HT22 sejtvonal

Az HT22 egy egér neuronális sejtvonal, amelyet gyakran alkalmaznak az idegtudományi kutatásokban. Értékes segítséget nyújt a neurodegeneratív rendellenességek tanulmányozásában, valamint a potenciális neuroprotektív terápiák vagy kezelések tesztelésében. Ezenkívül az HT22 sejtek glutamátérzékenyek, ezért a glutamát által kiváltott toxicitás vagy idegsejtkárosodás vizsgálatára használják őket.

Ez a cikk a HT22 sejtek legfontosabb jellemzőit mutatja be, amelyek segíthetnek kutatási munkájában. Főként a következőket tárgyalja:

1. Az HT22 sejtek általános tulajdonságai és eredete
2. A HT22 sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
3. A HT22 sejtvonal előnyei és hátrányai
4. A HT22 sejtvonal kutatási alkalmazásai
5. A HT22 sejteket bemutató kutatási publikációk
6. Források az HT22 sejtekhez: protokollok, videók és egyebek

Az HT22 sejtek általános jellemzői és eredete

A cikk ezen része rávilágít a HT22 sejtek eredetére és általános jellemzőire. A sejtvonalon végzett munka megkezdése előtt elengedhetetlen ezeknek az információknak a ismerete. Itt megtudhatja: Mik a HT22 sejtek? Milyen a HT22 hippokampuszsejtek morfológiája? Milyen méretűek a HT22 sejtek?

A HT22 egy folyamatos sejtvonal, amely az egér agy hippokampusz régiójából származik. Ez a szülői HT-4 sejtvonal egyik szubklónja, amelyet egér idegszövetek hőmérsékletérzékeny poliomavírus simian vírus 40 (SV40) T antigénnel történő immortilizálásával fejlesztettek ki.

Ezek a sejtek eltérnek az érett hippokampuszsejtektől, mivel hiányoznak belőlük a glutamát- és kolinerg receptorok, amelyek az érett, hippokampuszból származó idegsejtekben megtalálhatók. Ezért nem alkalmasak memóriával kapcsolatos kutatásokra [1].

A HT22 sejtek epiteliális sejtekhez hasonló megjelenésűek.

Az Alzheimer-kórban az idegsejtek között kialakuló amiloid plakkok.

Az HT22 sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk

Az HT22 sejteket idegtudományi kutató laboratóriumokban használják. A sejtek tenyésztése előtt a kutatók olyan alapvető sejttenyésztési információkat keresnek, amelyek megkönnyítik és hatékonyabbá teszik munkájukat. Ez a szakasz az HT22 sejtek tenyésztésének minden fontos szempontját tárgyalja. Megtudhatja: Mennyi az HT22 sejtek duplázódási ideje? Hogyan tenyésztik az HT22 sejteket? Mi a HT22 sejtkultúra protokollja? Mi a HT22 sejtkultúra táptalaja?

A HT22 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai

Duplázódási idő:

Az HT22 sejtek duplázódási ideje körülbelül 15 óra.

Adherens vagy szuszpenziós:

A HT22 sejtek adhezívek.

Szubkultivációs arány:

A HT22 hippokampuszsejtek szubkultivációs aránya 1:3 és 1:6 között van. Röviden: a táptalajt eltávolítják, és az adhezív sejteket 1 x PBS-sel öblítik le. Accutase diszociáló oldatot adunk a lombikba, és a sejteket 8–10 percig szobahőmérsékleten inkubáljuk. Ezután friss tenyészközegeket adunk hozzá, és a sejteket egy fiolába gyűjtjük centrifugálás céljából. A kapott sejtpelletet óvatosan reszuszpendáljuk, és a sejteket tenyésztés céljából egy tenyésztőlombikba adagoljuk.

Növekedési tápközeg:

A HT22 sejtek tenyésztéséhez DMEM táptalajt használnak. Az optimális sejtnövekedés érdekében 10% FBS-sel, 4,5 g/l glükózzal, 4 mM L-glutaminnal, 1,5 g/l NaHCO3-mal és 1,0 mM nátrium-piruváttal egészítik ki.

Növekedési feltételek:

A HT22 sejtkultúrákat párásított inkubátorban (37 °C hőmérsékleten) tartják, 5% CO₂-ellátással.

