เซลล์ NCI-H1299: การวิจัยและนัยสำคัญทางคลินิกของเซลล์มะเร็งปอด NCI-H1299

NCI-H1299 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งปอดชนิดเซลล์ไม่เล็กของมนุษย์ที่ถูกทำให้เป็นอมตะ ซึ่งถูกใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยด้านภูมิคุ้มกันมะเร็ง มะเร็ง และการค้นคว้ายา นอกจากนี้ นักวิจัยยังใช้เซลล์เหล่านี้ในการศึกษาความไวต่อยา เส้นทางสัญญาณพื้นฐาน และกลไกระดับโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งปอด นอกจากนี้ เซลล์เหล่านี้ยังถูกนำมาใช้ในการศึกษาการติดเชื้อไวรัส เช่น SARS-CoV-2

ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ NCI-H1299

สิ่งแรกที่ควรทราบเกี่ยวกับสายเซลล์คือแหล่งกำเนิดและลักษณะทั่วไป เนื่องจากข้อมูลเหล่านี้จะช่วยให้คุณวางแผนการใช้งานในการวิจัยได้อย่างเหมาะสม ส่วนนี้จะช่วยให้คุณได้เรียนรู้ข้อมูลสำคัญเกี่ยวกับแหล่งกำเนิดและลักษณะของ NCI-H1299 เช่น เซลล์มะเร็งปอด NCI-H1299 คืออะไร? เซลล์ชนิดใดคือ NCI-H1299? ขนาดของเซลล์ NCI-H1299 คืออะไร? ความแตกต่างระหว่าง A549 และ NCI-H1299 คืออะไร?

• สายพันธุ์เซลล์ NCI-H1299 มีต้นกำเนิดจากการแพร่กระจายของต่อมน้ำเหลืองในปอดของผู้ป่วยชายชาวคอเคเชียนอายุ 43 ปีที่เป็นมะเร็ง
• เซลล์เหล่านี้มีการลบยีน p53 บางส่วนแบบโฮโมไซกัส ดังนั้นจึงไม่แสดงโปรตีน p53 การขาดการแสดงโปรตีน p53 ในเซลล์ NCI-H1299 ส่งเสริมแนวโน้มการเพิ่มจำนวนของเซลล์มะเร็งปอด H1299
• นอกจาก p53 แล้ว เซลล์อมตะเหล่านี้ยังรายงานว่ามีการกลายพันธุ์ของ NCI-H1299 KRAS ซึ่งรับผิดชอบต่อการเจริญเติบโต การเพิ่มจำนวน การเคลื่อนที่ และการบุกรุกของพวกมัน
• NCI-H1299 คะบิไทป์ใกล้เคียงกับไดพลอยด์
• เซลล์ NCI-H1299 มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาคล้ายเซลล์เยื่อบุผิว
• เซลล์เหล่านี้มีลักษณะแบนและมีความหนาต่ำกว่า 5 ไมโครเมตร

NCI-H1299 และ A549

NCI-H1299 และ A549 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งปอดชนิดไม่เล็ก เซลล์ NCI-H1299 มีความก้าวร้าวและไวต่อสารมากกว่าเซลล์ A549 ทั้งสองชนิดมีการกลายพันธุ์ที่คล้ายคลึงกัน เช่น KRAS อย่างไรก็ตาม ต่างจากเซลล์ NCI-H1299 ที่เซลล์ A549 แสดงออกของยีน P53

ภาพเคลื่อนไหวของไวรัส SARS-Cov-2 ในร่างกายมนุษย์ขณะพยายามเข้าสู่เซลล์

การเพาะเลี้ยงข้อมูล

การดูแลรักษาเซลล์ไลน์ให้คงอยู่ไม่ใช่เรื่องง่ายจนกว่าคุณจะทราบข้อมูลสำคัญทั้งหมดเกี่ยวกับเซลล์ไลน์นั้น รวมถึง: เวลาการเพิ่มจำนวนของ NCI-H1299 คืออะไร? ความหนาแน่นในการเพาะเลี้ยงของ NCI-H1299 คืออะไร? อะไรคือสื่อเพาะเลี้ยงเซลล์ NCI-H1299? คุณจะเพาะเลี้ยงสายพันธุ์เซลล์ NCI-H1299 ได้อย่างไร? ส่วนนี้จะช่วยให้คุณเรียนรู้คำตอบสำหรับคำถามทั้งหมดเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ NCI-H1299

จุดสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ NCI-H1299

เวลาสองเท่า:

เวลาสองเท่าของ NCI-H1299 อยู่ระหว่าง 22-30 ชั่วโมง

ติดกันหรือแขวนลอย:

NCI-H1299 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่เกาะติด

อัตราส่วนการเพาะปลูกย่อย:

เซลล์ NCI-H1299 ถูกเพาะเลี้ยงต่อในอัตราส่วนที่แนะนำ 1:3 ถึง 1:6 สำหรับการเพาะเลี้ยง ให้ล้างเซลล์ที่เกาะติดด้วย 1x PBS และบ่มด้วยสารละลาย Accutase สำหรับการแยกเซลล์เป็นเวลา 8 ถึง 10 นาที ที่อุณหภูมิห้อง เซลล์ที่แยกตัวแล้วจะถูกเติมด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่และนำไปปั่นเหวี่ยง จากนั้นนำตะกอนเซลล์ที่ตกตะกอนมาแขวนลอยใหม่ แล้วเทเซลล์ลงในขวดเลี้ยงเชื้อใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อสำหรับการเจริญเติบโต

อาหารเลี้ยงเชื้อ:

RPM1 1640 เป็นอาหารเลี้ยงเซลล์ที่เหมาะสมสำหรับเซลล์ NCI-H1299 เสริมด้วยเซรั่มจากตัวอ่อนวัว 10%, กลูโคส 4500 มก./ลิตร, แอล-กลูตามีน 2.0 มิลลิโมลาร์, โซเดียมไพรูเวต 1 มิลลิโมลาร์, โซเดียมไบคาร์บอเนต 1500 มก./ลิตร และ HEPES 10 มิลลิโมลาร์ สื่อควรได้รับการเปลี่ยนใหม่ทุก 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์

เงื่อนไขการเจริญเติบโต:

เซลล์มะเร็งปอด NCI-H1299 ถูกเลี้ยงในตู้บ่มเพาะที่มีความชื้นที่อุณหภูมิ 37°C พร้อมกับการจ่ายก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5%

การเก็บรักษา:

สายพันธุ์เซลล์ NCI-H1299 สามารถเก็บรักษาในสถานะไอของไนโตรเจนเหลวหรือในตู้แช่แข็งอุณหภูมิต่ำพิเศษที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150°C ได้ในระยะยาว

กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง:

CM-1 หรือ CM-ACF เป็นอาหารเลี้ยงเซลล์สำหรับการแช่แข็งของเซลล์ NCI-H1299 เซลล์จะถูกแช่แข็งโดยใช้กระบวนการแช่เย็นช้า ซึ่งอนุญาตให้อุณหภูมิลดลงเพียง 1 องศาต่อนาทีเท่านั้น เพื่อปกป้องความมีชีวิตของเซลล์

กระบวนการละลาย

นำเซลล์ NCI-H1299 ที่ถูกแช่แข็งมาเขย่าอย่างรวดเร็วในอ่างน้ำอุ่นที่อุ่นไว้ล่วงหน้าที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 40 ถึง 60 วินาที จนเหลือเพียงก้อนน้ำแข็งขนาดเล็ก เซลล์ที่ละลายแล้วจะถูกเติมด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่และสามารถนำไปเพาะเลี้ยงในขวดเลี้ยงเชื้อใหม่หรือปั่นเหวี่ยงได้โดยตรง ในกรณีแรก ควรเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเชื้อหลังจากบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง การปั่นเหวี่ยงจะช่วยกำจัดองค์ประกอบของอาหารเลี้ยงเชื้อที่แข็งตัวจากการแช่แข็ง หลังจากนั้น เซลล์ที่เก็บได้จะถูกแขวนลอยในอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่และแบ่งใส่ขวดเลี้ยงเชื้อใหม่เพื่อเพาะเลี้ยงต่อไป

ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ:

ห้องปฏิบัติการความปลอดภัยทางชีวภาพระดับ 1 จำเป็นต้องใช้ในการจัดการกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ NCI-H1299

