תאי NCI-H1299: מחקר והשלכות קליניות של תאי סרטן הריאה NCI-H1299

NCI-H1299 הוא קו תאים אנושי בלתי מתכלה של סרטן ריאה לא-תאי קטן, הנמצא בשימוש נרחב במחקר בתחום האונקולוגיה החיסונית, סרטן ופיתוח תרופות. בנוסף, חוקרים השתמשו בתאים אלה כדי לחקור את הרגישות לתרופות, מסלולי האיתות הבסיסיים והמנגנונים המולקולריים הקשורים לסרטן הריאה. כמו כן, תאים אלה משמשים לחקר זיהומים נגיפיים כגון SARS-CoV-2.

מאפיינים כלליים ומקור תאי NCI-H1299

הדבר הראשון שיש לדעת על קו תאים הוא מקורו ומאפייניו הכלליים, שכן הם מסייעים לכם לתכנן את השימוש בו במחקר שלכם. חלק זה של המאמר יסייע לכם ללמוד מידע חשוב על מקורם ומאפייניהם של תאי NCI-H1299. לדוגמה, מה הם תאי סרטן הריאה NCI-H1299? מהו סוג התא של NCI-H1299? מהו גודל תאי NCI-H1299? מהו ההבדל בין A549 ל-NCI-H1299?

• קו התאים NCI-H1299 מקורו בגרורה בבלוטת לימפה של הריאה של חולה גבר לבן בן 43 שחלה בסרטן.
• לתאים אלה יש מחיקה חלקית הומוזיגוטית של גן p53; לפיכך, הם אינם מבטאים את חלבון p53. היעדר ביטוי חלבון p53 ב-NCI-H1299 תורם לנטייה לשגשוג של תאי סרטן הריאה H1299.
• מלבד p53, דווח כי לתאים המונצחים הללו יש מוטציה ב-KRAS של NCI-H1299, האחראית על תכונות הצמיחה, ההתפשטות, הנדידה והפלישה שלהם.
• הקריוטיפ של NCI-H1299 קרוב לדיפלואידי.
• לתאי NCI-H1299 יש מורפולוגיה הדומה לתאי אפיתל.
• תאים אלה שטוחים ועוביים פחות מ-5 מיקרומטר.

NCI-H1299 ו-A549

NCI-H1299 ו-A549 הן שורות תאים של סרטן ריאה שאינו קטן. תאי NCI-H1299 הם אגרסיביים ורגישים יותר בהשוואה לתאי A549. לשניהם מוטציות דומות יחסית, כגון KRAS. עם זאת, בניגוד לתאי NCI-H1299, תאי A549 מבטאים את הגן P53.

אנימציה של נגיף ה-SARS-CoV-2 בגוף האדם, המנסה לחדור לתא.

מידע על גידול תאים

תחזוקת תרבית קו תאים אינה קלה עד שתכירו את כל המידע החיוני אודותיה, כולל: מהו זמן הכפלה של NCI-H1299? מהי צפיפות הזריעה של NCI-H1299? מהו מצע התאים של NCI-H1299? כיצד מגדלים קווי תאים מסוג NCI-H1299? סעיף זה יסייע לכם ללמוד את התשובות לכל השאלות הללו בנוגע לגידול תאי NCI-H1299.

נקודות מרכזיות לגידול תאי NCI-H1299

זמן הכפלה:

זמן הכפלה של NCI-H1299 נע בין 22 ל-30 שעות.

תאים דבקים או בתמיסה:

NCI-H1299 הוא קו תאים דבק.

יחס תרבית משנה:

תאי NCI-H1299 עוברים תרבית משנה ביחס מומלץ של 1:3 עד 1:6. לצורך זריעה, תאים דבקים נשטפים ב-PBS 1x ומוחזקים באינקובטור עם תמיסת מעבר Accutase למשך 8 עד 10 דקות בטמפרטורת החדר. לתאים המנותקים מוסיפים מצע גידול טרי ומרכזים אותם. לאחר מכן, משחררים את משקע התאים ומזרימים את התאים לצלחות חדשות המכילות מצע גידול.

מדיום גידול:

RPM1 1640 הוא מצע אידיאלי לתאי NCI-H1299. הוא מועשר ב-10% סרום עגלי, 4500 מ"ג/ל' גלוקוז, 2.0 מ"מ L-גלוטמין, 1 מ"מ פירובט נתרן, 1500 מ"ג/ל' NaHCO3 ו-10 מ"מ HEPES. יש לחדש את התרבית 2–3 פעמים בשבוע.

תנאי גידול:

תרבויות תאי סרטן הריאה NCI-H1299 נשמרות באינקובטור לח בטמפרטורה של 37°C עם אספקת CO₂ של 5%.

אחסון:

ניתן לאחסן את קו התאים NCI-H1299 לטווח ארוך בשלב האדים של חנקן נוזלי או במקפיאים בטמפרטורה נמוכה במיוחד, בטמפרטורה הנמוכה מ-150°C.

תהליך ההקפאה והמדיום:

CM-1 או CM-ACF הם מצעי הקפאה לתאי NCI-H1299. התאים מוקפאים בתהליך הקפאה איטי המאפשר ירידה של מעלה אחת בלבד בטמפרטורה לדקה, כדי לשמור על חיוניות התאים.

תהליך ההפשרה:

תאי NCI-H1299 הקפואים מעורבבים במהירות באמבט מים שחומם מראש לטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 40 עד 60 שניות, עד שנותר רק גוש קרח קטן. לתאים שהופשרו מוסיפים מדיום טרי, וניתן לגדל אותם ישירות בצלחות חדשות או לבצע צנטריפוגה. במקרה הראשון, יש להחליף את המדיום לאחר 24 שעות של אינקובציה. הצנטריפוגה מסייעת להסרת מרכיבי מדיום ההקפאה. לאחר מכן, התאים שנאספו מושעים מחדש במדיום טרי ומועברים לצלחת החדשה לגידול.

רמת בטיחות ביולוגית:

נדרש מעבדה ברמת בטיחות ביולוגית 1 לטיפול בתרבית התאים NCI-H1299.

שכבה חד-תאית צמודה של NCI-H1299 בהגדלה של 20x ו-40x.

רכישת קו תאים NCI-H1299: כלי מחקר איכותיים לחקר הביולוגיה של סרטן הריאה

יתרונות וחסרונות של תאי NCI-H1299

כמו קווי תאים סרטניים אנושיים אחרים, גם ל-NCI-H1299 יש כמה מאפיינים בולטים הקשורים ליתרונות וחסרונות ספציפיים. להלן סיכמנו כמה מהמאפיינים המשמעותיים ביותר.

יתרונות

היתרונות העיקריים של קו התאים NCI-H1299 לסרטן ריאות תאים לא קטנים הם:

• מודל סרטן ריאה במבחנה

  קווי התאים NCI-H1299 פותחו מתוך גרורות בבלוטות הלימפה של קרצינומה של הריאה, ולכן הם בעלי תכונות דומות יחסית. לפיכך, תאים אלה יכולים לשמש כמודל במבחנה לחקר הביולוגיה של סרטן הריאה, המנגנונים התאיים והמולקולריים, וכן לסינון ובדיקה של טיפולים פוטנציאליים.

• קלות גידול

  תאי NCI-H1299 קלים לגידול ולתחזוקה במעבדת מחקר. אין דרישות או נהלים מסובכים לגידול התאים.

• מוטציות ב-P53 וב-KRAS בקו NCI-H1299

  בתאי NCI-H1299 חסרה ביטוי הגן p53, מה שמאפשר לתאים להתרבות בקצב מהיר. בנוסף, הם נושאים מוטציה ב-KRAS התורמת לצמיחת התאים, להתרבותם, לפלישתם ולנדידתם. לאור זאת, חוקרים משתמשים בתאי H1299 לחקר מנגנונים מולקולריים הקשורים למוטציות ב-KRAS וב-P53.

