קו תאים HT22

HT22 הוא קו תאים עצביים של עכברים הנמצא בשימוש נרחב במחקר בנוירולוגיה. הוא בעל ערך רב לחקר מחלות ניווניות של מערכת העצבים ולבחינת טיפולים או תרופות פוטנציאליות להגנה על מערכת העצבים. בנוסף, תאי HT22 רגישים לגלוטמט, ולכן משמשים לחקר רעילות הנגרמת מגלוטמט או נזק עצבי.

מאמר זה מדגיש את המאפיינים החשובים של תאי HT22 שיכולים לסייע לכם בעבודת המחקר שלכם. הוא יעסוק בעיקר ב:

1. מאפיינים כלליים ומקור תאי HT22
2. מידע על גידול קו תאי HT22
3. יתרונות וחסרונות של קו התאים HT22
4. יישומים מחקריים של קו התאים HT22
5. פרסומים מחקריים העוסקים בתאי HT22
6. משאבים לתאי HT22: פרוטוקולים, סרטונים ועוד

מאפיינים כלליים ומקור תאי HT22

חלק זה של המאמר ישפוך אור על מקורם ומאפייניהם הכלליים של תאי HT22. יש צורך לדעת מידע זה אודות קו תאים לפני שמתחילים לעבוד עמו. כאן תלמדו: מה הם תאי HT22? מהו המורפולוגיה של תאי ההיפוקמפוס HT22? מהו גודל תאי HT22?

HT22 הוא קו תאים רציף שמקורו באזור ההיפוקמפוס במוח העכבר. זהו תת-שיבוט של קו התאים ההורי HT-4, שפותח באמצעות הנצחת רקמות עצביות של עכברים באמצעות אנטיגן T של נגיף פוליאומווירוס סימיאני 40 (SV40) הרגיש לטמפרטורה.

תאים אלה נבדלים מתאי היפוקמפוס בוגרים, שכן הם חסרים קולטני גלוטמט וקולטנים כולינרגיים, בניגוד לנוירונים בוגרים שמקורם בהיפוקמפוס. לפיכך, הם אינם מתאימים למחקרים הקשורים לזיכרון [1].

לתאי HT22 מראה הדומה לתאי אפיתל.

פלאקים עמילואידיים הנוצרים בין תאי עצב במחלת אלצהיימר.

מידע על גידול קו תאים HT22

תאי HT22 משמשים במעבדות מחקר בתחום מדעי המוח. לפני גידול תאים אלה, חוקרים מחפשים מידע חיוני על גידול תאים שיקל עליהם את העבודה ויעשה אותה יעילה יותר. סעיף זה מכסה את כל הנקודות המרכזיות לגידול תאי HT22. תוכלו ללמוד: מהו זמן הכפלת התאים של HT22? כיצד מגדלים תאי HT22? מהו פרוטוקול תרבית תאי HT22? מהו מצע התאים HT22?

נקודות מרכזיות לגידול תאי HT22

זמן הכפלה:

זמן הכפלת תאי HT22 הוא כ-15 שעות.

תאים דבקים או בתמיסה:

תאי HT22 הם תאים דבקים.

יחס תת-גידול:

יחס התרבית המשנית לתאי ההיפוקמפוס HT22 הוא 1:3 עד 1:6. בקצרה, מסירים את התווך, ושוטפים את התאים הנצמדים ב-1 x PBS. מוסיפים תמיסת פירוק Accutase לצלחת, והתאים עוברים אינקובציה למשך 8 עד 10 דקות בטמפרטורת החדר. לאחר מכן, מוסיפים מדיום תרבית טרי, והתאים נאספים בבקבוקון לצורך צנטריפוגה. משקע התאים שהתקבל מושעה בזהירות, והתאים מועברים לצלחת תרבית לצורך גידול.

מדיום גידול:

מדיום DMEM משמש לגידול תאי HT22. הוא מועשר ב-10% FBS, 4.5 g/L גלוקוז, 4 mM L-גלוטמין, 1.5 g/L NaHCO3 ו-1.0 mM פירובט נתרן לצורך גידול תאים מיטבי.

תנאי גידול:

תרבויות תאי HT22 נשמרות באינקובטור לח (בטמפרטורה של 37 °C) עם אספקת CO₂ של 5%.

