alquilantes, bem como terapias direcionadas em fase de investigação. Análises comparativas entre modelos HROG indicam morfologia estável, cinética de crescimento reproduzível e perfis consistentes de sensibilidade a medicamentos nas primeiras passagens. Como um modelo de glioblastoma derivado de paciente e de baixa passagem, o HROG12 T0 M1 oferece uma plataforma clinicamente relevante para o estudo da biologia tumoral, da heterogeneidade molecular e dos mecanismos de resistência terapêutica no glioma de alto grau.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.