חסרונות

החסרונות של תאי NCI-H1299 הם:

• ספציפיות רקמתית

  תאי NCI-H1299 מקורם ברקמת ריאה. לפיכך, תחום היישום שלהם מוגבל בעיקר למחקר על קרצינומה של הריאה. ייתכן שהם אינם מייצגים באופן מלא את ההטרוגניות ואת המאפיינים הכלליים של סוגי סרטן אחרים.

יישומים מחקריים של תאי NCI-H1299

קו התאים NCI-H1299 נמצא בשימוש נרחב במחקר סרטן הריאה. להלן מספר יישומים מבטיחים של קו תאים זה.

• ביולוגיה של הסרטן: תאי NCI-H1299 משמשים ככלי מחקרי מצוין לחקר התפתחות הסרטן, התקדמותו והמנגנונים התאיים והמולקולריים הקשורים אליו. תאים אלה נושאים מוטציות מסוימות, מה שמאפשר לחוקרים לחקור התנהגויות של תאי סרטן, מסלולי איתות ופרופילי ביטוי גנים הקשורים לכך. מספר מחקרים השתמשו בקו התאים NCI-H1299 של קרצינומה של ריאה שאינה קטנה-תאית כדי לחקור את הביולוגיה של סרטן הריאה. לדוגמה, מחקר שנערך בשנת 2018 בחן את מסלול האיתות המעורב באפופטוזיס של תאי סרטן הריאה באמצעות תאי NCI-H1299. החוקרים גילו כי מסלול ה-PI3K/AKT תורם לשגשוג התאים, וכי עיכובו עלול לגרום למוות של תאי הסרטן [1]. כמו כן, מחקר אחר בחן את המנגנונים המעורבים במעבר האפיתליאלי-מזנכימלי (EMT) של NCI-H1299. מחקר זה הציע כי חלבון חוץ-תאי בשם SPARC (חלבון מופרש חומצי ועשיר בציסטאין) תורם ל-EMT ולנדידה של NCI-H1299, ובכך מקדם את היווצרות הגידול בתאים — חלבון ה-SPARC משמש כמתווך של איתות TGF-β1 [2]. 

• גילוי תרופות וסינון: NCI-H1299, קו תאים של סרטן ריאה אנושי, נמצא בשימוש נרחב להערכת הרעילות והיעילות של תרופות פוטנציאליות. בנוסף, הוא משמש חוקרים לחקירת מנגנון הפעולה של תרופות אנטי-סרטניות. במחקרים נעשה שימוש בתאים אלה גם לזיהוי מטרות פוטנציאליות לתרופות ומנגנוני עמידות. לדוגמה, מחקר שנערך על ידי Xiao-Yun Shen ועמיתיו בחן את הפוטנציאל האנטי-סרטני של התרכובת הטבעית ברוסיין D (BD). הממצאים העלו כי BD מעכב באופן משמעותי את השגשוג, הפלישה והנדידה של תאי NCI-H1299. לפיכך, ניתן לראות בו טיפול משלים פוטנציאלי לטיפול בקרצינומה של ריאות מסוג תאים לא קטנים [3]. באופן דומה, מחקר העריך את ההשפעות הציטוטוקסיות של קסנטוהומול לבדו ובשילוב עם התרופה הכימותרפית ציספלטין על תאי סרטן הריאה NCI-H1299 [4].

פרסומים מחקריים העוסקים בתאי NCI-H1299

להלן מספר פרסומים מחקריים משמעותיים ומצוטטים ביותר אודות קו התאים NCI-H1299 של קרצינומה ריאתית.