אחסון:

ניתן לאחסן תאי HT22 קפואים בטמפרטורה הנמוכה מ-150 °C, בשלב האדי של חנקן נוזלי או במקפיא חשמלי בטמפרטורה נמוכה במיוחד, לטווח ארוך.

תהליך הקפאה ומצע:

ניתן להקפיא תאי HT22 במדיום CM-1 או CM-ACF בשיטת הקפאה איטית. תהליך זה מאפשר ירידה של 1 °C בלבד בטמפרטורת הדגימה בכל דקה, מגן על התאים מפני הלם ומסייע בשמירה על חיוניותם.

תהליך ההפשרה:

התאים מופשרים באמבט מים בטמפרטורה של 37 °C למשך 40 עד 60 שניות, עד שנותר גוש קרח קטן. לאחר מכן, מוסיפים לתאים מדיום תרבית, והם עוברים צנטריפוגה כדי לסלק את מרכיבי מדיום ההקפאה. משקע התאים מושעה מחדש והתאים מוזגים לתוך בקבוקון חדש המכיל מדיום תרבית. לאחר מכן, התאים עוברים אינקובציה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באינקובטור למשך 24 שעות לפחות.

רמת בטיחות ביולוגית:

לצורך גידול תאי HT22 נדרשת סביבת מעבדה ברמת בטיחות ביולוגית 1.

 

שכבות חד-תאיות של תאי HT22 המכסות 30% ו-90% מהמשטח בתרבית תאים.

יתרונות וחסרונות של קו התאים HT22

לתאי ההיפוקמפוס HT22 יש יתרונות וחסרונות מסוימים המבדילים אותם מקווי תאים עצביים אחרים. להלן כמה יתרונות וחסרונות בולטים של קו התאים.

יתרונות

היתרונות של קו התאים העצביים העכברי HT22 הם:

• קצב גדילה מהיר

  לתאי HT22 זמן הכפלה של 15 שעות, מה שמאפשר ניסויים מהירים ויעילים ומסייע בהשגת תוצאות מחקר בזמן.

• הנצחיות

  HT22 הוא קו תאים שהפך לבלתי-מותי, מה שמבטיח צמיחה רציפה לאורך תקופות ממושכות. הדבר מספק זמינות עקבית של תאים, מקצר את הזמן והעלות, ומאפשר ניסויים ארוכי-טווח עם תוצאות עקביות.

חסרונות

החסרונות של תאי HT22 הם:

• מקור עכברי

  קו התאים HT22 נגזר מרקמת ההיפוקמפוס במוח עכבר, אשר עשויה שלא לייצג באופן מלא את המורכבות של הפיזיולוגיה וההתנהגות של תאי עצב אנושיים, דבר המגביל את הרלוונטיות התרגומית שלהם.

 4. יישומים מחקריים של קו התאים HT22

תאי HT22 נמצאים בשימוש נרחב במחקר בנוירוביולוגיה. בסעיף זה של המאמר נדון בכמה יישומים מבטיחים של קו תאים זה:

• מחקר בנוירוביולוגיה: תאי HT22 נמצאים בשימוש נרחב במחקר על מחלות ניווניות של מערכת העצבים, כגון מחלת אלצהיימר ומחלת פרקינסון. הם נחשבים לכלי מחקר חשוב לחקר מנגנוני הנוירוטוקסיות והלחץ החמצוני הקשורים למחלות אלה. מחקר שנערך בשנת 2020 מצא כי מסלול ה-PI3K/AKT/CREB מעורב ברעילות עצבית הנגרמת מהיפרגליקמיה בתאי HT22 [2]. באופן דומה, מחקר שנערך לאחרונה הציע כי מסלול Nrf2/HO-1 וציר האיתות NF-κB ממלאים תפקידים משמעותיים ברעילות בטא-עמילואיד ב-HT22 [3].
• סינון תרופות: תאי HT22 משמשים באופן נרחב למטרות בדיקת תרופות וסינון. הם מסייעים לחוקרים לזהות חומרים טיפוליים פוטנציאליים המפגינים השפעות נוירו-מגנות למאבק במחלות ניווניות של מערכת העצבים. מחקר שנערך בשנת 2019 בחן את הפוטנציאל הנוירו-מגן של תרכובת טטרהידרו-כורכומין בתאי היפוקמפוס HT22 שטופלו בגלוטמט. במקרה זה, הגלוטמט גורם לעקה חמצונית בתאי HT22 ומביא למוות תאי על ידי הפעלת קינאזות חלבון המופעלות על ידי מיטוגן [4]. 

