
- Tissue
- דם היקפי
- Disease
- לוקמיה מיאלואידית חריפה
- Synonyms
- OCI-Aml-3, OCI/AML-3, OCI-AML3, OCI/AML3, OCI AML3, OCIAML3, Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3
Documents
01General information
- Description
OCI-AML3 הוא קו תאים של לוקמיה מיאלואידית חריפה (AML) בבני אדם, שמקורו בחולה עם לוקמיה מיאלומונוציטית חריפה (סיווג FAB M4). קו תאים זה נמצא בשימוש נרחב במחקר על לוקמיה בשל הפרופיל הגנטי המאופיין היטב שלו והרלוונטיות שלו לחקר הפתוגנזה של AML והתגובה הטיפולית. תאי OCI-AML3 בולטים במיוחד בשל המוטציה ההטרוזיגוטית בגן nucleophosmin (NPM1), שינוי נפוץ ב-AML הקשור במיקום לא תקין של חלבון NPM1 בציטופלסמה, וכן מוטציה DNMT3A R882C, הקשורה להפרעה אפיגנטית. תכונות אלה הופכות את OCI-AML3 למודל רלוונטי ביותר לחקר מנגנונים מולקולריים מרכזיים ב-AML.
תאי OCI-AML3 גדלים בתמיסה ומפגינים מאפיינים של תאי מיאלואידים לא בשלים עם מורפולוגיה דמוית מונובלסט. קו התאים נמצא בשימוש נרחב לחקר מסלולי אפופטוזיס, התרבות והבחנה ב-AML, כמו גם ההשלכות המולקולריות של מוטציות NPM1 ו-DNMT3A. זהו גם מודל חשוב לחקר תפקידה של הרגולציה האפיגנטית בלוקמיה, שכן ידוע שמוטציות DNMT3A תורמות לשינויים גלובליים בדפוסי מתילציה של DNA.
OCI-AML3 הוא מודל מועדף לפיתוח וסינון תרופות פרה-קליניות, במיוחד להערכת מודולטורים אפיגנטיים כגון מעכבי DNA מתילטרנספראז ומעכבי היסטון דה-אצטילאז, וכן מעכבים מולקולריים קטנים המכוונים למסלולי איתות וחלבונים אנטי-אפופטוטיים. קו תאים זה משמש גם במחקרים הבוחנים מנגנונים של עמידות לתרופות ופיתוח אסטרטגיות לטיפול משולב. בסך הכל, OCI-AML3 נותר כלי חיוני לקידום ההבנה של הביולוגיה של AML ולזיהוי גישות טיפוליות חדשות למחלה הממארת ההמטולוגית האגרסיבית הזו.
- Tissue
- דם היקפי
- Disease
- לוקמיה מיאלואידית חריפה
- Synonyms
- OCI-Aml-3
- OCI/AML-3
- OCI-AML3
- OCI/AML3
- OCI AML3
- OCIAML3
- Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Karyotype
- קריוטיפ היפרדיפלואידי - 48(45-50)<2n>X/XY, +1, +5, +8, der(1)t(1;18)(p11;q11), i(5p), del(13)(q13q21), dup(17)(q21q25) - צדדי עם r(Y)x1-2 - המזיגוטי עבור RB1
- Doubling time
- 30-40 שעות
04Identifiers
- Citation
- OCI-AML3 (מספר קטלוגי Cytion 305432)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1844
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- מוטציה: 2978, DNMT3A, p.Arg882Cys (c.2644C>T), הטרוזיגוטי; מוטציה: NRAS, p.Gln61Leu (c.182A>T), הומוזיגוטי; מוטציה: NPM1, p.Trp288Cysfs*12 (c.860_863dupTCTG), הטרוזיגוטי
- Viruses
- EBV-, HBV-, HCV-, HIV-1-, HIV-2-, HTLV-1/2-, MLV-, SMRV-
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 20% FBS
- Seeding density
- 2 עד 5 x 105 תאים/מ"ל
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 57 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes