- Tissue
- עובר
- Disease
- רגיל
- Metastatic site
- עובר (שלב סגירת הגב)
- Synonyms
- KC, K C
Documents
KC
Cell line · Product number 300604
KC (Kc167) is a Drosophila melanogaster embryonic cell line derived from a dorsal closure stage female embryo. The line was originally established and has...
01General information
- Description
KC (Kc167) הוא קו תאים עוברי של Drosophila melanogaster שמקורו בעובר נקבה בשלב הסגירה הגבית. הקו הוקם במקור ומשמש באופן נרחב בביולוגיה של תאי זבוב התסיסנית, בסריקות גנטיות ובגנומיקה תפקודית. תאי Kc167 עברו תהליך של הנצחה באמצעות SV40 והם גדלים באופן חצי-דבקני, ויוצרים אוכלוסייה מעורבת של תאים צמודים ותאים צפים באופן רופף. הם נמנים עם קווי התאים המאופיינים ביותר של זבוב התסיסנית (Drosophila) והם מתאימים לחלוטין להשתקת גנים בתיווך RNAi, מה שהופך אותם למודל מרכזי לסינונים של RNAi בגנום כולו בביולוגיה של חסרי החוליות.
תאי KC מתאימים לביולוגיה של תאי זבוב התסיסנית, סריקות RNAi ו-CRISPR בגנום כולו, מחקרים על מסלולי העברת אותות (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), מחקר על המערכת החיסונית המולדת ומחקרים השוואתיים של מסלולים שנשמרו לאורך האבולוציה. הגנום של זבוב התסיסנית, שרוצף ונותח במלואו, בשילוב עם מאגרי מידע ציבוריים נרחבים של ריאגנטים ל-RNAi (למשל, DRSC/TRiP), הופך את תאי KC לכלי רב-עוצמה במיוחד לגילוי גנומי פונקציונלי בלתי מוטה. תאים אלה מסווגים כ-BSL-2 בשל הנצחתם באמצעות SV40.
- Tissue
- עובר
- Disease
- רגיל
- Metastatic site
- עובר (שלב סגירת הגב)
- Applications
- ביולוגיה תאית של זבוב התסיסנית (Drosophila); סריקות RNAi בגנום כולו; סריקות CRISPR; העברת אותות (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); מערכת החיסון המולדת; גנומיקה תפקודית של חסרי חוליות
- Synonyms
- KC
- K C
02Classification
- Organism
- Fruit fly
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S2
- GMO status details
- GMO-S2: This Drosophila cell line contains a stably integrated SV40 immortalization cassette. BSL-2 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל חצי-צמוד
- Cell type
- תאי עובר
- Doubling time
- כ-24 עד 48 שעות
04Identifiers
- Citation
- KC (מספר קטלוג Cytion 300604)
- NCBI TaxID
- 7227
- Cellosaurus
- CVCL_Z833
05Expression and susceptibility
- Virus susceptibility
- SV40 הונצח
06Handling and culture
- Culture medium
- מדיום דרוזופילה של שניידר + 2 מ"מ גלוטמין + 10% סרום עגלי (FBS).
- Incubation atmosphere
25°C, אוויר הסביבה (אין צורך ב-CO₂).
- Supplements
- יש להוסיף למדיום 2 מ"מ גלוטמין ו-10% FBS
- Dissociation reagent
- לא נדרש (הדבקה חלקית; יש לערבב בעדינות)
- Subculturing
- יש לשאוב בעדינות את התרבית בעזרת פיפטה כדי להחזיר את התאים החצי-נדבקים למצב של תלייה. העבירו נפח מתאים לצלחת תרבית חדשה והוסיפו מצע שניידר טרי שחומם מראש. דללו לצפיפות של 5 × 10⁵ עד 1 × 10⁶ תאים/מ"ל. הדגרו בטמפרטורה של 25°C באוויר הסביבה ללא CO₂.
- Split ratio
- 1 עד 3
- Seeding density
- 5 × 10⁵ עד 1 × 10⁶ תאים/מ"ל
- Fluid renewal
- כל 2-3 ימים
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- שלב סגירת הגב
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes