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OCI-AML3
Pañuelo de papel
Sangre periférica
Enfermedad
leucemia mieloide aguda
Sinónimos
OCI-Aml-3, OCI/AML-3, OCI-AML3, OCI/AML3, OCI AML3, OCIAML3, Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3

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OCI-AML3

Cell line · Número de producto 305432

OCI-AML3 is a human acute myeloid leukemia (AML) cell line derived from a patient with acute myelomonocytic leukemia (FAB classification M4). This cell li...

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01Información general

Descripción

OCI-AML3 es una línea celular de leucemia mieloide aguda (LMA) humana derivada de un paciente con leucemia mielomonocítica aguda (clasificación FAB M4). Esta línea celular se utiliza ampliamente en la investigación de la leucemia debido a su perfil genético bien caracterizado y su relevancia para el estudio de la patogénesis de la LMA y la respuesta terapéutica. Las células OCI-AML3 son especialmente notables por albergar una mutación heterocigótica en el gen nucleofosmina (NPM1), una alteración común en la LMA que se asocia con una localización anómala de la proteína NPM1 en el citoplasma, así como una mutación DNMT3A R882C, que está implicada en la desregulación epigenética. Estas características hacen que OCI-AML3 sea un modelo muy relevante para el estudio de los mecanismos moleculares clave en la LMA.

Las células OCI-AML3 crecen en suspensión y presentan características de células mieloides inmaduras con morfología similar a la de los monoblastos. La línea celular se ha utilizado ampliamente para estudiar las vías de apoptosis, proliferación y diferenciación en la LMA, así como las consecuencias moleculares de las mutaciones NPM1 y DNMT3A. También es un modelo valioso para investigar el papel de la regulación epigenética en la leucemogénesis, ya que se sabe que las mutaciones DNMT3A contribuyen a cambios globales en los patrones de metilación del ADN.

OCI-AML3 es un modelo preferido para el desarrollo y la selección de fármacos en fase preclínica, en particular para evaluar moduladores epigenéticos como los inhibidores de la metiltransferasa de ADN y los inhibidores de la histona deacetilasa, así como inhibidores de moléculas pequeñas dirigidos a vías de señalización y proteínas antiapoptóticas. Esta línea celular también se utiliza en estudios que examinan los mecanismos de resistencia a los fármacos y el desarrollo de estrategias de terapia combinada. En general, OCI-AML3 sigue siendo una herramienta fundamental para avanzar en la comprensión de la biología de la LMA y para identificar nuevos enfoques terapéuticos para esta neoplasia hematológica agresiva.

Pañuelo de papel
Sangre periférica
Enfermedad
leucemia mieloide aguda
Sinónimos
  • OCI-Aml-3
  • OCI/AML-3
  • OCI-AML3
  • OCI/AML3
  • OCI AML3
  • OCIAML3
  • Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Cariotipo
Cariotipo hiperdiploide: 48(45-50)<2n>X/XY, +1, +5, +8, der(1)t(1;18)(p11;q11), i(5p), del(13)(q13q21), dup(17)(q21q25) - línea lateral con r(Y)x1-2 - hemicigótico para RB1
Tiempo de duplicación
30-40 horas

04Identificadores

Referencia
OCI-AML3 (número de catálogo de Cytion 305432)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1844

05Expresión y susceptibilidad

Perfil mutacional
Mutación: 2978, DNMT3A, p.Arg882Cys (c.2644C>T), heterocigótica; Mutación: NRAS, p.Gln61Leu (c.182A>T), homocigótica; Mutación: NPM1, p.Trp288Cysfs*12 (c.860_863dupTCTG), heterocigótica.
Virus
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 20% de FBS
Densidad de siembra
De 2 a 5 x 105 células/ml
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
57 años
Origen étnico
Caucásico