KC

A KC (Kc167) é uma linhagem celular embrionária de Drosophila melanogaster derivada de um embrião feminino no estágio de fechamento dorsal. A linhagem foi originalmente estabelecida e tem sido amplamente utilizada na biologia celular da Drosophila, em triagens genéticas e na genômica funcional. As células Kc167 foram imortalizadas com SV40 e crescem de forma semiaderente, formando uma população mista de células aderidas e flutuantes. Elas estão entre as linhagens celulares de Drosophila mais bem caracterizadas e são totalmente suscetíveis ao silenciamento gênico mediado por RNAi, o que as torna um modelo fundamental para triagens de RNAi em todo o genoma na biologia de invertebrados.

As células KC são aplicáveis na biologia celular da Drosophila, em triagens de RNAi e CRISPR em todo o genoma, em estudos de vias de transdução de sinal (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), em pesquisas sobre imunidade inata e em estudos comparativos de vias conservadas evolutivamente. O genoma da Drosophila, totalmente sequenciado e anotado, combinado com extensos bancos de dados públicos de reagentes de RNAi (por exemplo, DRSC/TRiP), torna as células KC particularmente poderosas para descobertas genômicas funcionais imparciais. A classificação BSL-2 se aplica devido à imortalização por SV40.

25 °C, ar ambiente (não é necessário CO₂).

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.