01General information
- Description
A HBL-52 é uma linhagem celular humana derivada de um meningioma de transição de grau I, localizado especificamente no canal óptico. Essa linhagem celular tem origem em uma paciente adulta do sexo feminino e apresenta morfologia de tipo epitelial. Os meningiomas são, tipicamente, tumores benignos que se originam das meninges, as camadas membranosas que envolvem o cérebro e a medula espinhal. O subtipo transicional representa uma categoria histológica na qual as células tumorais apresentam uma mistura de características fibrosas e meningoteliais.
Estudos recentes destacaram a resposta das células HBL-52 ao resveratrol, um polifenol natural com propriedades anti-inflamatórias e anticancerígenas significativas. Verificou-se que o resveratrol inibe a proliferação nas células de meningioma HBL-52, sugerindo um potencial papel terapêutico no manejo ou tratamento de meningiomas, particularmente aqueles localizados em áreas críticas como o canal óptico. Essa inibição da proliferação celular destaca a utilidade da HBL-52 na pesquisa farmacológica e nos testes de medicamentos, fornecendo um modelo valioso para avaliar a eficácia de compostos que possam influenciar a dinâmica de crescimento do tumor. Dada sua origem e natureza benigna, a linhagem celular HBL-52 é um modelo valioso para o estudo da patogênese do meningioma, particularmente na compreensão dos comportamentos celulares e dos mecanismos moleculares subjacentes ao desenvolvimento e à progressão de meningiomas em locais anatômicos específicos, como o canal óptico.
- Tissue
- Cérebro
- Disease
- Meningioma, células benignas
- Synonyms
- HBL 52
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
04Identifiers
- Citation
- HBL-52 (número de catálogo da Cytion 300188)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_4220
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- DP (desmoplaquina) +, PG (placoglobina) +, PP1 -, PP2 +, PP3 - (PP = placofilina), Dsc1 -, Dsc2 +, Dsc3 + (Dsc = desmocolina), Dsg1 -, Dsg2 +, Dsg3 - (Dsg = desmogleína), N-caderina +, PGP2 +.
06Handling and culture
- Culture medium
- McCoys 5a, p: 3,0 g/L de glicose, p: glutamina estável, p: 2,0 mM de piruvato de sódio, p: 2,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820200a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Seeding density
- 5 × 10³ células/cm² formarão uma camada confluente em cerca de 4 dias. Não se recomenda o uso de densidades de semeadura superiores a 9 × 10³ células/cm².
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Post-thaw recovery
- Deixe as células aderirem por pelo menos 24 a 48 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos 50% de meio basal + 40% de FBS + 10% de DMSO, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 47 anos
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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