HT22 細胞系

HT22 是一種常見於神經科學研究的小鼠神經元細胞系。它在研究神經退化性疾病以及測試潛在的神經保護療法或治療方法方面具有重要價值。此外，HT22 細胞對谷氨酸敏感，因此常被用於研究谷氨酸誘導的毒性或神經元損傷。

本文重點介紹 HT22 細胞的關鍵特性，這些特性可協助您的研究工作。本文主要將探討：

1. HT22 細胞的一般特性與來源
2. HT22 細胞系的培養資訊
3. HT22 細胞系的優點與缺點
4. HT22 細胞系的研究應用
5. 以 HT22 細胞為主題的研究文獻
6. HT22 細胞相關資源：操作手冊、影片及其他

HT22 細胞的一般特性與來源

本文此部分將闡述 HT22 細胞的來源與一般特性。在開始使用該細胞系進行研究之前，了解這些資訊是必要的。在此，您將了解：何謂 HT22 細胞？HT22 海馬迴細胞的形態為何？HT22 細胞的大小為何？

HT22 是一種源自小鼠腦部海馬迴區域的連續細胞系。它是親代 HT-4 細胞系的亞克隆，透過使用溫度敏感型多瘤病毒——猿病毒 40 型（SV40）T 抗原，將小鼠神經組織永生化而開發出來。

這些細胞與成熟的海馬迴細胞不同，因為它們缺乏像源自海馬迴的成熟神經元那樣的谷氨酸受體和膽鹼能受體。因此，它們不適合用於與記憶相關的研究 [1]。

HT22 細胞的外觀類似上皮細胞。

阿茲海默症患者的神經元之間會形成澱粉樣斑塊。

HT22 細胞系培養資訊

HT22 細胞廣泛應用於神經科學研究實驗室。在培養這些細胞之前，研究人員會尋找必要的細胞培養資訊，以確保工作能輕鬆且高效地進行。本節涵蓋了培養 HT22 細胞的所有關鍵要點。您將了解：HT22 細胞的倍增時間是多少？該如何培養 HT22 細胞？ HT22 細胞的培養流程為何？HT22 細胞的培養基為何？

HT22 細胞培養的重點

倍增時間：

HT22 細胞的倍增時間約為 15 小時。

貼壁或懸浮培養：

HT22 細胞屬於貼壁型。

傳代比例：

HT22 海馬體細胞的傳代比例為 1:3 至 1:6。簡要而言，先移除培養基，並以 1×PBS 沖洗貼壁細胞。 將 Accutase 解離液加入培養瓶中，並於室溫下孵育 8 至 10 分鐘。隨後加入新鮮培養基，將細胞收集至試管中進行離心。將所得細胞沉澱物小心重懸，並分裝至培養瓶中進行培養。

生長培養基：

HT22 細胞的培養使用 DMEM 培養基。為達到最佳細胞生長效果，該培養基中添加了 10% FBS、4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、1.5 g/L NaHCO₃ 以及 1.0 mM 丙酮酸鈉。

培養條件：

HT22 細胞培養物置於加濕培養箱（37 °C）中，並供應 5% _二氧化碳。

儲存：

冷凍的 HT22 細胞可儲存於低於 -150 °C 的環境中，無論是液態氮的氣相中，或超低溫電動冷凍櫃內，皆可進行長期保存。

冷凍流程與培養基：

HT22 細胞可使用緩慢冷凍法，於 CM-1 或 CM-ACF 培養基中進行冷凍。此過程使樣本溫度每分鐘僅下降 1 °C，可保護細胞免受冷凍衝擊，並有助於維持其存活率。

解凍程序：

將細胞置於 37 °C 水浴中解凍 40 至 60 秒，直至僅剩一小塊冰塊。隨後，向細胞中加入培養基，並進行離心以去除冷凍培養基成分。將細胞沉澱重新懸浮，並將細胞倒入裝有培養基的新培養瓶中。 隨後，將細胞置於 37 °C 的培養箱中培養至少 24 小時。

生物安全等級：

培養 HT22 細胞必須在生物安全等級 1 的實驗室環境中進行。

 

