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HROG12 T0 M1
Cell line · Product number 300882
HROG12 T0 M1 is a primary human glioblastoma multiforme (GBM) cell line established from freshly resected tumor tissue of an adult patient diagnosed with ...
01General information
- Description
HROG12 T0 M1系由一名成人患者新鲜切除的肿瘤组织建立的人源性原发性多形性胶质母细胞瘤（GBM）细胞系，该患者经诊断为WHO IV级胶质母细胞瘤。 标记"T0"表示标本取自初次手术干预，而"M1"则指代由此原发肿瘤衍生的体外模型。该细胞系在HROG（汉萨城市罗斯托克胶质瘤）模型平台内建立，该平台专注于创建保留患者特异性分子与生物学特征的超低代次胶质瘤培养体系。
HROG12 T0 M1在标准培养条件下表现为贴壁生长，呈现原发性胶质母细胞瘤培养物典型的成纤维细胞样形态。免疫表型分析显示该细胞系表达神经元及胶质细胞谱系标志物（如胶质纤维酸性蛋白GFAP、神经元前体蛋白nestin及波形蛋白vimentin），证实其星形胶质细胞肿瘤起源。 在HROG细胞库中，分子特征分析涵盖MGMT启动子甲基化、EGFR扩增状态等临床相关生物标志物，以及TP53、IDH1/2、KRAS和BRAF等基因的突变分析，证实早期传代培养物中肿瘤相关基因组改变得以完整保留。
HROG12 T0 M1已被用于体外评估标准胶质母细胞瘤治疗（包括烷化剂）及研究性靶向疗法的治疗反应。 跨HROG模型的比较分析表明，早期传代中具有稳定形态、可重复的生长动力学及一致的药物敏感性谱。作为患者来源的低传代胶质母细胞瘤模型，HROG12 T0 M1为研究高级别胶质瘤的肿瘤生物学、分子异质性及治疗耐药机制提供了具有临床相关性的研究平台。
- Tissue
- 大脑
- Disease
- 胶质母细胞瘤
02Classification
- Organism
- Human
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Identifiers
- Citation
- HROG12 T0 M1（Cytion 目录号 300882）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FR
04Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12（1:1），w: 3.1 g/L 葡萄糖，w: 2.5 mM L-谷氨酰胺，w: 15 mM HEPES，w: 0.5 mM 丙酮酸钠，w: 1.2 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820400a）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
05Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 作为冷冻保存培养基，我们使用 50% 基础培养基 + 40% FBS + 10% DMSO 或 CM-1（Cytion 目录号 800100），其中包括优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，以促进恢复并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
06Donor
- Ethnicity
- 高加索人
07Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Third-party agreements apply
- Yes