Tárolás:

A fagyasztott HT22 sejtek hosszú távon -150 °C alatti hőmérsékleten tárolhatók folyékony nitrogén gőzfázisában vagy ultraalacsony hőmérsékletű elektromos fagyasztóban.

Fagyasztási folyamat és táptalaj:

A HT22 sejtek CM-1 vagy CM-ACF táptalajban, lassú fagyasztási módszerrel fagyaszthatók. Ez a folyamat percenként csak 1 °C-os hőmérsékletcsökkenést engedélyez a mintában, megvédi a sejteket a hőmérséklet-sokktól, és segít megőrizni életképességüket.

Felolvasztási folyamat:

A sejteket 37 °C-os vízfürdőben 40–60 másodpercig olvasztják, amíg csak egy kis jégdarab marad. Ezután tenyészközegeket adnak a sejtekhez, majd centrifugálják őket a fagyasztó közeg összetevőinek eltávolítása érdekében. A sejtpelletet újra szuszpendálják, és a sejteket a tenyészközegeket tartalmazó új lombikba öntik. Ezt követően a sejteket legalább 24 órán át 37 °C-on inkubálják inkubátorban.

Biológiai biztonsági szint:

A HT22 sejtek tenyésztéséhez 1. szintű biológiai biztonsági laboratóriumi körülmények szükségesek.

 

30%-os és 90%-os konfluenciájú HT22 sejtmonorétegek sejtkultúrában.

A HT22 sejtvonal előnyei és hátrányai

A HT22 hippokampuszsejteknek vannak olyan előnyei és hátrányai, amelyek megkülönböztetik őket más idegsejtvonalaktól. A sejtvonal néhány figyelemre méltó előnyét és hátrányát itt említjük.

Előnyök

A HT22 egér idegsejtvonal előnyei a következők:

• Gyors növekedési sebesség

  Az HT22 sejtek duplázódási ideje 15 óra, ami gyors és hatékony kísérletezést tesz lehetővé, és elősegíti a kutatási eredmények időbeni elérését.

• Halhatatlanság

  A HT22 egy halhatatlanná tett sejtvonal, amely hosszú távon biztosítja a folyamatos növekedést. Ez biztosítja a sejtek állandó rendelkezésre állását, csökkenti az idő- és költségráfordítást, valamint elősegíti a hosszú távú kísérleteket, amelyek konzisztens eredményeket hoznak.

Hátrányok

A HT22 sejtek hátrányai a következők:

• Egér eredet

  A HT22 sejtvonal egér agyi hippokampusz szövetéből származik, amely nem feltétlenül tükrözi teljes mértékben az emberi idegsejtek fiziológiájának és viselkedésének komplexitását, ami korlátozza a transzlációs relevanciájukat.

 4. A HT22 sejtvonal kutatási alkalmazásai

Az HT22 sejteket széles körben használják a neurobiológiai kutatásokban. A cikk ezen szakaszában néhány ígéretes alkalmazási területét ismertetjük ennek a sejtvonalnak:

• Idegtudományi kutatás: A HT22 sejteket széles körben alkalmazzák a neurodegeneratív betegségek, azaz az Alzheimer-kór és a Parkinson-kór kutatásában. Értékes kutatási eszköznek tekintik őket az ezekkel a betegségekkel kapcsolatos neurotoxicitás és oxidatív stressz mechanizmusainak tanulmányozásában. A 2020-ban végzett kutatások kimutatták, hogy a PI3K/AKT/CREB útvonal részt vesz a HT22 sejtekben a hiperglikémia által kiváltott idegsejt-toxicitásban [2]. Hasonlóképpen, egy közelmúltbeli tanulmány szerint az Nrf2/HO-1 útvonal és az NF-κB jelátviteli tengely jelentős szerepet játszik a HT22-sejtekben az amiloid-béta toxicitásában [3].
• Gyógyszerszűrés: A HT22 sejteket széles körben használják gyógyszervizsgálati és szűrési célokra. Segítenek a kutatóknak azonosítani azokat a potenciális terápiás szereket, amelyek neuroprotektív hatást fejtenek ki a neurodegeneratív betegségek leküzdésében. Egy 2019-ben végzett tanulmány a tetrahidrokurkumin vegyület neuroprotektív potenciálját vizsgálta glutamáttal kezelt HT22 hippokampuszsejtekben. Ebben a glutamát oxidatív stresszt indukál az HT22 sejtekben, és a mitogén-aktivált proteinkinázok aktiválásával sejthalált okoz [4]. 

5. Az HT22 sejtvonalat bemutató kutatási publikációk

Íme néhány érdekes kutatási cikk, amely az HT22 sejtvonalat tárgyalja:

A krocin antioxidáns hatásainak vizsgálata HT22 sejtekben és Alzheimer-kórban szenvedő egerekben

Az International Journal of Molecular Medicine (2019) folyóiratban megjelent tanulmány a Crocus sativus L.-ből izolált krokinnak az L-glutamát által károsított HT22 sejtekben megnyilvánuló neuroprotektív potenciálját mutatta be.

Újszerű oxindol-származékok megakadályozzák az oxidatív stressz által kiváltott sejthalált egér hippokampusz HT22 sejtjeiben

A Neuropharmacology (2018) folyóiratban megjelent cikk arról számolt be, hogy az oxindol-származékok védelmet nyújtanak az oxidatív stressz által kiváltott HT22 sejtek halála ellen.

A ginsenosid Rb2 gátolja a glutamát által közvetített oxidatív stresszt és az idegsejtek elhalását a HT22 sejtekben

Ez a kutatási cikk 2019-ben jelent meg a Journal of Ginseng Research folyóiratban. A tanulmány egy természetes termék, a ginsenosid Rb2 neuroprotektív hatásait vizsgálta HT22 sejtvonal felhasználásával. A tanulmány megállapította, hogy a ginsenosid Rb2 hatékonyan csökkentette a glutamát által kiváltott oxidatív stresszt és a sejthalált az egér hippokampusz sejtjeiben (HT22).

Az ezüst nanorészecskék autofágián és apoptózison keresztül, a PI3K/AKT/mTOR jelátviteli útvonalon keresztül indukáltak citotoxicitást a HT22 sejtekben

Az Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) folyóiratban megjelent tanulmány az ezüst nanorészecskék citotoxikus potenciálját értékelte a HT22 sejtvonalban.

A ferrosztatin-1 védi a HT-22 sejteket az oxidatív toxicitástól

Ez a kutatási cikk 2020-ban jelent meg a Neural regeneration research című folyóiratban. A cikk azt állította, hogy a ferrosztatin-1, a ferroptózis gátlója, megakadályozza az oxidatív toxicitást a HT22 hippokampuszsejtekben.

Források az HT22 sejtekhez: protokollok, videók és egyebek

Néhány online forrás az HT22 sejtekről ismerteti azok transzfekcióját, differenciálódását és sejtkultúra-protokolljait:

• HT22 transzfekció: Ez a dokumentum egy optimalizált protokollt tartalmaz a HT22 transzfekciójához 24 és 96 üreges sejtkultúra-lemezeken.
• HT22 sejtek differenciálódása: Ez a cikk átfogó útmutatást nyújt az HT22 differenciálódási protokolljáról.

Az alábbi link az HT22 sejtkultúra-protokollt tartalmazza:

• HT22 sejtek szubkultiválása: Ez a link segít megismerni a HT22 sejtvonal szubkultiválási protokollját. Ezenkívül segítséget nyújt a sejtekben a neurotoxicitás indukálására vonatkozó protokoll megismerésében.
• HT22 hippokampuszsejtek: Ez a weboldal számos hasznos információt tartalmaz az HT22 sejtek duplázódási idejéről, a táptalajokról és a sejtkultúra-protokollokról.

Hivatkozások

1. He, M. et al., A differenciálódás hajlamossá teszi a HT22 neuronokat az excitotoxicitásra. Neural Regen Res, 2013. 8(14): 1297–306. o.
2. Zhang, S., et al., A fisetin megakadályozza a HT22 sejtek magas glükózszint által kiváltott neurotoxicitását a PI3K/Akt/CREB jelátviteli útvonalon keresztül. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: 241. o.
3. Zhang, R.-l. és munkatársai, A berberin védő hatása a β-amiloid által kiváltott neurotoxicitás ellen HT22 sejtekben az Nrf2/HO-1 útvonalon keresztül. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: 106–210. o.
4. Park, C.-H. és munkatársai, A tetrahidrokurkumin neuroprotektív hatása a glutamát által kiváltott oxidatív stressz ellen a hippokampusz HT22 sejtjeiben. Molecules, 2019. 25(1): 144. o.