השראת אפופטוזיס בתאי סרטן הריאה H1299 שטופלו באינדול-3-קרבינול באמצעות העלאת רמות ה-ROS

מאמר זה פורסם בכתב העת Human and Experimental Toxicology (2021). המחקר הציע כי אינדול-3-קרבינול מעורר אפופטוזיס בתאי H1299 באמצעות העלאת רמות המינים החמצוניים התגובתיים (ROS).

פעילות אנטי-סרטנית סינרגטית של שימוש משולב בחומצה קפאית עם פקליטקסל מגבירה את האפופטוזיס בתאי סרטן ריאה לא-תאיים מסוג H1299 in vivo ו-in vitro

מחקר זה פורסם בשנת 2018 בכתב העת "Cellular Physiology and Biochemistry". ממצאי המחקר חשפו כי השילוב של חומצה קפאית ופקליטקסל מפעיל אפקט אנטי-סרטני סינרגטי בקו תאים של סרטן ריאה לא-תאי קטן, NCI-H1299.

ההשפעות האנטי-סרטניות של Tubeimoside-1 בתאי NCI-H1299 מתווכות על ידי השבתה של מסלול האיתות VEGF-A/VEGFR-2/ERK המושרה על ידי microRNA-126-5p

מאמר מחקר זה פורסם בכתב העת "Molecular Medicine Reports" (2018). המחקר העריך את ההשפעה האנטי-סרטנית של Tubeimoside-1, ספונין טריטרפנואידי, ואת המנגנונים העומדים בבסיסה בקו התאים NCI-H1299.

פריסטימרין (Pristimerin) מעורר אפופטוזיס ומעכב התרבות ונדידה בתאי סרטן ריאה H1299

מאמר זה, שפורסם ב-Journal of Cancer (2020), הציע כי פריסטימרין, תרכובת טבעית, מדכא את השגשוג והנדידה של תאי NCI-H1299.

המנגנון של הגן VIPR1 בוויסות תאי אדנוקרצינומה של הריאה האנושית H1299

מחקר זה, שפורסם ב-Medical Oncology (2019), בחן את ההשפעות הפוטנציאליות של ביטוי-יתר של הגן VIPR1 על קו התאים NCI-H1299 של אדנוקרצינומה.

משאבים עבור קו התאים NCI-H1299: פרוטוקולים, סרטונים ועוד

להלן מספר משאבים מקוונים העוסקים בתאי NCI-H1299.

• טרנספקציה של NCI-H1299: סרטון זה מסביר את הפרוטוקול לטרנספקציה זמנית של קווי תאים מסוג NCI-H1299.
• התרבות משנה של קו תאים דבקים: סרטון זה יסייע לכם ללמוד את ההליך הכללי של התרבות משנה עבור קו תאים דבקים.

הקישור הבא מכיל מידע על תרבית תאים עבור תאי NCI-H1299. 

• קו תאים NCI-H1299: קישור זה יסייע לכם ללמוד על פרוטוקול העברת הדורות והטרנספקציה של תאי NCI-H1299.

שאלות נפוצות אודות קו תאים NCI-H1299

ביבליוגרפיה

1. Gu, J., et al., מחקר על אפופטוזיס המושרה על ידי EGCG בתאי סרטן ריאה באמצעות עיכוב מסלול האיתות PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): עמ' 4557-4563.
2. Sun, W., et al., SPARC פועל כמתווך של TGF‐β1 בקידום המעבר האפיתליאלי-מזנכימלי בתאי סרטן ריאה מסוג A549 ו-H1299. Biofactors, 2018. 44(5): עמ' 453-464.
3. Shen, X.-Y., et al., מחקר על המנגנון של ברוסיין D בטיפול בתאי סרטן ריאה לא-תאיים מסוג H1299. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): עמ' 500.
4. לונג, ב., ואח', השפעות ציטוטוקסיות של קסנטוהומול ושילובו עם ציספלטין על תאי סרטן ריאה גרורתי אנושי מסוג H1299. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): עמ' 1-15.