ชั้นเดียวของเซลล์ NCI-H1299 ที่เกาะติดกัน ที่กำลังขยาย 20 เท่า และ 40 เท่า

ซื้อสายพันธุ์เซลล์ NCI-H1299: เครื่องมือวิจัยคุณภาพสูงสำหรับการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งปอด

ข้อดีและข้อเสียของเซลล์ NCI-H1299

เช่นเดียวกับเซลล์มะเร็งชนิดอื่น ๆ NCI-H1299 ก็มีลักษณะเฉพาะบางประการที่เกี่ยวข้องกับข้อดีและข้อเสียที่เฉพาะเจาะจงเช่นกัน ในที่นี้ เราได้สรุปลักษณะสำคัญบางประการไว้

ข้อดี

ข้อได้เปรียบหลักของเซลล์ไลน์มะเร็งปอดชนิดเซลล์ไม่เล็ก NCI-H1299 ได้แก่:

• แบบจำลองมะเร็งปอดในหลอดทดลอง

  เซลล์ไลน์ NCI-H1299 ถูกพัฒนาขึ้นจากการแพร่กระจายของมะเร็งปอดไปยังต่อมน้ำเหลือง ดังนั้นเซลล์เหล่านี้จึงมีคุณสมบัติที่คล้ายคลึงกันในระดับหนึ่ง ด้วยเหตุนี้ เซลล์เหล่านี้จึงสามารถใช้เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองเพื่อศึกษาชีววิทยาของมะเร็งปอด กลไกระดับเซลล์และโมเลกุล รวมถึงการคัดกรองและทดสอบยาที่มีศักยภาพในการรักษา

• เพาะเลี้ยงง่าย

  เซลล์ NCI-H1299 สามารถเพาะเลี้ยงและดูแลรักษาในห้องปฏิบัติการวิจัยได้อย่างง่ายดาย ไม่มีข้อกำหนดหรือขั้นตอนในการเพาะเลี้ยงเซลล์ที่ยุ่งยาก

• NCI-H1299 P53 และ NCI-H1299 การกลายพันธุ์ KRAS

  เซลล์ NCI-H1299 ขาดการแสดงออกของยีน p53 ซึ่งทำให้เซลล์สามารถเพิ่มจำนวนได้อย่างรุนแรง นอกจากนี้ พวกมันยังมีการกลายพันธุ์ของ KRAS ที่ช่วยส่งเสริมการเจริญเติบโต การเพิ่มจำนวน การรุกราน และการเคลื่อนที่ของเซลล์ เมื่อพิจารณาจากปัจจัยเหล่านี้ นักวิจัยจึงใช้เซลล์ H1299 เพื่อศึกษาวิถีโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการกลายพันธุ์ของ KRAS และ P53

ข้อเสีย

ข้อเสียของเซลล์ NCI-H1299 คือ:

• ความจำเพาะของเนื้อเยื่อ

  NCI-H1299 มีต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อปอด ดังนั้น การนำไปใช้จึงจำกัดอยู่เพียงการวิจัยมะเร็งปอดเท่านั้น อาจไม่สามารถแทนความหลากหลายและลักษณะทั่วไปของมะเร็งชนิดอื่น ๆ ได้อย่างสมบูรณ์

การประยุกต์ใช้เซลล์ NCI-H1299 ในการวิจัย

สายพันธุ์เซลล์ NCI-H1299 ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการวิจัยมะเร็งปอด การประยุกต์ใช้งานที่มีแนวโน้มดีบางประการของสายพันธุ์เซลล์นี้ได้กล่าวถึงไว้ที่นี่

