HT22 เซลล์ไลน์

HT22 เป็นสายพันธุ์เซลล์ประสาทของหนูที่ถูกนำมาใช้ในงานวิจัยทางประสาทวิทยาอย่างแพร่หลาย มีคุณค่าในการศึกษาโรคทางระบบประสาทเสื่อมและการทดสอบการรักษาหรือบำบัดที่มีศักยภาพในการปกป้องเซลล์ประสาท นอกจากนี้ เซลล์ HT22 ยังไวต่อกลูตาเมต จึงถูกใช้ในการศึกษาความเป็นพิษหรือความเสียหายของเซลล์ประสาทที่เกิดจากกลูตาเมต

บทความนี้เน้นย้ำถึงแง่มุมที่สำคัญของเซลล์ HT22 ที่สามารถช่วยคุณในงานวิจัยของคุณได้ บทความนี้จะหารือถึง:

1. ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ HT22
2. ข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์สายพันธุ์ HT22
3. ข้อดีและข้อเสียของเซลล์ไลน์ HT22
4. การวิจัยการประยุกต์ใช้สายพันธุ์เซลล์ HT22
5. สิ่งพิมพ์งานวิจัยที่นำเสนอเซลล์ HT22
6. ทรัพยากรสำหรับเซลล์ HT22: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ

ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ HT22

ส่วนนี้จะอธิบายถึงที่มาและลักษณะทั่วไปของเซลล์ HT22 การทราบข้อมูลเกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์นี้มีความจำเป็นก่อนที่จะเริ่มทำงานกับมัน ในที่นี้ คุณจะได้เรียนรู้: เซลล์ HT22 คืออะไร? รูปร่างของเซลล์ฮิปโปแคมปัส HT22 เป็นอย่างไร? ขนาดของเซลล์ HT22 คืออะไร?

HT22 เป็นสายเซลล์ต่อเนื่องที่ได้มาจากบริเวณฮิปโปแคมปัสของสมองหนู เป็นสายย่อยของสายเซลล์ HT-4 ต้นกำเนิด ซึ่งพัฒนาขึ้นโดยการทำให้เซลล์มีชีวิตยืนยาวอย่างถาวรจากเนื้อเยื่อประสาทของหนู ผ่านการเหนี่ยวนำด้วยแอนติเจน T จากไวรัสโพลิโอมาไวรัสที่มีความไวต่ออุณหภูมิ ซิมแปนซีไวรัส 40 (SV40)

เซลล์เหล่านี้แตกต่างจากเซลล์ฮิปโปแคมปัสที่เจริญเต็มที่ เนื่องจากขาดตัวรับกลูตาเมตและตัวรับโคลินเนอร์จิกเช่นเดียวกับเซลล์ประสาทที่เจริญเต็มที่ซึ่งมีต้นกำเนิดจากฮิปโปแคมปัส ดังนั้น เซลล์เหล่านี้จึงไม่เหมาะสำหรับการศึกษาวิจัยที่เกี่ยวข้องกับหน่วยความจำ [1]

เซลล์ HT22 มีลักษณะคล้ายเซลล์เยื่อบุผิว

คราบอะไมลอยด์ที่ก่อตัวขึ้นระหว่างเซลล์ประสาทในโรคอัลไซเมอร์

ข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์สายพันธุ์ HT22

เซลล์ HT22 ถูกใช้ในห้องปฏิบัติการวิจัยทางประสาทวิทยา ก่อนที่จะเพาะเลี้ยงเซลล์เหล่านี้ นักวิจัยจะค้นหาข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่จำเป็นซึ่งทำให้การทำงานของพวกเขาง่ายและมีประสิทธิภาพ ส่วนนี้จะครอบคลุมทุกประเด็นสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22 คุณจะทราบ: เวลาการเพิ่มจำนวนของเซลล์ HT22 คืออะไร? คุณจะเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22 ได้อย่างไร? โปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22 คืออะไร? สารอาหารสำหรับเซลล์ HT22 คืออะไร?

จุดสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22

เวลาสองเท่า:

เวลาการเพิ่มจำนวนเซลล์ HT22 ประมาณ 15 ชั่วโมง

ติดกันหรือแขวนลอย:

เซลล์ HT22 ติดแน่น

อัตราส่วนการเพาะปลูกย่อย:

อัตราส่วนการเพาะเลี้ยงย่อยสำหรับเซลล์ฮิปโปแคมปัส HT22 คือ 1:3 ถึง 1:6 โดยสรุปคือ ทำการนำสื่อออก แล้วล้างเซลล์ที่เกาะติดด้วย 1 x PBS สารละลายแยกเซลล์ Accutase ถูกเติมลงในขวดเพาะเลี้ยง และเซลล์จะถูกบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8 ถึง 10 นาที หลังจากนั้น สารอาหารเพาะเลี้ยงใหม่จะถูกเติมลงไป และเซลล์จะถูกเก็บในหลอดทดลองเพื่อนำไปปั่นเหวี่ยง เซลล์ที่ตกตะกอนจะถูกละลายอย่างระมัดระวัง และเซลล์จะถูกนำไปแบ่งลงในขวดเพาะเลี้ยงเพื่อเพิ่มจำนวน

อาหารเลี้ยงเชื้อ:

DMEM เป็นอาหารเลี้ยงเซลล์ที่ใช้สำหรับเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22 โดยเติม FBS 10%, กลูโคส 4.5 กรัม/ลิตร, L-Glutamine 4 มิลลิโมลาร์, NaHCO3 1.5 กรัม/ลิตร และ Sodium pyruvate 1.0 มิลลิโมลาร์ เพื่อการเจริญเติบโตของเซลล์ที่เหมาะสมที่สุด

เงื่อนไขการเจริญเติบโต:

เซลล์ HT22 ถูกเก็บรักษาไว้ในตู้เพาะเลี้ยงแบบควบคุมความชื้น (อุณหภูมิ 37 °C) พร้อมกับการจ่าย_ก๊า_{ซคาร์บอนไดออกไซด์} 5%

การเก็บรักษา:

เซลล์ HT22 ที่ถูกแช่แข็งสามารถเก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150 °C ได้ทั้งในสถานะไอของไนโตรเจนเหลวหรือในตู้แช่แข็งไฟฟ้าอุณหภูมิต่ำพิเศษสำหรับการเก็บรักษาระยะยาว

กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง:

เซลล์ HT22 สามารถแช่แข็งในสื่อ CM-1 หรือ CM-ACF โดยใช้วิธีการแช่แข็งแบบช้าได้ กระบวนการนี้อนุญาตให้ลดอุณหภูมิของตัวอย่างได้เพียง 1 °C ต่อนาทีเท่านั้น ช่วยปกป้องเซลล์จากการช็อก และช่วยรักษาความมีชีวิตของเซลล์ไว้

กระบวนการละลาย

เซลล์ถูกทำให้ละลายในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 37 °C เป็นเวลา 40 ถึง 60 วินาที จนกระทั่งเหลือเป็นก้อนน้ำแข็งขนาดเล็ก หลังจากนั้นเติมอาหารเลี้ยงเซลล์ลงในเซลล์ แล้วนำไปปั่นเหวี่ยงเพื่อกำจัดส่วนประกอบของอาหารเลี้ยงเซลล์ที่แช่แข็งออก นำเซลล์ที่ตกตะกอนมาแขวนลอยใหม่ แล้วเทเซลล์ลงในขวดเลี้ยงเซลล์ใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์อยู่ จากนั้น เซลล์จะถูกนำไปเพาะเลี้ยงในตู้เพาะเลี้ยงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง

ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ:

ห้องปฏิบัติการระดับความปลอดภัยทางชีวภาพระดับ 1 เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22

 

ชั้นเซลล์เดี่ยวของเซลล์ HT22 ที่มีความหนาแน่น 30% และ 90% ในวัฒนธรรมเซลล์

ข้อดีและข้อเสียของเซลล์ไลน์ HT22

เซลล์ฮิปโปแคมปัส HT22 มีความเกี่ยวข้องกับข้อดีและข้อเสียบางประการที่ทำให้แตกต่างจากเซลล์ประสาทสายพันธุ์อื่น ๆ ข้อดีและข้อเสียที่โดดเด่นของเซลล์สายพันธุ์นี้ได้ถูกกล่าวถึงไว้ที่นี่

ข้อดี

ข้อดีของสายพันธุ์เซลล์ประสาท HT22 murine คือ:

• อัตราการเติบโตอย่างรวดเร็ว

  เซลล์ HT22 มีเวลาการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่า 15 ชั่วโมง ทำให้สามารถทำการทดลองได้อย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพ และช่วยให้ได้ผลลัพธ์การวิจัยอย่างทันเวลา

