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OCI-AML3
Tessuto
Sangue periferico
Malattia
leucemia mieloide acuta
Sinonimi
OCI-Aml-3, OCI/AML-3, OCI-AML3, OCI/AML3, OCI AML3, OCIAML3, Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3

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OCI-AML3

Cell line · Codice prodotto 305432

OCI-AML3 is a human acute myeloid leukemia (AML) cell line derived from a patient with acute myelomonocytic leukemia (FAB classification M4). This cell li...

€550.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

OCI-AML3 è una linea cellulare umana di leucemia mieloide acuta (AML) derivata da un paziente affetto da leucemia mielomonocitica acuta (classificazione FAB M4). Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata nella ricerca sulla leucemia grazie al suo profilo genetico ben caratterizzato e alla sua rilevanza nello studio della patogenesi dell'AML e della risposta terapeutica. Le cellule OCI-AML3 sono particolarmente note per ospitare una mutazione eterozigote nel gene nucleofosmina (NPM1), un'alterazione comune nella AML associata a una localizzazione anomala della proteina NPM1 nel citoplasma, nonché una mutazione DNMT3A R882C, implicata nella disregolazione epigenetica. Queste caratteristiche rendono OCI-AML3 un modello altamente rilevante per lo studio dei meccanismi molecolari chiave nella LMA.

Le cellule OCI-AML3 crescono in sospensione e mostrano caratteristiche di cellule mieloidi immature con morfologia simile a quella dei monoblasti. La linea cellulare è stata ampiamente utilizzata per studiare i percorsi di apoptosi, proliferazione e differenziazione nella LMA, nonché le conseguenze molecolari delle mutazioni NPM1 e DNMT3A. È anche un modello prezioso per studiare il ruolo della regolazione epigenetica nella leucemogenesi, poiché è noto che le mutazioni DNMT3A contribuiscono a cambiamenti globali nei modelli di metilazione del DNA.

OCI-AML3 è un modello preferito per lo sviluppo e lo screening preclinico di farmaci, in particolare per la valutazione di modulatori epigenetici come gli inibitori della DNA metiltransferasi e gli inibitori dell'istone deacetilasi, nonché di inibitori a piccole molecole che prendono di mira le vie di segnalazione e le proteine antiapoptotiche. Questa linea cellulare è utilizzata anche in studi che esaminano i meccanismi di resistenza ai farmaci e lo sviluppo di strategie di terapia combinata. Nel complesso, OCI-AML3 rimane uno strumento fondamentale per approfondire la comprensione della biologia della LMA e per identificare nuovi approcci terapeutici per questa neoplasia ematologica aggressiva.

Tessuto
Sangue periferico
Malattia
leucemia mieloide acuta
Sinonimi
  • OCI-Aml-3
  • OCI/AML-3
  • OCI-AML3
  • OCI/AML3
  • OCI AML3
  • OCIAML3
  • Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Cariotipo
Cariotipo iperdiploide - 48(45-50)<2n>X/XY, +1, +5, +8, der(1)t(1;18)(p11;q11), i(5p), del(13)(q13q21), dup(17)(q21q25) - linea laterale con r(Y)x1-2 - emizigote per RB1
Tempo di raddoppio
30-40 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
OCI-AML3 (numero di catalogo Cytion 305432)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1844

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: 2978, DNMT3A, p.Arg882Cys (c.2644C>T), eterozigote; Mutazione: NRAS, p.Gln61Leu (c.182A>T), omozigote; Mutazione: NPM1, p.Trp288Cysfs*12 (c.860_863dupTCTG), eterozigote
Virus
EBV -, HBV -, HCV -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 20% di FBS
Densità di semina
Da 2 a 5 x 105 cellule/ml
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
57 anni
Etnia
Caucasico