• ชีววิทยาของมะเร็ง: เซลล์ NCI-H1299 เป็นเครื่องมือวิจัยที่ยอดเยี่ยมในการศึกษาการพัฒนา การลุกลาม และกลไกที่เกี่ยวข้องกับเซลล์และระดับโมเลกุลของมะเร็ง เซลล์เหล่านี้มีการกลายพันธุ์บางชนิด ทำให้ผู้วิจัยสามารถศึกษาพฤติกรรมของเซลล์มะเร็งที่เกี่ยวข้อง เส้นทางสัญญาณ และรูปแบบการแสดงออกของยีนได้ มีการศึกษาหลายฉบับที่ใช้เซลล์ไลน์มะเร็งปอดชนิดเซลล์ไม่เล็ก NCI-H1299 เพื่อศึกษาชีววิทยาของมะเร็งปอด ตัวอย่างเช่น การศึกษาที่ดำเนินการในปี 2018 ได้ตรวจสอบเส้นทางการส่งสัญญาณที่เกี่ยวข้องกับการตายของเซลล์มะเร็งปอดโดยใช้เซลล์ NCI-H1299 นักวิจัยพบว่าเส้นทาง PI3K/AKT มีส่วนช่วยในการเพิ่มจำนวนเซลล์ และการยับยั้งเส้นทางนี้สามารถทำให้เกิดการตายของเซลล์มะเร็งได้ [1] ในทำนองเดียวกัน งานวิจัยอีกชิ้นหนึ่งได้ศึกษาถึงกลไกที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนผ่านจากเซลล์เยื่อบุผิวเป็นเซลล์มีเซนไคม์ (EMT) ในเซลล์ NCI-H1299 การศึกษานี้เสนอว่าโปรตีนนอกเซลล์ SPARC (โปรตีนที่หลั่งออกมาที่มีความเป็นกรดและอุดมไปด้วยซิสเทอีน) มีส่วนช่วยในกระบวนการ EMT และการเคลื่อนที่ของเซลล์ NCI-H1299 ซึ่งส่งเสริมการเกิดเนื้องอกในเซลล์ โดยโปรตีน SPARC ทำหน้าที่เป็นตัวกลางในการส่งสัญญาณของ TGF-β1 [2] 

• การค้นพบและคัดกรองยา: NCI-H1299 ซึ่งเป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งปอดของมนุษย์ ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในการประเมินความเป็นพิษและประสิทธิภาพของยาที่มีศักยภาพ นอกจากนี้ นักวิจัยยังใช้เซลล์นี้ในการศึกษาวิถีการออกฤทธิ์ของยาต้านเนื้องอกอีกด้วย การศึกษาวิจัยยังได้ใช้เซลล์เหล่านี้เพื่อระบุเป้าหมายยาที่เป็นไปได้และกลไกการดื้อยา ตัวอย่างเช่น งานวิจัยที่ดำเนินการโดยเซียว-หยุน เฉิน และคณะ ได้ศึกษาศักยภาพในการต้านมะเร็งของสารประกอบธรรมชาติบรูซีน ดี (BD) ผลการวิจัยพบว่า BD สามารถยับยั้งการเพิ่มจำนวน การรุกราน และการเคลื่อนที่ของเซลล์ NCI-H1299 ได้อย่างมีนัยสำคัญ ดังนั้น จึงอาจถือได้ว่าเป็นการรักษาเสริมที่มีศักยภาพสำหรับมะเร็งปอดชนิดเซลล์ไม่เล็ก [3] ในทำนองเดียวกัน มีการศึกษาที่ประเมินผล cytotoxic ของ xanthohumol เพียงอย่างเดียวและเมื่อใช้ร่วมกับยาเคมีบำบัด cisplatin ต่อเซลล์มะเร็งปอด NCI-H1299 [4]

การตีพิมพ์งานวิจัยที่มีการใช้เซลล์ NCI-H1299

งานวิจัยที่สำคัญและได้รับการอ้างอิงมากที่สุดเกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์มะเร็งปอด NCI-H1299 มีดังนี้

การเหนี่ยวนำให้เกิดอะพอพโทซิสในเซลล์มะเร็งปอด H1299 ที่ได้รับการรักษาด้วยอินโดล-3-คาร์บินอล ผ่านการเพิ่มระดับ ROS

บทความนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Human and Experimental Toxicology (2021) การศึกษานี้เสนอว่าอินโดล-3-คาร์บินอลกระตุ้นการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสในเซลล์ H1299 ผ่านการเพิ่มระดับของอนุมูลอิสระออกซิเจน (ROS)

กิจกรรมต้านมะเร็งแบบเสริมฤทธิ์ของการใช้กรดคาเฟอิกร่วมกับแพคลิแทกเซลช่วยเพิ่มการตายของเซลล์มะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์ขนาดเล็ก H1299 ทั้งในร่างกายและในหลอดทดลอง

งานวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในปี 2018 ในวารสาร Cellular Physiology and Biochemistry ผลการวิจัยพบว่ากรดคาเฟอิกและแพคคลิแทกเซลเมื่อใช้ร่วมกันมีฤทธิ์เสริมฤทธิ์กันในการต้านมะเร็งในเซลล์มะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์เล็ก สายพันธุ์ NCI-H1299