• การทำให้เป็นอมตะ

  HT22 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่คงสภาพความเป็นอมตะ ซึ่งช่วยให้สามารถเจริญเติบโตได้อย่างต่อเนื่องเป็นระยะเวลานาน สิ่งนี้ช่วยให้มีเซลล์พร้อมใช้งานอย่างสม่ำเสมอ ลดเวลาและค่าใช้จ่าย และเอื้ออำนวยต่อการทดลองระยะยาวที่ให้ผลลัพธ์ที่สอดคล้องกัน

ข้อเสีย

ข้อเสียของเซลล์ HT22 คือ:

• แหล่งกำเนิดจากหนู

  เซลล์ไลน์ HT22 ถูกแยกมาจากเนื้อเยื่อฮิปโปแคมปัสของสมองหนู ซึ่งอาจไม่สามารถแสดงถึงความซับซ้อนของสรีรวิทยาและพฤติกรรมของเซลล์ประสาทมนุษย์ได้อย่างสมบูรณ์ ส่งผลให้ข้อจำกัดในการนำไปประยุกต์ใช้ในทางคลินิก

 4. วิจัยการประยุกต์ใช้สายพันธุ์เซลล์ HT22

เซลล์ HT22 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยด้านประสาทชีววิทยา การประยุกต์ใช้งานที่มีแนวโน้มดีบางประการของสายพันธุ์เซลล์นี้ได้ถูกกล่าวถึงในส่วนนี้ของบทความ:

• การวิจัยทางประสาทวิทยา: เซลล์ HT22 ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยโรคทางระบบประสาทเสื่อม เช่น โรคอัลไซเมอร์และโรคพาร์กินสัน เซลล์เหล่านี้ถือเป็นเครื่องมือวิจัยที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาความเป็นพิษต่อระบบประสาทและกลไกความเครียดออกซิเดชันที่เกี่ยวข้องกับโรคเหล่านี้ งานวิจัยที่ดำเนินการในปี 2020 พบว่า เส้นทาง PI3K/AKT/CREB มีส่วนเกี่ยวข้องกับพิษต่อเซลล์ประสาทที่เกิดจากภาวะน้ำตาลในเลือดสูงในเซลล์ HT22 [2] ในทำนองเดียวกัน การศึกษาล่าสุดได้เสนอว่า เส้นทาง Nrf2/HO‐1 และแกนสัญญาณ NF-κB มีบทบาทสำคัญในความเป็นพิษของอะไมลอยด์เบต้าต่อเซลล์ HT22 [3]
• การตรวจคัดกรองยา: เซลล์ HT22 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการทดสอบและคัดกรองยา พวกมันช่วยให้นักวิจัยสามารถระบุสารที่มีศักยภาพในการรักษาซึ่งแสดงฤทธิ์ปกป้องระบบประสาท เพื่อใช้ในการต่อสู้กับโรคความเสื่อมของระบบประสาท การศึกษาที่ดำเนินการในปี 2019 ได้สำรวจศักยภาพในการปกป้องระบบประสาทของสารประกอบเตตระไฮโดรเคอร์คูมินในเซลล์ฮิปโปแคมปัส HT22 ที่ได้รับการรักษาด้วยกลูตาเมต ในที่นี้ กลูตาเมตจะกระตุ้นความเครียดออกซิเดชันในเซลล์ HT22 และทำให้เกิดการตายของเซลล์โดยการกระตุ้นโปรตีนไคเนสที่ถูกกระตุ้นด้วยไมโตเจน [4] 

5. ผลงานวิจัยที่นำเสนอเซลล์ HT22

นี่คือเอกสารวิจัยที่น่าสนใจซึ่งเกี่ยวข้องกับเซลล์ไลน์ HT22:

การศึกษาผลในการปกป้องระบบประสาทของโครซินผ่านกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระในเซลล์ HT22 และในหนูที่เป็นโรคอัลไซเมอร์

การศึกษาในวารสาร International Journal of Molecular Medicine (2019) ได้เสนอศักยภาพในการปกป้องระบบประสาทของโครซิน ซึ่งเป็นสารประกอบที่สกัดได้จาก Crocus sativus L. ในเซลล์ HT22 ที่ได้รับความเสียหายจาก L‑กลูตาเมต

อนุพันธ์ออกซินโดลใหม่ป้องกันความตายของเซลล์ที่เกิดจากความเครียดออกซิเดชันในเซลล์ฮิปโปแคมปัส HT22 ของหนู

การตีพิมพ์ในวารสาร Neuropharmacology (2018) รายงานว่าอนุพันธ์ออกซินโดลสามารถป้องกันความตายของเซลล์ HT22 ที่เกิดจากความเครียดออกซิเดชันได้