5. פרסומים מחקריים העוסקים בתאי HT22

להלן מספר מאמרים מחקריים מעניינים העוסקים בקו התאים HT22:

חקר ההשפעות הנוירו-מגנות של קרוצין באמצעות פעילות נוגדת חמצון בתאי HT22 ובעכברים עם מחלת אלצהיימר

מחקר זה, שפורסם ב-International Journal of Molecular Medicine (2019), הציע את הפוטנציאל הנוירו-מגן של קרוצין, תרכובת המבודדת מ-Crocus sativus L., בתאי HT22 שנפגעו מ-L-גלוטמט.

נגזרות אוקסינדול חדשות מונעות מוות תאי הנגרם על ידי לחץ חמצוני בתאי HT22 בהיפוקמפוס של עכברים

פרסום זה ב-Neuropharmacology (2018) דיווח כי נגזרות אוקסינדול מגנות מפני מוות של תאי HT22 הנגרם על ידי לחץ חמצוני.

ג'ינסנוסיד Rb2 מדכא את הלחץ החמצוני המתווך על ידי גלוטמט ואת מות התאים העצביים בתאי HT22

מאמר מחקר זה פורסם ב-Journal of Ginseng Research בשנת 2019. מחקר זה בחן את ההשפעות הנוירו-מגנות של מוצר טבעי, ג'ינסנוסיד Rb2, באמצעות קו תאים HT22. המחקר מצא כי ג'ינסנוסיד Rb2 הפחית ביעילות את הלחץ החמצוני הנגרם על ידי גלוטמט ואת מות התאים בתאי ההיפוקמפוס של עכברים HT22.

ננו-חלקיקי כסף גרמו לציטוטוקסיות בתאי HT22 באמצעות אוטופגיה ואפופטוזיס דרך מסלול האיתות PI3K/AKT/mTOR

מחקר זה, שפורסם ב-Ecotoxicology and Environmental Safety (2021), העריך את הפוטנציאל הציטוטוקסי של חלקיקי ננו-כסף בקו התאים HT22.

Ferrostatin-1 מגן על תאי HT-22 מפני רעילות חמצונית

מאמר מחקר זה פורסם בשנת 2020 בכתב העת Neural regeneration research. הוא הציע כי פרוסטטין-1, מעכב של פרופטוזיס, מונע רעילות חמצונית בתאי ההיפוקמפוס HT22.

משאבים לתאי HT22: פרוטוקולים, סרטונים ועוד

כמה משאבים מקוונים על תאי HT22 מסבירים את פרוטוקולי הטרנספקציה, ההבחנה והתרבות התאית שלהם:

• טרנספקציה של HT22: מסמך זה מכיל פרוטוקול מיטבי לטרנספקציה של HT22 בצלחות תרבית תאים בעלות 24 ו-96 שקעים.
• התמיינות תאי HT22: מאמר זה ינחה אתכם באופן מקיף בנוגע לפרוטוקול ההתמיינות של תאי HT22.

הקישור הבא מכיל את פרוטוקול תרבית תאי HT22:

• תת-תרבית תאי HT22: קישור זה יסייע לכם ללמוד את פרוטוקול תת-התרבית עבור קו התאים HT22. בנוסף, הוא יסייע לכם ללמוד את הפרוטוקול להשראת נוירוטוקסיות בתאים.
• תאי היפוקמפוס HT22: אתר זה מכיל מידע רב ושימושי על זמן הכפלת תאי HT22, מצעים ופרוטוקולי תרבית תאים.

מקורות

1. He, M., et al., Differentiation renders susceptibility to excitotoxicity in HT22 neurons. Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
2. Zhang, S., et al., Fisetin prevents HT22 cells from high glucose-induced neurotoxicity via PI3K/Akt/CREB signaling pathway. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: p. 241.
3. Zhang, R.-l., et al., השפעות מגנות של ברברין כנגד נוירוטוקסיות הנגרמת על ידי β-עמילואיד בתאי HT22 באמצעות מסלול Nrf2/HO‐1. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: עמ' 106-210.
4. Park, C.-H., et al., השפעות נוירו-מגנות של טטרהידרוכורכומין כנגד לחץ חמצוני הנגרם על ידי גלוטמט בתאי HT22 בהיפוקמפוס. Molecules, 2019. 25(1): עמ' 144.