ผลต้านเนื้องอกของ Tubeimoside-1 ในเซลล์ NCI-H1299 เกิดจากการยับยั้งการทำงานของวิถีสัญญาณ VEGF-A/VEGFR-2/ERK ที่ถูกกระตุ้นโดย microRNA-126-5p

บทความวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Molecular Medicine Reports (2018) การศึกษานี้ประเมินผลต้านเนื้องอกของทูบิโมไซด์-1 ซึ่งเป็นซาโปนินไตรเทอร์พีนอยด์ และกลไกพื้นฐานในเซลล์ไลน์ NCI-H1299

Pristimerin กระตุ้นการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสและยับยั้งการเพิ่มจำนวนและการเคลื่อนที่ของเซลล์มะเร็งปอดสายพันธุ์ H1299

บทความนี้ซึ่งตีพิมพ์ในวารสารมะเร็ง (2020) เสนอว่า Pristimerin ซึ่งเป็นสารประกอบธรรมชาติสามารถยับยั้งการเพิ่มจำนวนและการเคลื่อนที่ของเซลล์ NCI-H1299

กลไกของยีน VIPR1 ในการควบคุมเซลล์มะเร็งปอดชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา H1299 ของมนุษย์

การศึกษานี้ในสาขาเนื้องอกวิทยาทางการแพทย์ (2019) ได้สำรวจผลกระทบที่อาจเกิดขึ้นจากการแสดงออกของยีน VIPR1 ที่มากเกินไปต่อเซลล์อะดีโนคาร์ซิโนมาสายพันธุ์ NCI-H1299

ทรัพยากรสำหรับสายเซลล์ NCI-H1299: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ

นี่คือแหล่งข้อมูลออนไลน์ที่มีเซลล์ NCI-H1299

• การถ่ายยีนชั่วคราวในเซลล์ NCI-H1299: วิดีโอนี้จะอธิบายขั้นตอนการทำโปรโตคอลการถ่ายยีนชั่วคราวสำหรับเซลล์สายพันธุ์ NCI-H1299
• การเพาะเลี้ยงเซลล์สายพันธุ์ที่เกาะติด: วิดีโอนี้จะช่วยให้คุณเรียนรู้ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงเซลล์สายพันธุ์ที่เกาะติดทั่วไป

ลิงก์ต่อไปนี้ประกอบด้วยข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์สำหรับเซลล์ NCI-H1299 

• สายพันธุ์เซลล์ NCI-H1299: ลิงก์นี้สามารถช่วยให้คุณทราบเกี่ยวกับขั้นตอนการเพาะเลี้ยงและการถ่ายโอนสายพันธุ์เซลล์ NCI-H1299

คำถามที่พบบ่อยเกี่ยวกับสายเซลล์ NCI-H1299

เอกสารอ้างอิง

1. Gu, J., และคณะ, การศึกษาการเหนี่ยวนำให้เกิดอะพอพโทซิสของเซลล์มะเร็งปอดโดย EGCG ผ่านการยับยั้งเส้นทางสัญญาณ PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): หน้า 4557-4563.
2. ซุน, ดับเบิลยู., และคณะ, SPARC ทำหน้าที่เป็นตัวกลางของ TGF-β1 ในการส่งเสริมการเปลี่ยนแปลงจากเซลล์เยื่อบุผิวเป็นเซลล์มีเซนไคม์ในเซลล์มะเร็งปอด A549 และ H1299. Biofactors, 2018. 44(5): หน้า 453-464.
3. Shen, X.-Y., และคณะ, การศึกษาเกี่ยวกับกลไกของบรูซีน ดี ในการรักษาเซลล์มะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์เล็ก H1299. วารสารการแพทย์แผนจีนดั้งเดิมของโลก, 2020. 6(4): หน้า 500.
4. Long, B., et al., ฤทธิ์ความเป็นพิษต่อเซลล์ของแซนโธฮิวโมลและการใช้ร่วมกับซิสพลาตินต่อเซลล์มะเร็งปอดระยะแพร่กระจายในมนุษย์สายพันธุ์ H1299. วารสารความก้าวหน้าทางการแพทย์และการวิจัยทางการแพทย์, 2019. 30(9): หน้า 1-15.