จินเสโนไซด์ อาร์บ2 ยับยั้งความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจากกลูตาเมตและการตายของเซลล์ประสาทในเซลล์ HT22

งานวิจัยฉบับนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Journal of Ginseng Research ในปี 2019 การศึกษานี้ได้สำรวจฤทธิ์ในการปกป้องระบบประสาทของสารธรรมชาติ กินเซโนไซด์ Rb2 โดยใช้เซลล์ไลน์ HT22 การศึกษาพบว่า ginsenoside rb2 สามารถลดความเครียดออกซิเดชันและการตายของเซลล์ที่เกิดจากกลูตาเมตในเซลล์ฮิปโปแคมปัสของหนู HT22 ได้อย่างมีประสิทธิภาพ

อนุภาคนาโนเงินก่อให้เกิดความเป็นพิษต่อเซลล์ HT22 ผ่านกระบวนการออโตฟาจีและการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส โดยผ่านเส้นทางสัญญาณ PI3K/AKT/mTOR

การศึกษาในสาขาพิษวิทยาสิ่งแวดล้อมและความปลอดภัยทางสิ่งแวดล้อม (2021) นี้ได้ประเมินศักยภาพในการเป็นพิษต่อเซลล์ของอนุภาคนาโนเงินในสายพันธุ์เซลล์ HT22

Ferrostatin-1 ปกป้องเซลล์ HT-22 จากความเป็นพิษจากการออกซิเดชัน

บทความวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในปี 2020 ในวารสารวิจัยการฟื้นฟูระบบประสาท โดยเสนอว่า ferrostatin-1 ซึ่งเป็นตัวยับยั้งกระบวนการ ferroptosis สามารถป้องกันความเป็นพิษจากการออกซิเดชันในเซลล์ฮิปโปแคมปัส HT22

ทรัพยากรสำหรับเซลล์ HT22: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ

แหล่งข้อมูลออนไลน์บางแห่งเกี่ยวกับเซลล์ HT22 อธิบายขั้นตอนการถ่ายโอนยีน การเปลี่ยนแปลงลักษณะเฉพาะ และการเพาะเลี้ยงเซลล์:

• การถ่ายยีน HT22: เอกสารนี้ประกอบด้วยโปรโตคอลที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมสำหรับการถ่ายยีน HT22 ในจานเพาะเลี้ยงเซลล์แบบ 24 หลุมและ 96 หลุม
• การแยกเซลล์ HT22: บทความนี้จะให้คำแนะนำอย่างครอบคลุมเกี่ยวกับโปรโตคอลการแยกเซลล์ HT22

ลิงก์ต่อไปนี้ประกอบด้วยโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22:

• การเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22: ลิงก์นี้จะช่วยให้คุณเรียนรู้ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT22 นอกจากนี้ยังช่วยให้คุณเรียนรู้ขั้นตอนการเหนี่ยวนำให้เกิดความเป็นพิษต่อเซลล์ประสาทในเซลล์
• HT22 hippocampal cells: เว็บไซต์นี้มีข้อมูลที่เป็นประโยชน์มากมายเกี่ยวกับเวลาการเพิ่มจำนวนของเซลล์ HT22, สื่อ, และโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์

เอกสารอ้างอิง

1. เขา, เอ็ม., และคณะ, การเปลี่ยนแปลงลักษณะเฉพาะทำให้เซลล์ประสาท HT22 มีความไวต่อพิษจากภาวะกระตุ้นเกิน. วารสารวิจัยการฟื้นฟูระบบประสาท, 2013. 8(14): หน้า 1297-306.
2. จาง, เอส., และคณะ, ฟิเซตินป้องกันเซลล์ HT22 จากความเป็นพิษต่อระบบประสาทที่เกิดจากน้ำตาลกลูโคสสูงผ่านเส้นทางสัญญาณ PI3K/Akt/CREB. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: หน้า 241.
3. จาง, อาร์.-แอล., และคณะ, ผลการป้องกันของเบอร์เบอรีนต่อความเป็นพิษต่อระบบประสาทที่เกิดจาก β-amyloid ในเซลล์ HT22 ผ่านเส้นทาง Nrf2/HO‐1. ชีวเคมีเชิงชีวภาพ, 2023. 133: หน้า 106-210.
4. Park, C.-H., et al., ฤทธิ์ปกป้องระบบประสาทของเตตระไฮโดรเคอร์คูมินต่อการเกิดความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจากกลูตาเมตในเซลล์ฮิปโปแคมปัส HT22. Molecules, 2019. 25(1): p. 144.