細胞培養中，HT22 細胞的 30% 及 90% 融合單層。

HT22 細胞系的優點與缺點

HT22 海馬迴細胞具有一些優點與缺點，使其有別於其他神經元細胞系。以下將列舉該細胞系的一些顯著優點與缺點。

優點

HT22小鼠神經元細胞系的優點包括：

• 生長速度快

  HT22 細胞的倍增時間為 15 小時，可實現快速且高效的實驗，並有助於及時獲得研究成果。

• 永生化

  HT22 為不朽化細胞系，可確保長期持續增殖。此特性不僅能穩定供應細胞，還能節省時間與成本，並有助於進行長期實驗並獲得一致的結果。

缺點

HT22 細胞的缺點包括：

• 源自小鼠

  HT22 細胞系源自小鼠大腦海馬迴組織，可能無法完全反映人類神經元細胞生理學與行為的複雜性，因而限制了其轉譯相關性。

 4. HT22 細胞系的研究應用

HT22 細胞廣泛應用於神經生物學研究。本文本節將探討此細胞系幾項具潛力的應用：

• 神經科學研究：HT22 細胞廣泛應用於神經退行性疾病（例如阿茲海默症與帕金森氏症）的研究。它們被視為研究這些疾病相關神經毒性及氧化壓力機制的重要研究工具。 2020 年的一項研究發現，PI3K/AKT/CREB 路徑參與了高血糖在 HT22 細胞中誘導的神經毒性 [2]。 同樣地，一項近期研究提出，Nrf2/HO-1 路徑與 NF-κB 訊號軸在 HT22 細胞的β-澱粉樣蛋白毒性中扮演重要角色 [3]。
• 藥物篩選：HT22 細胞廣泛應用於藥物測試與篩選。它們有助於研究人員識別具有神經保護作用的潛在治療藥物，以對抗神經退行性疾病。 一項於 2019 年進行的研究，探討了四氫薑黃素化合物在谷氨酸處理的 HT22 海馬迴細胞中的神經保護潛力。在此研究中，谷氨酸會誘發 HT22 細胞的氧化壓力，並透過活化絲裂原活化蛋白激酶導致細胞死亡 [4]。 

5. 以 HT22 細胞為主題的研究論文

以下是一些以 HT22 細胞系為研究對象的有趣論文：

探討靛紅透過抗氧化活性在 HT22 細胞及阿茲海默症小鼠中發揮的神經保護作用

這項發表於《國際分子醫學期刊》（2019年）的研究指出，從番紅花（Crocus sativus L.）中分離出的化合物「番紅花素」，在受 L-谷氨酸損傷的 HT22 細胞中具有神經保護潛力。

新型吲哚衍生物可預防小鼠海馬迴 HT22 細胞因氧化壓力所引起的細胞死亡

這篇發表於《神經藥理學》（2018年）的論文指出，氧吲哚衍生物能保護HT22細胞免於氧化壓力所誘導的細胞死亡。

人參皂苷 Rb2 可抑制 HT22 細胞中由谷氨酸介導的氧化壓力及神經元細胞死亡

這篇研究論文於2019年發表於《人參研究期刊》（Journal of Ginseng Research）。該研究利用HT22細胞系，探討了天然產物人參皂苷Rb2的神經保護作用。 研究發現，人參皂苷 Rb2 能有效減輕谷氨酸在小鼠海馬迴細胞 HT22 中所誘發的氧化壓力與細胞死亡。

銀奈米粒子透過PI3K/AKT/mTOR訊號傳導路徑，以自噬和凋亡機制誘導HT22細胞的細胞毒性

這項發表於《生態毒理學與環境安全》（2021年）的研究，評估了銀奈米粒子在HT22細胞系中的細胞毒性潛力。

鐵抑素-1 可保護 HT-22 細胞免受氧化毒性傷害

這篇研究論文於2020年發表於《神經再生研究》（Neural Regeneration Research）期刊。該研究提出，鐵死亡抑制劑鐵抑素-1（ferrostatin-1）能防止HT22海馬迴細胞受到氧化毒性損害。

HT22 細胞相關資源：操作手冊、影片及其他

部分關於 HT22 細胞的線上資源說明了其轉染、分化及細胞培養操作手冊：

• HT22 轉染：本文件包含適用於 24 孔及 96 孔細胞培養板之 HT22 轉染優化操作流程。
• HT22 細胞分化：本文將針對 HT22 分化操作流程提供全面指引。

以下連結包含 HT22 細胞培養操作流程：

• HT22 細胞傳代：此連結將協助您了解 HT22 細胞系的傳代操作流程，此外，亦可協助您學習誘導細胞神經毒性的操作流程。
• HT22 海馬迴細胞：本網站包含大量關於 HT22 細胞倍增時間、培養基及細胞培養操作流程的實用資訊。

參考文獻

1. He, M. 等，分化使 HT22 神經元易受興奮性毒性影響。《神經再生研究》（Neural Regen Res），2013 年，8(14)：第 1297-306 頁。
2. Zhang, S. 等，槲皮素透過 PI3K/Akt/CREB 訊號傳導路徑，防止 HT22 細胞受到高血糖誘導的神經毒性。《神經科學前沿》，2020 年，第 14 卷：第 241 頁。
3. 張，R.-l.等人，小檗鹼透過Nrf2/HO-1途徑對HT22細胞中β-澱粉樣蛋白誘導的神經毒性具有保護作用。《生物有機化學》，2023年，第133卷：第106-210頁。
4. Park, C.-H.等人，四氫薑黃素對海馬體HT22細胞中谷氨酸誘導之氧化壓力之神經保護作用。《分子》，2019年，25(1)：第144頁。